Aqui, apresentamos um protocolo para obter um grande campo de visão (FOV) tridimensional (3D) fluorescência e imagem retiniana OCT usando uma romance plataforma multimodal de imagens. Apresentaremos na configuração do sistema, o método de alinhamento e os protocolos operacionais. Imagem latente na vivo será demonstrada, e serão fornecidos resultados representativos.
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Artigo de método
Multimodal volumétrico Retinal Imaging pelo oblíquo digitalização Laser Oftalmoscopia (oSLO) e a tomografia de coerência óptica (OCT)
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Enquanto imagens de fluorescência é amplamente utilizada em oftalmologia, uma grande campo de visão (FOV) da imagem retiniana tridimensional (3D) de fluorescência é ainda um grande desafio com o estado-da-arte retinal imaging modalidades porque eles exigiria z-empilhamento para Compile um conjunto de dados volumétrico. Nova tomografia de coerência óptica (OCT) e sistemas de angiografia (OCTA) OCT superar estas restrições para fornecer imagens tridimensionais (3D) anatômicas e vasculares, mas a natureza sem corantes da OCT não pode visualizar o escapamento indicativo de vascular disfunção. Este protocolo descreve um romance oblíquo verificação técnica de laser Oftalmoscopia (oSLO) que fornece a imagem da retina de fluorescência volumétrico 3D. A instalação do sistema de geração de imagens gera o oblíquo digitalização por um botão deslizante cauda de pomba e alinha o sistema final de imagem em um ângulo para detectar imagens transversais fluorescentes. O sistema usa o método de exploração do laser e portanto, permite uma fácil incorporação de OCT como uma modalidade de imagem estrutural volumétrica complementar. In vivo da imagem na retina do rato é demonstrada aqui. Solução de fluoresceína é injetada por via intravenosa para produzir angiografia fluoresceína volumétrico (AGV).
Introdução
Oftalmologia e visão ciência beneficiar muito das modernas técnicas de imagem ópticas, uma vez que a retina pode ser facilmente acessada com luz. Imagem latente retinal da fluorescência é uma ferramenta essencial no diagnóstico e na gestão de choriorétiniennes doenças vasculares tais como a retinopatia diabética (DR) e degeneração macular relacionada à idade (DMRI), ambos os quais são principais causas de cegueira nos Estados Unidos.
No entanto, é ainda um desafio para adquirir um grande campo de visão (FOV), tridimensional imagem usando imagens de fluorescência da retina (3D). Fotografia do fundo não tem a capacidade de resolução de profun....
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Protocolo
Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo Comitê de uso (ACUC) de Boston Medical Center e cuidado Animal.
1. configuração do sistema
- Sistema de oSLO
- Use uma fonte de laser de supercontinuum como a fonte de sistema laser.
- Separe a gama de luz visível (450 a 650 nm) do intervalo de comprimento de onda maior (650-2000 nm) por um espelho dicroico (DM1). Expanda o espectro com um par de Prismas dispersivos após o feixe passa através de um divisor de feixe de polarização (PBS).
- Lugar uma fenda para selecionar o intervalo de comprimento de onda de excitação (475-495 nm). Use um espelho reflector par....
- Use uma fonte de laser de supercontinuum como a fonte de sistema laser.
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Resultados
Figura 4a mostra uma imagem de OCT transversal de uma retina do rato. Figura 4b -4 c mostram as mesmas imagens transversais da retina de vFA OCTA e oSLO adquiridos ao mesmo tempo. O oSLO permite transversal FA análoga para o B-scan da OCT. Em comparação com OCTA, a imagem de corte transversal de vFA oSLO identifica claramente os vasos na camada de fibras nervosas (NFL) e a camada de células ganglionares (GCL) e c.......
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Discussão
Aqui, descrevemos a oSLO, na vivo volumétrico fluorescente imagem da retina técnica com um FOV mais de 30 °. Comparado a OCT, um padrão atual de atendimento imagem método em oftalmologia, oSLO oferece um semelhante de imagem capacidade 3D ainda permite o contraste de fluorescência que OCT não é sensível a. A vantagem de oSLO é que requer apenas uma digitalização raster e, portanto, permite a combinação perfeita de PTU, fornecendo duas técnicas complementares para imagiologia volumétrica estrutural e fluorescente.......
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Divulgações
Ji Yi detém uma patente pendente para oSLO. O outro autor (es) declara sem interesses financeiros concorrentes.
Agradecimentos
Financiamento é o financiamento de fundação Evans médica do centro médico de Boston, bem como um sub contrato de NIH 5R01CA183101, piloto de BU-CTSI conceder 1UL1TR001430 e programa piloto Joslin BU BU-CTSI KL2TR001411.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Fonte de laser Supercontinuum | NKT Photonics | SuperK EXTREME EXU-OCT6 | |
| Espelho dicróico (DM1) | Thorlabs | DMLP650R | |
| Espelho dicróico (DM2) | Chroma | ZT514/1064rpc | |
| Espelho dicróico (DM3) | Thorlabs | DMLP900R | |
| fibra monomodo (SMF 1) | Thorlabs | P3-460B-FC-2 | |
| Fibra de Modo Único (SMF 2) | Thorlabs | P3-780A-FC-2 | |
| Acoplador de Fibra Óptica | Thorlabs | TW850R5A2 | |
| Sistema de Telescópio 1:1 | Thorlabs | AC254-100-A× | |
| Sistema de Telescópio 3:1 | Thorlabs | AC254-150-A× | |
| Sistema de Telescópio 3:1 | Thorlabs | AC254-50-A× | |
| Espelhos Galvo (GM1,GM2) | Thorlabs | GVS201× | |
| Espelhos Galvo De-sacn (GM3) | Thorlabs | GVS011 | |
| Lente Objetiva | Olympus | UplanSApo 20&vezes;/0.75 | |
| Sistema de imagem final | Olympus | UplanFL N 10&vezes;/0.3 | |
| Sistema de imagem final | Computar | 12-36mm/1:2.8 | |
| Câmera | PCO | Pco.pixelfly usb | |
| Filtro | Thorlabs | FEL0800 | |
| Montado Continuamente Variável Filtro ND | Thorlabs | NDC-50C-4M-A | |
| Câmera de Varredura de Linha | Thorlabs | SPL2048-140K | |
| Placa de Saída Analógica (AO1) | PCI-6731 | da National Instrument | |
| (AO2) | passa-longa PCIe-6351 | da National Instrument | |
| Thorlabs | FEL0800 |
Referências
- Webb, R. H., Hughes, G. W., Delori, F. C. Confocal scanning laser ophthalmoscope. Applied Optics. 26 (8), 1492-1499 (1987).
- Roorda, A., et al. Adaptive optics scanning laser ophthalmoscopy. Optics Express. 10 (9), 405-412 (2002).
- Huang, D., et al.
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Reimpressões e permissões
