Summary

Brûlures graves dans un modèle de porcs pour évaluation clinique vinaigrette

Published: November 06, 2018
doi:

Summary

À imiter étroitement le mode des brûlures requiert l’interaction entre l’observation clinique et d’études sur des modèles animaux. Dans cette étude, un modèle de porcs de brûlures graves a été créé pour évaluer un pansement expérimental dans les paramètres physiologiques et physiopathologiques.

Abstract

La cicatrisation est un processus de réparation dynamique et est le processus biologique plus complexe dans la vie humaine. En réponse à la brûlure, altérations de voies biologiques altérer la réponse de l’inflammation, ce qui entraîne une cicatrisation retardée. Troubles de la cicatrisation des plaies se produit fréquemment chez les patients diabétiques conduisant à des résultats défavorables comme l’amputation. Par conséquent, ayant un effet bénéfique dans la promotion de brûlure cicatrisation subi les apprêts sont nécessaires. Cependant, les études sur le traitement des plaies burn sont limitées en raison du manque de modèles animaux appropriés. Notre étude précédente a démontré performance de cicatrisation dans les modèles de rat et de porcs à l’aide d’une technique chirurgicale mini-invasive. Cette étude visait à démontrer un modèle porcine de graves brûlures qui élimine la contraction de la plaie et plus rapproche les processus humains de réépithélialisation et formation de nouveaux tissus. Ce protocole prévoit une procédure détaillée pour la création de graver compatible plaies et examinant les performances cicatrisant dans le traitement d’un pansement expérimental dans un modèle de la peste porcine. Six blessures de brûlure ont été créés symétriquement sur la face dorsale, qui étaient recouverts d’un pansement clinique composée de quatre couches : une couche de contact interne de matériel expérimental, une couche intermédiaire interne du film imperméable à l’eau, une couche intermédiaire externe de gaze, et une couche externe de sparadrap. À l’issue des expériences, fermeture de la plaie, région de la plaie et Vancouver cicatrice échelle score ont été examinés. Les échantillons de peau réséquée de chaque sacrifice de l’animal ont été préparées sur le plan histologique et colorées à l’aide de l’hématoxyline et éosine coloration. Activité antibactérienne de chaque pansement dans le contexte de la cicatrisation des plaies a également été examinée. L’application du pansement clinique sur les plaies en modèle porcine imite les processus biologiques de cicatrisation humaine en ce qui concerne les processus d’épithélialisation, prolifération cellulaire et l’angiogenèse. Par conséquent, ce modèle porcine fournit une méthode facile à apprendre, rentable et robuste pour évaluer l’effet des pansements cliniques des blessures graves brûlures.

Introduction

Une brûlure initie le processus inflammatoire et induit des effets pathologiques complexes, qui influencent les nombreuses fonctions du corps immédiatement après un accident, ce qui entraîne des répercussions négatives sur la qualité de vie des patients. Troubles de la cicatrisation provoque une cause de morbidité et de mortalité chez les patients avec diabète sucré1,2. La plupart des patients avec brûlures souffrent de douleurs lors de brûlures plaie débridement, qui est connu comme un processus douloureux malgré l’utilisation d’analgésiques opioïdes puissants3.

Contrairement aux autres mammifères, porcine partage plusieurs caractéristiques anatomiques et physiologiques avec les humains au sujet du processus d’épithélialisation, prolifération cellulaire et l’angiogenèse. Cela rend porcine un potentiellement meilleur modèle pour certaines procédures et les études, et ils sont souvent utilisés dans les études ultérieures qui ont démontré des résultats prometteurs chez les souris. Ces caractéristiques ont conduit à l’utilisation croissante de l’espèce porcine comme une espèce importante dans les essais précliniques. Récemment, une augmentation rapide de la recherche biomédicale avec respect à cardiovasculaire, urinaire, tégumentaire et système digestif a observé4,5,6. Cette étude vise à démontrer un modèle porcine de graves brûlures qui élimine la contraction de la plaie et fournit une approximation plus proche des plaie humaine des processus de guérison et la formation de nouveaux tissus. Six blessures de brûlure ont été créés symétriquement sur le dos, trois de chaque côté de la colonne vertébrale de la peste porcine. Ensuite, vinaigrette d’anexperimental a été étudiée dans un modèle de porcs de brûlure grave, qui peut être adaptée pour répliquer la cicatrisation humaine (Figure 1). Les blessures étaient recouverts d’un pansement clinique, qui se compose de quatre couches : une couche de contact interne de matériel expérimental, une couche intermédiaire interne du film imperméable à l’eau, une couche intermédiaire externe de gaze et une couche externe de sparadrap. Un film imperméable à l’eau maintient l’environnement humide tout en prévenant l’infection bactérienne et permettant au gaz de pénétrer le pansement. La couche intermédiaire de gaze a été appliquée sur les films imperméable à l’eau et garantie par une couche externe de sparadrap. À la fin des expériences, fermeture de la plaie, région de la plaie et échelle de cicatrice de Vancouver (VSS) score ont été examinés. Les échantillons de peau réséquée de chaque sacrifice de l’animal ont été préparées sur le plan histologique et colorées à l’aide de l’hématoxyline et éosine (HE) de coloration. Activité antibactérienne de chaque pansement dans le contexte de la cicatrisation des plaies a également été examinée dans ce modèle. Notre étude précédente a démontré des performances de cicatrisation en modèle de rat et de porcs à l’aide d’une technique chirurgicale mini-invasive7. Puisqu’il y avait que six graver des plaies sur le dos dans chaque porc, chaque pansement expérimentale a été testé et évalué dans toutes les positions afin de minimiser les biais liés à blesser le processus de guérison en différents endroits sur le dos de la peste porcine. Par conséquent, le modèle de porcine des brûlures sévères établies dans la présente étude propose une nouvelle approche pour l’évaluation des pansements cliniques et facilite le développement d’un nouveau traitement pour les brûlures. Cette étude fournit des outils essentiels pour découvrir la physiopathologie de la cicatrisation des brûlures.

Protocol

Procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvés par le Comité de protection des animaux au National Defense Medical Center, Taiwan (équipe R.O.C). Cette étude a été menée dans le centre d’Animal de laboratoire au centre médical de la défense nationale. Porcs d’un poids de 20 à 25 kg a été instrumenté avec succès à l’aide de ce protocole. 1. adaptation des animaux à la manipulation humaine Après l’arrivée dans l’établissement, abritent les an…

Representative Results

Durée de combustion de 30 secondes par le fer chaud a entraîné des blessures qui ont été uniformément pâle avec une jante de l’érythème (Figure 1) et circulaire avec une marge bien définie. Au sein de chaque animal, il y avait six blessures brûlures sur le dos. L’arrangement des brûlures blessures était représenté à la Figure 1 K. Brûlures blessures étaient complètement recouverts de pansement contenant des…

Discussion

La présente étude établi un modèle de porcs de graves brûlures et a examiné le modèle à l’aide d’un pansement contenant des CAPS. Nos résultats indiquent que ce modèle de porc peut être utilisé pour surveiller la performance clinique des pansements expérimentaux, y compris la propriété antibactérienne. La cicatrisation des taux, la fermeture de la plaie et activité antibactérienne ont été analysée à l’aide de VSS, H & E test de coloration et antibactérien. L’utilisation de modèles animaux …

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Cette étude a été financée par une subvention de l’hôpital général de tri-service ; National Defense Medical Center, Taiwan (TSGH-C107-042) ; Ministère de la Science et de technologie, Taïwan (la plupart 106-2314-B-016-014) ; et le National Defense Medical Center (MAB-106-055 ; MAB-106-010 ; MAB-107-064).

Materials

Sedation:
Ketamine Merial 2528 ESP 10 mL vial
Azaperone China chemical & pharmaceutical 47W406 100 mL vial
Atropine  Oriental chemical works IN120802 1 mL vial
Anesthetic:
Tiletamine+Zolazepam Virbac BC91 5 mL vial
Isoflurane Baxter N002A225 100 mL vial
Surgery:
Hair clippers Moser
Povidone iodine scrub solution Ever star HA161202 4 L barrel
Modified iron
Electronic thermometer Dogger A9SA-ST9215C – 50~300℃
0.9% saline solution CHI SHENG KC130 500 mL vial
Gauze China Surgical Dressings Center MO15900080 10 x10 cm
CAPS CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan
Paper tape 3M NDC-8333-1530-01 2.5 cm x 9.1m
Waterproof film 3M NDC-8333-1600-40 10 cm x 10 m
Adhesive plaster Young chemical BH1426015 10 cm x 10 m
Dissection:
Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) Shinetec instruments ST-S114
Halstead-Mosquito (12.5 cm) Shinetec instruments ST-H012
Handle(# 4) Shinetec instruments ST-H004
Surgical Blade(#21) Shinetec instruments ST-B021
Post-Fixation & Storage:
50 ml Plastic centrifuge tube  Falcon 352070
10% neutral buffered formalin Leica 3800604EG
Bacterial Growth Experiments 
Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood)  CMP 90 mm Mono

Referências

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Citar este artigo
Fan, G., Cherng, J., Chang, S., Poongodi, R., Wang, C., Wang, Y., Wang, Y., Liu, C., Meng, E. Severe Burn Injury in a Swine Model for Clinical Dressing Assessment. J. Vis. Exp. (141), e57942, doi:10.3791/57942 (2018).

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