כוויות חמורות פציעה במודל החזירים להערכה קלינית ההלבשה
Summary
כדי מקרוב מחקים המצב של פציעות לשרוף מחייבת יחסי הגומלין בין תצפיות קליניות מחקרים בבעלי חיים. במחקר זה, מודל החזירים של פציעה חמורה צריבה הוקמה כדי להעריך ההלבשה ניסיוני ב הגדרות פיזיולוגיים הקשורים pathophysiological.
Abstract
ריפוי הפצע הוא תהליך דינמי תיקון והוא תהליך ביולוגי המורכבים ביותר בחיי האדם. בתגובה לשרוף פציעה, שינויים מסלולים ביולוגיים לפגום התגובה דלקת, וכתוצאה מכך ריפוי הפצע מושהית. ריפוי פצעים לקוי לעתים קרובות מתרחשת בחולים עם סוכרת מובילה לתוצאות שלילי כגון קטיעה. לפיכך, רטבים יש השפעה מיטיבה בקידום לצרוב את הפצע תיקון נחוצים. עם זאת, מחקרים על צריבה בפצע טיפול מוגבלות בשל חוסר מודלים בעלי חיים נאותה. המחקר הקודם שלנו הפגינו ביצועים ריפוי פצע במודלים עכברים וחזירים בטכניקה כירורגית פולשנית. מחקר זה נועד להדגים מודל החזירים של פציעה חמורה צריבה המבטל את הפצע התכווצות, יותר מקרוב קירוב התהליכים האנושיים של epithelialization מחדש, היווצרות רקמה חדשה. פרוטוקול זה מספק הליך מפורט עבור יצירת פצעים כוויות עקבי ובודקים את הביצועים, ריפוי פצע תחת הטיפול ההלבשה ניסיוני במודל של החזירים. פצעים כוויות שישה נוצרו באופן סימטרי dorsum, אשר היו מכוסים קליניים ההלבשה המורכבת של ארבע שכבות: שכבת הקשר הפנימית של חומרים ניסיוניים, שכבת ביניים הפנימי של הסרט עמיד למים, ביניים שכבה חיצונית של גזה שכבה חיצונית של טיח דבק. עם השלמת הניסויים, נבחנו סגירת הפצע אזור הפצע, ונקובר הצלקת סרגל ניקוד. הדגימות של העור resected מההקרבה שלאחר כל בעלי חיים הוכנו בהיסטולוגיה, צבעונית באמצעות hematoxylin אאוזין מכתים. אנטיבקטריאלי של כל ההלבשה בהקשר של ריפוי הפצע גם נבדק. היישום של הרוטב קליניים לפציעות במודל החזירים מחקה את התהליכים הביולוגיים של ריפוי לגבי התהליכים של epithelialization, התפשטות הסלולר אנגיוגנזה הפצע האנושי. לכן, מודל חזיר זה מספק שיטה קל ללמוד, חסכונית, וחזק כדי להעריך את ההשפעה של רטבים קליניים בפציעה חמורה צריבה.
Introduction
פגיעה צריבה יוזם תהליך דלקתי ומשרה מורכב אפקטים פתולוגיים, אשר משפיעים על תפקודי גוף רבים מיד לאחר תאונה, וכתוצאה מכך השפעה שלילית על איכות החיים של המטופלים. ריפוי פצעים לקוי גורם משמעותי התחלואה והתמותה בקרב חולים עם סוכרת1,2. רוב החולים עם פציעות לשרוף לחוות כאב במהלך הצריבה הפצע הטריה, הידוע בשם תהליך התופת למרות השימוש של משככי כאבים אופיואידים חזק3.
בניגוד יונקים אחרים, החזירים לשתף מספר מאפיינים אנטומיים, הפיזיולוגיות עם בני האדם לגבי התהליך של epithelialization, התפשטות הסלולר אנגיוגנזה. זה גורם החזירים מודל פוטנציאלי טוב יותר עבור פרוצדורות של מחקרים מסוימים, הם משמשים לעתים קרובות מחקרים מאוחרים יותר הראו תוצאות מבטיחות בעכברים. תכונות אלה הובילו השימוש הגובר החזירים כמינים העיקריים בבדיקות פרה. לאחרונה, עלייה מהירה המחקר הביו-רפואי עם כבוד אל הלב וכלי הדם, השתן, הכסות, מערכות העיכול נצפתה4,5,6. מחקר זה נועד להמחיש מודל החזירים של פציעה כוויות חמורות מבטלת את הפצע התכווצות ומספק הערכה קרובה יותר של תהליכי ריפוי הפצע האנושי ואת היווצרות רקמה חדשה. פצעים כוויות שישה נוצרו באופן סימטרי על dorsum, שלוש בכל צד של עמוד השדרה של החזירים. בשלב הבא, הלבשה anexperimental נבדקה במודל החזירים של פגיעה כוויות חמורות, אשר ניתן להתאים כדי לשכפל ריפוי הפצע האנושי (איור 1). הפצעים היו מכוסים ההלבשה קליני, המורכב משילוב של ארבע שכבות: שכבת הקשר הפנימית של חומרים ניסיוניים, שכבת ביניים הפנימי של הסרט עמיד למים, ביניים שכבה חיצונית של גזה, שכבה חיצונית של טיח דבק. סרט עמיד למים שומר על הסביבה הפצע לח תוך מניעת זיהום חיידקי ומאפשר גזים לחלחל את הרוטב. השכבה החיצונית ביניים של גזה היה מוחל על הסרטים עמיד למים, מאובטח על ידי שכבה חיצונית של טיח דבק. בתום הניסויים, נבחנו סגירת הפצע אזור הפצע, ציון גודל הצלקת ונקובר (VSS). הדגימות של העור resected מההקרבה שלאחר כל בעלי חיים הוכנו בהיסטולוגיה והמוכתמות באמצעות hematoxylin מכתים אאוזין (הוא). אנטיבקטריאלי של כל ההלבשה בהקשר של ריפוי הפצע נבדק גם במודל זה. המחקר הקודם שלנו הוכיחה ריפוי פצע ביצועים במודל עכברים וחזירים באמצעות טכניקה כירורגית פולשנית7. היות שלא היו שש לשרוף פצעים על dorsum בתוך כל החזירים, כל ההלבשה ניסיוני היה נבדק, מוערכות כל העמדות כדי למזער את הטיית הקשורים פצע את תהליך הריפוי במקומות שונים על dorsum החזירים. לכן, הדגם החזירים של פציעה כוויות חמורות הוקמה במחקר זה מספק גישה חדשה על ההערכה של רטבים קליניים ואסטמה ומקילה על ההתפתחות של טיפול הרומן על הפגיעה צריבה. מחקר זה מספק כלי חיוני לחשוף הפתופיזיולוגיה של כוויות ריפוי הפצע.
Protocol
Representative Results
Discussion
המחקר הנוכחי הקימה מודל החזירים של פגיעה חמורה צריבה ובחן את הדגם בעזרת כמוסות המכילות ההלבשה. התוצאות שלנו מראים כי מודל זה חזיר יכול לשמש למעקב אחר ביצועי קליני של רטבים ניסיוני, כולל מאפיין בקטריאלי. ריפוי קצב סגירת הפצע, אנטיבקטריאלי הפצע נותחו גם באמצעות מבחן מוכתמים, ואנטי -בקטריאלי …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה נתמך על ידי מענק של החולים הכללי Tri-שירות; המרכז הרפואי של הביטחון הלאומי, טייוואן (TSGH-C107-042); משרד המדע, הטכנולוגיה, טייוואן (רוב-014 106-2314-B-016); ואת המרכז הרפואי הביטחון הלאומי (MAB-106-055; MAB-106-010; MAB-107-064).
Materials
| Sedation: | ||||
| Ketamine | Merial | 2528 ESP | 10 mL vial | |
| Azaperone | China chemical & pharmaceutical | 47W406 | 100 mL vial | |
| Atropine | Oriental chemical works | IN120802 | 1 mL vial | |
| Anesthetic: | ||||
| Tiletamine+Zolazepam | Virbac | BC91 | 5 mL vial | |
| Isoflurane | Baxter | N002A225 | 100 mL vial | |
| Surgery: | ||||
| Hair clippers | Moser | – | – | |
| Povidone iodine scrub solution | Ever star | HA161202 | 4 L barrel | |
| Modified iron | – | – | – | |
| Electronic thermometer | Dogger | A9SA-ST9215C | – 50~300℃ | |
| 0.9% saline solution | CHI SHENG | KC130 | 500 mL vial | |
| Gauze | China Surgical Dressings Center | MO15900080 | 10 x10 cm | |
| CAPS | CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan | – | – | |
| Paper tape | 3M | NDC-8333-1530-01 | 2.5 cm x 9.1m | |
| Waterproof film | 3M | NDC-8333-1600-40 | 10 cm x 10 m | |
| Adhesive plaster | Young chemical | BH1426015 | 10 cm x 10 m | |
| Dissection: | ||||
| Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) | Shinetec instruments | ST-S114 | – | |
| Halstead-Mosquito (12.5 cm) | Shinetec instruments | ST-H012 | – | |
| Handle(# 4) | Shinetec instruments | ST-H004 | – | |
| Surgical Blade(#21) | Shinetec instruments | ST-B021 | – | |
| Post-Fixation & Storage: | ||||
| 50 ml Plastic centrifuge tube | Falcon | 352070 | – | |
| 10% neutral buffered formalin | Leica | 3800604EG | – | |
| Bacterial Growth Experiments | ||||
| Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood) | CMP | – | 90 mm Mono |
Referências
- Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regeneration. 17, 763-771 (2009).
- Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regeneration. 17, 1-18 (2009).
- Verhaegen, P. D., et al. Differences in collagen architecture between keloid, hypertrophic scar, normotrophic scar, and normal skin: an objective histopathological analysis. Wound Repair Regeneration. 17, 649-656 (2009).
- Swindle, M. M., Adams, R. J. . Experimental Surgery and Physiology: Induced Animal Models of Human Disease. , (1988).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. . Swine as Models in Biomedical Research. , (1992).
- Tumbleson, M. E., Schook, L. B. . Advances in Swine in Biomedical Research. Vols 1-2. , (1996).
- Wang, C. H., et al. Enhanced wound-healing performance of a phyto-polysaccharide-enriched dressing – a preclinical small and large animal study. International Wound Journal. 14, 1359-1369 (2017).
- Rowan, M. P., Cancio, L. C., Elster, E. A., Burmeister, D. M., Rose, L. F., Natesan, S., Chan, R. K., Christy, R. J., Chung, K. K. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Journal of Critical Care. 19, 243 (2015).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 969618, 8 (2011).
- Gaines, C., Poranki, D., Du, W., Clark, R. A., Van Dyke, M. Development of a porcine deep partial thickness burn model. Burns. 39, 311-319 (2013).
- Gnyawali, S. C., Barki, K. G., Mathew-Steiner, S. S., Dixith, S., Vanzant, D., Kim, J., Dickerson, J. L., Datta, S., Powell, H., Roy, S., Bergdall, V., Sen, C. K. High-resolution harmonics ultrasound imaging for non-invasive characterization of wound healing in a pre-clinical swine model. PLoS One. 10 (3), e0122327 (2015).
- Eaglstein, W. H., Mertz, P. M. New methods for assessing epidermal wound healing: the effects of triamcinolone acetonide and polyethelene film occlusion. Journal of Investigative Dermatology. 71, 332-384 (1978).
- Swindle, M. M., Smith, A. C. Comparative anatomy and physiology of the pig. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Sciences. 25, 1-10 (1998).
- Swindle, M. M. . Swine in the Laboratory: Surgery, Anesthesia, Imaging and Experimental Techniques. , (2007).
- Mertz, P. M., et al. IL-1 as a potent inducer of wound re-epithelization. Progress in Clinical and Biological Research. 365, 473-480 (1991).
- Eming, S. A., Martin, P., Tomic-Canic, M. Wound repair and regeneration: mechanisms, signaling, and translation. Science Translation Medicine. 6, 265-266 (2014).
- Aryza, M. J., Baryza, G. A. The Vancouver Scar Scale: an administration tool and its interrater reliability. The Journal of Burn & Rehabilitation. 16, 535-538 (1995).
- Bystrom, A., Claesson, R., Sundqvist, G. The antibacterial effect of camphorated paramonochlorophenol, camphorated phenol and calcium hydroxide in the treatment of infected root canals. Endodontics & Dental Traumatology. 1, 170-175 (1985).
- Reig, A., Tejerina, C., Codina, J., Hidalgo, J., Mirabet, V. Application of a new cicatrization dressing in treating second-degree burns and donor sites. Annals of Burn and Fire Disasters. 4, 174 (1991).
- Hindy, A. Comparative study between sodium carboxymethyl-cellulose silver, moist exposed burn ointment, and saline-soaked dressing for treatment of facial burns. Annals of Burn and Fire Disasters. 22, 131-137 (2009).
- Galiano, R. D., et al. Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells. The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).
- Thangarajah, H., et al. The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 13505-13510 (2009).
