Queimadura grave lesão em um modelo de suíno para avaliação clínica de vestir

Summary

A pròxima imitar o modo de queimaduras requer a interação entre a observação clínica e estudos em modelos animais. Neste estudo, estabeleceu-se um modelo suíno de queimadura grave lesão para avaliar um curativo experimental em ajustes fisiológicos e fisiopatológicos.

Abstract

Cicatrização de feridas é um processo dinâmico de reparação e é o mais complexo processo biológico na vida humana. Em resposta a queimar a lesão, alterações nas vias biológicas prejudicam a resposta da inflamação, resultando em cicatrização retardada. Cicatrização de feridas prejudicada frequentemente ocorre em pacientes com diabetes, levando a resultados desfavoráveis como amputação. Daí, curativos, tendo efeito benéfico na promoção do reparo de ferida de queimadura são necessários. No entanto, estudos sobre tratamento de feridas de queimadura são limitados devido à falta de modelos animais apropriados. Nosso estudo anterior demonstrou desempenho de cicatrização de feridas em ratos e suínos modelos usando uma técnica cirúrgica minimamente invasiva. Este estudo teve como objetivo demonstrar um modelo suíno de queimadura grave lesão que elimina a contração da ferida e mais se aproxima dos processos humanos de re-epitelização e a formação de tecido novo. Este protocolo fornece um procedimento detalhado para a criação de feridas de queimadura consistente e examinar o desempenho de cicatrização de feridas, sob o tratamento de um curativo experimental em um modelo de suíno. Feridas de queimadura seis foram criadas simetricamente no dorso, que estavam cobertas com um molho clínico composto por quatro camadas: uma camada interna de contato de materiais experimentais, uma camada intermediária interna de película impermeável, uma camada intermediária de gaze, e uma camada externa de emplastro adesivo. Após a conclusão dos experimentos, fechamento de ferida, ferida área e pontuação da escala de cicatriz de Vancouver foram examinadas. As amostras de pele ressecada de cada pós-sacrifício animal histologicamente estavam preparadas e manchado usando hematoxilina e eosina coloração. Também foi examinada a atividade antibacteriana de cada molho no contexto da cicatrização de feridas. A aplicação do clínico curativo para feridas em modelo suíno imita os processos biológicos de humana ferida cura no que diz respeito os processos de epitelização, proliferação celular e angiogênese. Portanto, este modelo suíno fornece um método fácil de aprender, econômico e robusto para avaliar o efeito de clínicos curativos em lesões de queimadura grave.

Introduction

Um ferimento de queimadura inicia o processo inflamatório e induz efeitos patológicos complexos, que influenciam várias funções do corpo imediatamente após o acidente, resultando em um impacto negativo na qualidade de vida dos pacientes. Cicatrização de feridas prejudicada causa significativa morbidade e mortalidade entre os pacientes com diabetes mellitus^1,2. A maioria dos pacientes com queimaduras sentir dor durante o desbridamento de ferida queimadura, que é conhecido como um processo torturante apesar do uso de analgésicos opioides poderosa³.

Em contraste com outros mamíferos, suína compartilhar várias características anatômicas e fisiológicas com seres humanos sobre o processo de epitelização, proliferação celular e angiogênese. Isto torna suína um modelo potencialmente melhor para determinados procedimentos e estudos, e eles são frequentemente usados em estudos subsequentes que demonstraram resultados promissores em camundongos. Estas características levaram à utilização crescente de suína como uma espécie de grande testes pré-clínicos. Recentemente, um aumento rápido na investigação biomédica, com respeito a cardiovascular, urinário, tegumentar e sistemas digestivos tem sido observado^4,5,6. Este estudo visa demonstrar um modelo suíno de queimadura grave lesão que elimina a contração da ferida e fornece uma maior aproximação dos processos de cura de ferida humana e a formação de novos tecidos. Seis feridas de queimadura criaram-se simetricamente no dorso, três de cada lado da coluna vertebral dos suínos. Em seguida, curativos de emergência foi examinado em um modelo suíno de queimadura grave lesão, que pode ser adaptado para replicar a cicatrização de feridas humana (Figura 1). As feridas estavam cobertas com um curativo clínico, que é composto de quatro camadas: uma camada interna de contato de materiais experimentais, uma camada intermediária interna de película impermeável, uma camada intermediária de gaze e uma camada externa de emplastro adesivo. Uma película impermeável mantém o ambiente de ferida húmido enquanto evitando a infecção bacteriana e permitindo que os gases que permeiam o curativo. A camada exterior de intermediária de gaze foi aplicada nas películas impermeáveis e protegida por uma camada externa de emplastro adesivo. Após a conclusão dos experimentos, fechamento de ferida, ferida área e pontuação da escala de cicatriz de Vancouver (VSS) foram examinadas. As amostras de pele ressecada de cada pós-sacrifício animal histologicamente estavam preparadas e manchado usando hematoxilina e eosina (HE) de coloração. Atividade antibacteriana de cada molho no contexto da cicatrização de feridas foi também examinada neste modelo. Nosso estudo anterior demonstrou desempenho de cicatrização de feridas em ratos e suínos modelo usando uma técnica cirúrgica minimamente invasiva⁷. Já havia que seis queimam feridas no dorso dentro cada suína, cada curativo experimental foi testado e avaliado em todas as posições para minimizar o preconceito relacionado ao processo de cicatrização de ferimento em pontos diferentes no dorso suína. Portanto, o modelo suíno de queimadura grave prejuízo estabelecido neste estudo fornece uma nova abordagem para a avaliação de curativos clínicos e facilita o desenvolvimento de um novo tratamento para queimaduras. Este estudo fornece ferramentas cruciais para desvendar a fisiopatologia da cicatrização de feridas de queimadura.

Protocol

Procedimentos envolvendo assuntos animais foram aprovados pelo Comitê de cuidado Animal no centro médico da defesa nacional, Taiwan (R.O.C). Este estudo foi realizado no centro de animais de laboratório no centro de medicina de defesa nacional. Suínos com peso entre 20 e 25 kg tem sido instrumentado com sucesso usando este protocolo. 1. adaptação dos animais a manipulação humana Após a chegada na instalação, casa dos animais solitariamente, mas deixá-los interagir uns com…

Representative Results

Queimadura de duração de 30 segundos por ferro quente resultou em feridas que foram circular com uma margem bem definida e uniformemente pálido com um aro de eritema (Figura 1). Dentro de cada animal, havia seis feridas de queimaduras no dorso. O arranjo de feridas de queimadura foi retratado na Figura 1 K. Feridas de queimadura eram completamente cobertas com molho contendo CAPS e usadas para avaliar a profundidade de formaç…

Discussion

O presente estudo estabeleceu um modelo suíno de queimadura grave lesão e examinou o modelo usando um curativo contendo CAPS. Nossos resultados sugerem que este modelo suíno pode ser usado para monitorar o desempenho clínico de curativos experimentais, incluindo a propriedade anti-bacteriana. Ferida cura taxa, fechamento de ferida e atividade antibacteriana foram analisada usando o teste VSS, H & E manchando e antibacteriano. O uso de modelos animais queimadura foi desenvolvido como uma valiosa ferramenta para rever …

Materials

Sedation:
Ketamine	Merial	2528 ESP	10 mL vial
Azaperone	China chemical & pharmaceutical	47W406	100 mL vial
Atropine	Oriental chemical works	IN120802	1 mL vial
Anesthetic:
Tiletamine+Zolazepam	Virbac	BC91	5 mL vial
Isoflurane	Baxter	N002A225	100 mL vial
Surgery:
Hair clippers	Moser	–	–
Povidone iodine scrub solution	Ever star	HA161202	4 L barrel
Modified iron	–	–	–
Electronic thermometer	Dogger	A9SA-ST9215C	– 50~300℃
0.9% saline solution	CHI SHENG	KC130	500 mL vial
Gauze	China Surgical Dressings Center	MO15900080	10 x10 cm
CAPS	CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan	–	–
Paper tape	3M	NDC-8333-1530-01	2.5 cm x 9.1m
Waterproof film	3M	NDC-8333-1600-40	10 cm x 10 m
Adhesive plaster	Young chemical	BH1426015	10 cm x 10 m
Dissection:
Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm)	Shinetec instruments	ST-S114	–
Halstead-Mosquito (12.5 cm)	Shinetec instruments	ST-H012	–
Handle(# 4)	Shinetec instruments	ST-H004	–
Surgical Blade(#21)	Shinetec instruments	ST-B021	–
Post-Fixation & Storage:
50 ml Plastic centrifuge tube	Falcon	352070	–
10% neutral buffered formalin	Leica	3800604EG	–
Bacterial Growth Experiments
Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood)	CMP	–	90 mm Mono