Summary

Серьезный ожог в свином модели для оценки клинических Туалетная

Published: November 06, 2018
doi:

Summary

Для тесно имитировать режим ожогов требует взаимодействия клинического наблюдения и исследования на животных моделях. В этом исследовании свиной модель серьезный ожог был создан для оценки экспериментальных одеваться в физиологических и патофизиологические параметры.

Abstract

Заживление процесс динамического ремонта и наиболее сложный биологический процесс в жизни человека. В ответ на записать травмы изменения в биологических путей ослабить воспаление ответ, что приводит к замедленного заживления ран. Нарушение заживления ран часто возникает у пациентов с сахарным диабетом, ведущих к неблагоприятные исходы, такие как ампутации. Следовательно перевязочные материалы, имеющие положительный эффект в продвижении сжечь рану ремонта необходимы. Однако исследования на рану лечения ожогов ограничены из-за отсутствия надлежащего животных моделей. Наши предыдущие исследования продемонстрировали ранозаживляющим производительности в крыса и свиной моделей с использованием минимально инвазивной хирургической техники. Это исследование призвана продемонстрировать свиной модель серьезный ожог, который устраняет спад раневой и более тесно приближается человека процессы формирования новых тканей и эпителизация. Этот протокол предоставляет подробные процедуры для создания последовательного ожоговых ран и изучения ранозаживляющим производительности при лечении экспериментальной Туалетная в модели свиней. Шесть ожоговых ран создавались симметрично на тыльной поверхности, которые были покрыты клинических соус состоит из четырех слоев: внутренний слой контактной экспериментальных материалов, внутренний промежуточный слой водонепроницаемой пленки, внешний промежуточного слоя Марли, и наружный слой лейкопластырь. После завершения экспериментов были рассмотрены закрытия РАН, раневой области и оценка масштаба Ванкувер шрам. Образцы кожи, резецируется от каждого животного после жертвоприношения гистологически были подготовлены и витражи, с использованием гематоксилином и эозином. Была рассмотрена также антибактериальная активность каждого Туалетная в контексте заживление ран. Применения клинических повязки на раны, в свином модель имитирует биологические процессы человека ранозаживляющее отношении процессы эпителизации, пролиферации и ангиогенеза. Таким образом эта модель свиной предоставляет метод легко учиться, экономически эффективные и надежные оценить эффект клинической подкормок в серьезный ожог.

Introduction

Ожог инициирует воспалительного процесса и индуцирует комплекс патологических эффектов, которые влияют многочисленные тела функции сразу же после аварии, что приводит к негативное воздействие на качество жизни пациентов. Нарушение заживления ран вызывает значительные заболеваемости и смертности среди больных с сахарным диабетом1,2. Большинство пациентов с ожоговыми травмами испытывать боль во время сжечь рану хирургическая, который известен как процесс мучительной несмотря на использование мощных опиоидных анальгетиков3.

В отличие от других млекопитающих свиньи поделиться несколько анатомические и физиологические характеристики с людей относительно процесса эпителизации, пролиферации и ангиогенез. Это делает свиного потенциально лучшей моделью для некоторых процедур и исследований, и они часто используются в последующих исследованиях, которые показали многообещающие результаты в мышей. Эти особенности привели к более широкое использование свиней как основных видов в доклинических испытаний. Недавно наблюдается быстрый рост в биомедицинских исследований с уважением к сердечно-сосудистой, мочеполовой, Покровная и пищеварительной систем4,5,6. Это исследование призвана продемонстрировать свиной модель серьезный ожог, что устраняет сужение раны и обеспечивает подобие человека рану процессы заживления и формирования новой ткани. Шесть ожоговых ран были созданы симметрично на спинке, три на каждой стороне позвоночника свиней. Далее anexperimental Туалетная был рассмотрен в свином модель серьезный ожог, который может быть адаптирован для репликации человеческих заживление ран (рис. 1). Раны были покрыты клинических соус, который состоит из четырех слоев: внутренний контактный слой экспериментальных материалов, внутренний промежуточный слой водонепроницаемой пленки, внешний промежуточным слоем марли и наружный слой лейкопластырь. Гидроизоляционные пленки держит рану среды влажным при бактериальной инфекции и позволяя газов пронизывают повязки. Промежуточный слой Марли был применен на фильмы, водонепроницаемый и обеспеченные наружный слой лейкопластырь. После завершения экспериментов были рассмотрены закрытия РАН, раневой области и оценка масштаба шрам Ванкувер (VSS). Образцы кожи, резецируется от каждого животного после жертвоприношения гистологически были подготовлены и витражи с помощью гематоксилином и эозином (он) окрашивания. В этой модели была рассмотрена также антибактериальная активность каждого Туалетная в контексте заживление ран. Наши предыдущие исследования показал заживление производительность в крыса и свиной модели с использованием минимально инвазивной хирургической техники7. Поскольку существует шесть сжечь раны на тыльной поверхности в пределах каждой свиньи, каждой экспериментальной Туалетная был испытаны и оценены во всех позициях, чтобы свести к минимуму предвзятость, относящиеся к раневой процесс заживления в разных точках на спинке свиней. Таким образом обеспечивает новый подход для оценки клинических повязки и способствует развитию Роман лечения ожога свиной модель серьезный ожог, в настоящем исследовании. Это исследование обеспечивает ключевыми инструментами раскрыть патофизиологии заживление ожога.

Protocol

Процедуры с участием животных субъектов были утверждены Комитетом по уход животных на национальной обороны медицинский центр, Тайвань (R.O.C). Это исследование было проведено в лабораторных животных центр в медицинском центре национальной обороны. Свиней весом от 20 до 25 кг был успешно ин…

Representative Results

Сжечь продолжительностью 30 секунд горячим утюгом в результате раны, которые были круглые с четкой разницы и равномерно бледно с оправой, эритемы (рис. 1 d). В рамках каждого животного насчитывалось шесть ожоговых ран на спинку. Расположение ожоговых ран ?…

Discussion

Настоящее исследование создана модель свиной серьезный ожог и рассмотрены модели с помощью ШАПКИ содержащих заправкой. Наши результаты показывают, что эта модель свиней может использоваться для мониторинга клинических характеристик экспериментальной перевязочные материалы, в том ч…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Это исследование было поддержано грант от Tri-служба больницы; Медицинский центр национальной обороны, Тайвань (TSGH-C107-042); Министерство науки и технологии, Тайвань (большинство 106-2314-B-016-014); и национальной обороны медицинский центр (МАБ-106-055; MAB-106-010; MAB-107-064).

Materials

Sedation:
Ketamine Merial 2528 ESP 10 mL vial
Azaperone China chemical & pharmaceutical 47W406 100 mL vial
Atropine  Oriental chemical works IN120802 1 mL vial
Anesthetic:
Tiletamine+Zolazepam Virbac BC91 5 mL vial
Isoflurane Baxter N002A225 100 mL vial
Surgery:
Hair clippers Moser
Povidone iodine scrub solution Ever star HA161202 4 L barrel
Modified iron
Electronic thermometer Dogger A9SA-ST9215C – 50~300℃
0.9% saline solution CHI SHENG KC130 500 mL vial
Gauze China Surgical Dressings Center MO15900080 10 x10 cm
CAPS CoreLeader Biotech Co., Ltd, Taipei, Taiwan
Paper tape 3M NDC-8333-1530-01 2.5 cm x 9.1m
Waterproof film 3M NDC-8333-1600-40 10 cm x 10 m
Adhesive plaster Young chemical BH1426015 10 cm x 10 m
Dissection:
Pair of standard sharp/blunt straight scissors (14 cm) Shinetec instruments ST-S114
Halstead-Mosquito (12.5 cm) Shinetec instruments ST-H012
Handle(# 4) Shinetec instruments ST-H004
Surgical Blade(#21) Shinetec instruments ST-B021
Post-Fixation & Storage:
50 ml Plastic centrifuge tube  Falcon 352070
10% neutral buffered formalin Leica 3800604EG
Bacterial Growth Experiments 
Blood agar plate (BAP) (TSA with 5% sheep blood)  CMP 90 mm Mono

Referências

  1. Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair Regeneration. 17, 763-771 (2009).
  2. Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regeneration. 17, 1-18 (2009).
  3. Verhaegen, P. D., et al. Differences in collagen architecture between keloid, hypertrophic scar, normotrophic scar, and normal skin: an objective histopathological analysis. Wound Repair Regeneration. 17, 649-656 (2009).
  4. Swindle, M. M., Adams, R. J. . Experimental Surgery and Physiology: Induced Animal Models of Human Disease. , (1988).
  5. Swindle, M. M., Smith, A. C. . Swine as Models in Biomedical Research. , (1992).
  6. Tumbleson, M. E., Schook, L. B. . Advances in Swine in Biomedical Research. Vols 1-2. , (1996).
  7. Wang, C. H., et al. Enhanced wound-healing performance of a phyto-polysaccharide-enriched dressing – a preclinical small and large animal study. International Wound Journal. 14, 1359-1369 (2017).
  8. Rowan, M. P., Cancio, L. C., Elster, E. A., Burmeister, D. M., Rose, L. F., Natesan, S., Chan, R. K., Christy, R. J., Chung, K. K. Burn wound healing and treatment: review and advancements. Journal of Critical Care. 19, 243 (2015).
  9. Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 969618, 8 (2011).
  10. Gaines, C., Poranki, D., Du, W., Clark, R. A., Van Dyke, M. Development of a porcine deep partial thickness burn model. Burns. 39, 311-319 (2013).
  11. Gnyawali, S. C., Barki, K. G., Mathew-Steiner, S. S., Dixith, S., Vanzant, D., Kim, J., Dickerson, J. L., Datta, S., Powell, H., Roy, S., Bergdall, V., Sen, C. K. High-resolution harmonics ultrasound imaging for non-invasive characterization of wound healing in a pre-clinical swine model. PLoS One. 10 (3), e0122327 (2015).
  12. Eaglstein, W. H., Mertz, P. M. New methods for assessing epidermal wound healing: the effects of triamcinolone acetonide and polyethelene film occlusion. Journal of Investigative Dermatology. 71, 332-384 (1978).
  13. Swindle, M. M., Smith, A. C. Comparative anatomy and physiology of the pig. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Sciences. 25, 1-10 (1998).
  14. Swindle, M. M. . Swine in the Laboratory: Surgery, Anesthesia, Imaging and Experimental Techniques. , (2007).
  15. Mertz, P. M., et al. IL-1 as a potent inducer of wound re-epithelization. Progress in Clinical and Biological Research. 365, 473-480 (1991).
  16. Eming, S. A., Martin, P., Tomic-Canic, M. Wound repair and regeneration: mechanisms, signaling, and translation. Science Translation Medicine. 6, 265-266 (2014).
  17. Aryza, M. J., Baryza, G. A. The Vancouver Scar Scale: an administration tool and its interrater reliability. The Journal of Burn & Rehabilitation. 16, 535-538 (1995).
  18. Bystrom, A., Claesson, R., Sundqvist, G. The antibacterial effect of camphorated paramonochlorophenol, camphorated phenol and calcium hydroxide in the treatment of infected root canals. Endodontics & Dental Traumatology. 1, 170-175 (1985).
  19. Reig, A., Tejerina, C., Codina, J., Hidalgo, J., Mirabet, V. Application of a new cicatrization dressing in treating second-degree burns and donor sites. Annals of Burn and Fire Disasters. 4, 174 (1991).
  20. Hindy, A. Comparative study between sodium carboxymethyl-cellulose silver, moist exposed burn ointment, and saline-soaked dressing for treatment of facial burns. Annals of Burn and Fire Disasters. 22, 131-137 (2009).
  21. Galiano, R. D., et al. Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells. The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).
  22. Thangarajah, H., et al. The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 13505-13510 (2009).
check_url/pt/57942?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Fan, G., Cherng, J., Chang, S., Poongodi, R., Wang, C., Wang, Y., Wang, Y., Liu, C., Meng, E. Severe Burn Injury in a Swine Model for Clinical Dressing Assessment. J. Vis. Exp. (141), e57942, doi:10.3791/57942 (2018).

View Video