पुरुषों और महिलाओं से नादान साथियों के लिए अमेरिकी Trypanosomes का यौन संचरण
Summary
Chagas रोग के Trypanosoma cruzi एजेंट लंबे समय से स्थाई स्पर्शोन्मुख संक्रमण है कि अचानक नैदानिक मांयता प्राप्त विकृति में विकसित पैदा करता है । निंनलिखित अनुसंधान प्रोटोकॉल का वर्णन एक लघु आधारित महामारी विज्ञान के अध्ययन के लिए टी cruzi संक्रमण सुलझाना माता पिता से संतति के लिए यौन संचारित ।
Abstract
अमेरिकी trypanosomiasis दूषित भोजन की घूस के माध्यम से triatomine कीड़ों द्वारा मनुष्यों को प्रेषित किया जाता है, रक्त आधान या अकस्मात अस्पतालों और अनुसंधान प्रयोगशालाओं में द्वारा । इसके अलावा, Trypanosoma cruzi संक्रमण जन्मजात एक chagasic मां से उसके वंश के लिए फैलता है, लेकिन utero संदूषण में पुरुष साथी के योगदान अज्ञात है । amastigotes और अंडाशय के theca कोशिकाओं में trypomastigotes के घोंसले और झुरमुट के निष्कर्षों, goniablasts में और सेमिनीफेरस नलिकाओं के लुमेन में सुझाव है कि cruzi संक्रमण यौन संचारित कर रहे हैं । अनुसंधान प्रोटोकॉल के साथ एक परिवार के अध्ययन की जनसंख्या द्विगुणित रक्त mononuclear कोशिकाओं में और मानव विषयों के अगुणित gametes में दिखा परजीवी परमाणु डीएनए के परिणाम प्रस्तुत करता है । इस प्रकार, तीन स्वतंत्र जैविक नमूने एक वर्ष के अलावा एकत्र की पुष्टि की है कि cruzi संक्रमण यौन संतति को प्रेषित किया गया । दिलचस्प है, विशिष्ट cruzi एंटीबॉडी परिवार संतति के बहुमत है कि परजीवी प्रतिजन के लिए प्रतिरक्षा सहिष्णुता बोर में अनुपस्थित था । प्रतिरक्षा सहिष्णुता cruzi को चिकन दुर्दम्य में भ्रूण विकास के पहले सप्ताह के बाद प्रदर्शन किया गया था, और flagellate-inoculated अंडे से रची लड़कियों के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी उत्पादन करने में असमर्थ थे । इसके अलावा, मानव के वीर्य को जगाकर intraperitoneally या भोले चूहों की योनि में cruzi amastigotes, अधिवृषण, सेमिनीफेरस tubule, वॉज deferens और गर्भाशय ट्यूब में भड़काऊ की अनुपस्थिति के साथ झुकेंगे । प्रजनन के प्रतिरक्षा विशेषाधिकार प्राप्त अंगों में प्रतिक्रियाओं । cruziके प्रजनन-संक्रमित पुरुष और मादा चूहों भोली साथियों के साथ संक्रमण के अधिग्रहण के परिणामस्वरूप, जो बाद में संतति को प्रेषित किया गया । इसलिए, एक मजबूत शिक्षा, सूचना और संचार कार्यक्रम है कि जनसंख्या और सामाजिक संगठनों शामिल Chagas रोग को रोकने के लिए आवश्यक समझा जाता है ।
Introduction
प्रोटोजोआ परजीवी Trypanosoma cruzi परिवार Trypanosomatidae से संबंधित trypomastigote और amastigote मेजबानों में जीवन चक्र के चरणों में आता है और कीट में स्तनधारी के रूप में मौजूद है-सदिश (epimastigotes: Reduviid) आंत और में axenic संस्कृति । हाल के दशकों में, कई अध्ययनों से पता चला है देशों में Chagas रोग की उपस्थिति चार महाद्वीपों पर माना जाता triatomine बग नि: शुल्क1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13; अमेरिकी trypanosomes के फैलाव शुरू में उत्तरी गोलार्द्ध के लिए लैटिन अमेरिकी आप्रवासियों के लिए जिंमेदार ठहराया गया था, लेकिन संभावना है कि कुछ Chagas रोग के autochthonous मामलों रहे है अब3से वंचित नहीं किया जा सकता है,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14. cruzi संचरण का एकमात्र पहचानने योग्य अंतर्जात स्रोत गर्भधारण के लगभग 10% में वंश को परजीवी के chagasic माता के स्थानान्तरण को जिंमेदार माना गया है15; वीर्य बोल पड़ना के माध्यम से utero संक्रमणों में पुरुष साथी का योगदान अपरिचित रह गया है.
एक सदी से अधिक पहले, जांचकर्ताओं16,17 मनाया intracellular टी cruzi amastigotes अंडाशय की theca कोशिकाओं में और Chagas रोग के तीव्र मामलों के अंडकोष के रोगाणु लाइन कोशिकाओं में । cruzi trypomastigotes और अंडाशय के theca कोशिकाओं में amastigotes के घोंसले और झुरमुट, goniablasts में और सेमिनीफेरस नलिकाओं के लुमेन में (चित्रा 1) घातक तीव्र Chagas रोग के मामलों के अंगों में प्रतिरक्षा विशेषाधिकार विकसित भड़काऊ घुसपैठ18,19के अभाव में प्रजनन । हाल के दशकों में, कुछ प्रयोगात्मक अध्ययन सेमिनीफेरस tubule, अधिवृषण, और वॉज deferens के रूप में अच्छी तरह के रूप में गर्भाशय, ट्यूबों और अंडाशय में cruzi के दौर amastigote रूपों के घोंसले दिखाया है तीव्र संक्रमित चूहों की कोशिकाओं theca 1,20,21,22. इसके अलावा, परिवार के अध्ययन के पाठ्यक्रम में पैतृक Chagas रोगियों से उनके वंश के लिए प्रोटोजोआ mitochondrial डीएनए के हस्तांतरण दस्तावेज़, cruzi परमाणु डीएनए (nDNA) मानव अगुणित रोगाणु लाइन कोशिकाओं23में सत्यापित किया गया था, और परजीवी जीवन चक्र चरणों chagasic चूहों24के बोल पड़ना में मनाया गया । इन निष्कर्षों को विशिष्ट एंटीबॉडी1,25,26के अभाव में T. cruzi-संक्रमित मेजबान की संतति द्वारा प्राप्त प्रतिरक्षा सहिष्णुता पर रिपोर्टों के साथ समझौते में हैं । इसके अतिरिक्त, महामारी विज्ञान की रिपोर्ट है कि अंय महाद्वीपों के लिए स्थानिकमारी वाले Chagas रोग के प्रसार का सुझाव दिया3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12,13 अब प्रयोगात्मक अध्ययन दिखा रहा है कि Chagas रोग यौन 1 प्रेषित किया जा सकता द्वारा समर्थित है . वर्तमान जांच एक epidemiologic परिवार के अध्ययन प्रोटोकॉल प्रस्तुत करता है और पता चलता है कि cruzi संक्रमण संभोग द्वारा प्रचार करती है ।
Protocol
Representative Results
Discussion
इस के साथ साथ, हम एक परिवार आधारित अनुसंधान प्रोटोकॉल है कि क्या मानव Chagas रोग यौन संचारित intraspecies T. cruzi संक्रमण से उपजी के सवाल का जवाब चर्चा । प्रारंभिक अध्ययन टी cruzi संक्रमण के यौन संचरण के सबूत प्रदान ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम प्रयोगशाला सुविधाओं और Izabela Dourado, कार्ला Araujo, और चालाक गोम्स और ब्रूनो Dalago और राफेल Andrade की तकनीकी सहायता की महत्वपूर्ण टिप्पणी स्वीकार करते हैं । हम विज्ञान की उंनति (FAPDF), राष्ट्रीय अनुसंधान परिषद, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय (CNPq/MCT), और मानव संसाधन, शिक्षा मंत्रालय (CAPES/ME), ब्राजील, के लिए एजेंसी के समर्थन के लिए फाउंडेशन के लिए ऋणी है ये जांच.
Materials
| BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
| Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
| d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
| DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
| dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
| Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
| Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
| Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
| Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
| Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
| Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
| Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
| Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
| Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
| Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
| Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
| Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
| Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
| Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
| Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
| Vector Systems | Promega | A1380 |
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