Summary

Échantillonnage et prétraitement de l’émail dentaire Carbonate pour stables du carbone et de l’analyse des isotopes d’oxygène

Published: August 15, 2018
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Summary

L’analyse des isotopes carbone et oxygène stable de carbonate d’émail de dents humaines et animales a été utilisé comme un proxy pour régime individuel et de la reconstruction environnementale. Ici, nous fournir une description détaillée et une documentation visuelle de produits en vrac et séquentielle des dents émail échantillonnage ainsi que le prétraitement des échantillons archéologiques et paléontologiques.

Abstract

Stable carbone et oxygène l’analyse isotopique du carbonate d’émail de dents humaines et animales a été appliquée au Paléo, paléoécologique et recherches paléoenvironnementales de périodes de l’histoire récentes à plus de 10 millions ans. Approches en vrac fournissent un échantillon représentatif pour la période de minéralisation de l’émail, tandis que les échantillons séquentiels dans une dent peuvent suivre les changements alimentaires et environnementaux pendant cette période. Bien que ces méthodes ont été largement appliqués et décrits en archéologie, écologie et la paléontologie, il n’y a eu aucune directive explicite afin de faciliter la sélection de matériel de laboratoire nécessaire et à décrire soigneusement laboratoire détaillées d’échantillonnage et protocoles. Dans cet article, nous documentons textuellement et visuellement, l’ensemble du processus d’échantillonnage par prétraitement et diagénétique de dépistage à diffuser plus largement la méthodologie aux chercheurs d’envisager son application dans une variété de paramètres de laboratoire.

Introduction

Les analyses des isotopes carbone et oxygène stables de carbonate d’émail de dents a été utilisé pour étudier au-delà de l’apport alimentaire humaine, sevrage et mobilité, ainsi que reliance faunique sur la végétation, la circulation des animaux et de l’élevage foddering. Ces applications ont été complètement discutées et examinées pour une variété de conditions environnementales indiquant les effets de l’aridité de locale, température, sources d’eau et végétation compositions1,2, 3,4,5,6. La diversité des applications potentielles en archéologie et en paléontologie, ainsi que la bonne préservation des dents émail carbonate, a fait un matériau attrayant pour les isotopes stables de travail3. Méthodes d’échantillonnage, le prétraitement et le dépistage de la diagenèse sont brièvement décrites dans un certain nombre de précédents publications1,7. Cependant, des manifestations verbales et visuelles approfondies restent largement indisponibles, particulièrement pour les personnes en dehors des laboratoires de science archéologique et parmi les groupes de laboratoire avec un financement limité, où l’intérêt dans l’utilisation de cette technique est en augmentation 5.

L’émail des dents est principalement composé de hydroxyapatite (bioapatite) cristallites8 plus grand que ceux dans les os, les rendant plus résistantes à la substitution ionique diagénétique post-mortem et contamination3. Les études modernes ont montré que le carbone stable isotope (δ13C) mesures de faunal dent émail fiable record animaux alimentation et comportement9,10. La valeur d’isotope (δ18O) oxygène stable de l’émail dentaire est déterminée par la composition isotopique de l’oxygène de l’eau ingérée, ce qui comprend l’eau dans les plantes et aliments d’origine animale, eau potable, la respiration, ainsi que divers impacts environnementaux sur l’eau qui peut conduire à davantage de fractionnement isotopique (e.g., aridité, température, altitude, quantité de précipitations, continental carte)11. Il est d’une méthode populaire pour la reconstruction alimentaire et environnementale dans la recherche archéologique, paléontologique et paléoécologique.

La période de formation de l’émail dentaire est relativement courte (ans) et varie en fonction de la dent à échantillonner. Pour l’homme, premier émail molaire minéralise entre la naissance et l’âge de 3 ans, prémolaires minéralisent entre 1,5 et 7 ans, deuxièmes molaires minéralisent âgés de 2,5 à 8 ans et troisièmes molaires minéralisent pendant l’adolescence, entre 7 et 16 ans12 . Étant donné que formes d’émail de dents progressivement au cours de sa période de formation, pouvoir être échantillonné en vrac le long de l’axe de toute croissance ou échantillonnée de façon séquentielle afin d’étudier les changements de régime alimentaire et l’environnement qui ont eu lieu au cours de la période de formation13 . Changement alimentaire ordonnées chronologiquement dans une dent donnée est observable pour les humains et autres animaux1,14, fournissant des informations concernant les variations interannuelles de saisonniers et diététiques.

Alors que l’émail est habituellement résistant à la diagenèse, modifications isotopiques résultant de l’environnement funéraire sont possibles et ont été observées15,16, ce qui rend utile vérifications expérimentales et choix de prétraitement. S’il n’est pas la méthode disponible uniquement, Fourier transform la spectroscopie infrarouge (FTIR), en particulier dans le Mode de Transmission a atténué, a émergé comme un rapide, peu coûteux et la méthode relativement accessible pour évaluer les altérations taphonomiques dans l’émail des dents, en particulier dans des contextes paléontologique17,18,19,20. Cependant, des protocoles détaillés et normes d’enregistrement restent relativement inaccessibles à beaucoup de gens dehors les domaines de la science de géochimie ou matériel.

Temps de réaction et les produits chimiques utilisés par les chercheurs dans le prétraitement de l’émail dentaire varient aussi considérablement dans la littérature, souvent avec un examen limité quant à ce que cette variabilité peut faire pour stables du carbone et les valeurs des isotopes d’oxygène de l’échantillon21 ,,22. Nous rapportons ici une approche que les utilisations diluer l’acide acétique (0,1 M) pour le prétraitement des échantillons de poudre d’émail. Toutefois, étant donné que les différences entre les mesures isotopiques résultant de prétraitement sont relativement mineurs pour l’émail des dents, il est préférable pour les chercheurs de suivre les protocoles pour les ensembles de données avec laquelle ils veulent comparer leurs données à11. En outre, lorsque les petits échantillons séquentiels sont prises, en particulier sur des échantillons de l’Holocène, aucun prétraitement ne peut être choisi (à la suite des essais diagénétiques pilotes) pour éviter le gaspillage de l’échantillon.

Bien que les méthodes que nous rapportons ici ne sont en aucun cas nouveau, à notre connaissance, c’est la première fois qu’une documentation écrite et visuelle approfondie de vrac et d’échantillonnage séquentiel, choix de prétraitement et méthodes cocher diagénétique (sous forme de FTIR) pour dent émail ont été largement diffusés auprès d’un public varié académique. Même si nous espérons que nos efforts feront cette approche plus facilement accessible à un plus grand nombre d’individus et de laboratoires, chercheurs désireux d’appliquer et de publier cette technique doivent être conscients des minimum de normes, considérations diagénétiques, d’information et exigences de présentation supervisé ailleurs20, ainsi que les complexités d’interprétation possibles qui seront propres à leur région d’étude, taxons analysés et temps de période5.

Protocol

Le protocole suivant suit les directives du laboratoire de spectrométrie de masse lumière isotopique à l’Institut Max Planck pour la Science de l’histoire humaine. Autorisations d’éthique approprié de comités nationaux et internationaux devraient être recherchées pour analyses impliquant des spécimens fauniques modernes ou historiques en voie de disparition et l’utilisation du matériel archéologique et faunique d’intérêt aux intervenants contemporains . Dans cet article, les échantillons utilisés…

Representative Results

Échantillons de bioapatite émail incrémentielle à l’aide de la procédure d’échantillonnage présentée ci-dessus, ont été préparés. L’analyse de la bioapatite en émail dépend de la précision de l’échantillonnage, qu’ils soient en vrac ou incrémentielle. Dans ce cas, nous avons choisi de présenter les résultats des échantillons archéologiques (deux moutons) provenant de différentes zones climatiques. Les échantillons élémentaires ont été analysés depuis …

Discussion

Les défis du succès d’échantillonnage (en vrac ou incrémentale) de dentition s’appuie sur l’accès au savoir en ce qui concerne les techniques de forage et de préparation, aux côtés de l’investissement dans l’équipement relativement peu coûteux d’échantillons. Ces défis sont facilement surmontables lorsque claire des instructions sont disponibles concernant les méthodes d’échantillonnage et de prétraitement. Dans cet article, nous espérons ont diffusé ceux-ci de façon claire et concise pour…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Nous tenons à remercier la Société Max Planck pour financement cette recherche ainsi que la récente mise en place d’un laboratoire d’isotopes stables à le département archéologie, Institut Max Planck pour la Science de l’histoire humaine.

Materials

Dremel Micro Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/8050-micro
Diamond-tipped drill bit Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/accessories/7122-diamond-wheel-point
1.5 mL micro-centrifuge tube Sigma Aldrich https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t2422?lang=de&region=DE&gclid=EAIaIQobChMI7pHRpauW2QIV77ftCh1p1wjhEAAYASAAEgKzkvD_BwE
Methanol Linear Formula: CH3OH
Acetic Acid Linear Formula: CH3CO2H
Dremel rig set-up (workstation) Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/220-01-workstation
Microcentrifuge Thermo Scientific http://www.thermofisher.com/order/catalog/product/75002401
Mini-centrifuge Sprout http://www.heathrowscientific.com/sprout-mini-centrifuge-4
Freeze drier Zirbus Technology http://www.zirbus.com

Referências

  1. Balasse, M. Reconstructing dietary and environmental history from enamel isotopic analysis: time resolution of intra-tooth sequential sampling. International Journal of Osteoarchaeology. 12 (3), 155-165 (2002).
  2. Balasse, M. Potential biases in sampling design and interpretation of intra-tooth isotope analysis. International Journal of Osteoarchaeology. 13 (1-2), 3-10 (2003).
  3. Lee-Thorp, J. A. On isotopes and old bones. Archaeometry. 50 (6), 925-950 (2008).
  4. Clementz, M. T. New insight from old bones: stable isotope analysis of fossil mammals. Journal of Mammalogy. 93 (2), 368-380 (2012).
  5. Loftus, E., Roberts, P., Lee-Thorp, J. A. An isotopic generation: four decades of stable isotope analysis in African archaeology. Azania: Archaeological Research in Africa. 51 (1), 88-114 (2016).
  6. Ventresca Miller, A. R., Makarewicz, C. Isotopic approaches to pastoralism in prehistory: Diet, mobility, and isotopic reference sets. Isotopic Investigations of Pastoralism in Prehistory. , 1-14 (2018).
  7. Hollund, H. I., Ariese, F., Fernandes, R., Jans, M. M. E., Kars, H. Testing an alternative high-throughput tool for investigating bone diagenesis: FTIR in attenuated total reflection (ATR) mode. Archaeometry. 55 (3), 507-532 (2013).
  8. LeGeros, R. Z. Calcium phosphates in oral biology and medicine. Monographs in oral sciences. 15, 109-111 (1991).
  9. Lee-Thorp, J. L., Van Der Merwe, N. J. Carbon isotope analysis of fossil bone apatite. South African Journal of Science. 83 (11), 712-715 (1987).
  10. Cerling, T. E., Harris, J. M. Carbon isotope fractionation between diet and bioapatite in ungulate mammals and implications for ecological and paleoecological studies. Oecologia. 120 (3), 347-363 (1999).
  11. Koch, P. L. Isotopic study of the biology of modern and fossil vertebrates. Stable Isotopes in Ecology and Environmental Science. , 99-154 (2007).
  12. Nelson, S. J. . Wheeler’s Dental Anatomy, Physiology and Occlusion-E-Book. , (2014).
  13. Tsutaya, T., et al. From cradle to grave: multi-isotopic investigations on the life history of a higher-status female from Edo-period Japan. Anthropological Science. 124 (3), 185-197 (2016).
  14. Sponheimer, M., Passey, B. H., De Ruiter, D. J., Guatelli-Steinberg, D., Cerling, T. E., Lee-Thorp, J. A. Isotopic evidence for dietary variability in the early hominin Paranthropus robustus. Science. 314 (5801), 980-982 (2006).
  15. Lee-Thorp, J., Sponheimer, M. Three case studies used to reassess the reliability of fossil bone and enamel isotope signals for paleodietary studies. Journal of Anthropological Archaeology. 22 (3), 208-216 (2003).
  16. Zazzo, A. Bone and enamel carbonate diagenesis: a radiocarbon prospective. Palaeogeography, Palaeoclimatology, Palaeoecology. 416, 168-178 (2014).
  17. Sponheimer, M. . Isotopic paleoecology of the Makapansgat Limeworks fauna (Australopithecus africanus, South Africa). , (1999).
  18. Sponheimer, M., Lee-Thorp, J. A. Alteration of enamel carbonate environments during fossilization. Journal of Archaeological Science. 26 (2), 143-150 (1999).
  19. Roche, D., Ségalen, L., Balan, E., Delattre, S. Preservation assessment of Miocene-Pliocene tooth enamel from Tugen Hills (Kenyan Rift Valley) through FTIR, chemical and stable-isotope analyses. Journal of Archaeological Science. 37 (7), 1690-1699 (2010).
  20. Roberts, P., et al. Calling all archaeologists: guidelines for terminology, methodology, data handling, and reporting when undertaking and reviewing stable isotope applications in archaeology. Rapid Communications in Mass Spectrometry. , (2018).
  21. Snoeck, C., Pellegrini, M. Comparing bioapatite carbonate pre-treatments for isotopic measurements: Part 1-Impact on structure and chemical composition. Chemical Geology. 417, 394-403 (2015).
  22. Pellegrini, M., Snoeck, C. Comparing bioapatite carbonate pre-treatments for isotopic measurements: Part 2-Impact on carbon and oxygen isotope compositions. Chemical Geology. 420, 88-96 (2016).
  23. Wright, L. E., Schwarcz, H. P. Stable carbon and oxygen isotopes in human tooth enamel: identifying breastfeeding and weaning in prehistory. American Journal of physical anthropology. 106 (1), 1-18 (1998).
  24. Roberts, P., et al. Fruits of the forest: Human stable isotope ecology and rainforest adaptations in Late Pleistocene and Holocene (∼ 36 to 3 ka) Sri Lanka. Journal of human evolution. 106, 102-118 (2017).
  25. Zazzo, A., Balasse, M., Patterson, W. P. High-resolution δ13C intratooth profiles in bovine enamel: Implications for mineralization pattern and isotopic attenuation. Geochimica et Cosmochimica Acta. 69 (14), 3631-3642 (2005).
  26. Sydney-Zax, M., Mayer, I., Deutsch, D. Carbonate content in developing human and bovine enamel. Journal of dental research. 70 (5), 913-916 (1991).
  27. Rink, W. J., Schwarcz, H. P. Tests for diagenesis in tooth enamel: ESR dating signals and carbonate contents. Journal of Archaeological Science. 22 (2), 251-255 (1995).
  28. Szpak, P., Metcalfe, J. Z., Macdonald, R. A. Best practices for calibrating and reporting stable isotope measurements in archaeology. Journal of Archaeological Science: Reports. 13, 609-616 (2017).
  29. Wright, L. E., Schwarcz, H. P. Correspondence between stable carbon, oxygen and nitrogen isotopes in human tooth enamel and dentine: infant diets at Kaminaljuyu. Journal of Archaeological Science. 26 (9), 1159-1170 (1999).
  30. Schoeninger, M. J., Hallin, K., Reeser, H., Valley, J. W., Fournelle, J. Isotopic alteration of mammalian tooth enamel. International Journal of Osteoarchaeology. 13 (1-2), 11-19 (2003).
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Citar este artigo
Ventresca Miller, A., Fernandes, R., Janzen, A., Nayak, A., Swift, J., Zech, J., Boivin, N., Roberts, P. Sampling and Pretreatment of Tooth Enamel Carbonate for Stable Carbon and Oxygen Isotope Analysis. J. Vis. Exp. (138), e58002, doi:10.3791/58002 (2018).

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