Summary

Medición ecocardiográfica de parámetros diastólicos ventriculares derecho en ratón

Published: April 27, 2019
doi:

Summary

Aquí describimos y comparamos dos posiciones para obtener la vista apical de cuatro cámaras en ratones. Estas posiciones permiten la cuantificación de la función ventricular derecha, proporcionan resultados comparables y se pueden utilizar indistintamente.

Abstract

La disfunción diastólica es una característica prominente de la remodelación del venticalismo derecho (RV) asociada con condiciones de sobrecarga de presión. Sin embargo, la función diastólica RV rara vez se cuantifica en estudios experimentales. Esto podría deberse a dificultades técnicas en la visualización de la RV en la vista apical de cuatro cámaras en roedores. Aquí describimos dos posiciones que facilitan la visualización de la vista apical de cuatro cámaras en ratones para evaluar la función diastólica RV.

La vista apical de cuatro cámaras se habilita inclinando la plataforma de fijación del ratón hacia la izquierda y caudalmente (LeCa) o hacia la derecha y el craneal (RiCr). Ambas posiciones proporcionan imágenes de calidad comparable. Los resultados de la función diastólica RV obtenidos de dos posiciones no son significativamente diferentes. Ambas posiciones son comparativamente fáciles de realizar. Este protocolo se puede incorporar a los protocolos publicados y permite investigaciones detalladas de la función RV.

Introduction

La disfunción diastólica es una característica prominente de la remodelación ventricular derecha (RV)1 y se asocia con condiciones de sobrecarga de presión2. Ecocardiografía (EchoCG) se puede utilizar para la caracterización de la disfunción diastólica RV3,4. A pesar de los recientes avances en la ecocardiografía animal pequeña, rara vez se notifican mediciones de parámetros diastólicos. Por el contrario, las mediciones de la función sistólica seutilizan ampliamente para la caracterización de ratones transgénicos 5, así como para la evaluación de una respuesta al tratamiento6.

Esto puede explicarse en parte por las dificultades en la medición de parámetros diastólicos desde la vista apical de cuatro cámaras. La visualización del corazón en esta posición se puede facilitar inclinando la plataforma de fijación LeCa o RiCr. Incluso si se utilizan estas manipulaciones, los ecocardiógrafos no las reportan en sus manuscritos4,7. Por lo tanto, sigue sin estar claro si estas manipulaciones proporcionan resultados comparables. Además, esto también impide el desarrollo de la nomenclatura estandarizada de esta posición para ratones.

El objetivo de este estudio fue describir dos posiciones para la visualización apical de vista de cuatro cámaras y comparar sus resultados. Para determinar las diferencias entre las dos posiciones, hemos utilizado el modelo de banda de arteria pulmonar de ratón (PAB), en el que un clip de tantalio conduce a una oclusión parcial de la arteria pulmonar. Esta oclusión da como resultado la remodelación del ventrículo derecho y la disfunción. Los detalles completos de la operación PAB se pueden encontrar en el trabajo publicado anteriormente3. Los ratones operados por Sham, donde el clip se colocó junto a la arteria pulmonar, se utilizaron para la comparación. Las investigaciones de EchoCG se realizaron tres semanas después de la operación utilizando el sistema de imágenes con un cabezal de exploración de 30 MHz (ver Tabla de Materiales para ambos). La nomenclatura para la descripción de las posiciones y orientaciones entre el ratón y el haz de ultrasonido se utiliza como se describe en Zhou et al.7.

Protocol

El estudio se realizó de acuerdo con las normativas nacionales para la experimentación con animales y la Directiva 2010/63 de la UE. Preparar el equipo descrito anteriormente por Brittain et al.8. 1. Preparación del ratón Obtenga ratones C57Bl6/J masculinos de 12 a 13 semanas de edad y los aloje con un ciclo de luz/oscuridad de 12 h, a una temperatura ambiente constante y con acceso ad libitum a la comida de laboratorio estándar y al agua, hasta …

Representative Results

La vista apical de cuatro cámaras es difícil de obtener en ratones. Por lo tanto, las manipulaciones de la posición de la plataforma pueden ayudar a visualizar el corazón cambiando su posición en el tórax. La inclinación de la plataforma a la izquierda y a la derecha mejoró la ventana acústica y proporcionó imágenes de calidad comparable en modo B (Figura1). Después de obtener las posiciones correctas, las mediciones en los modos PW-, M- y TDI pro…

Discussion

La función de RV ecocardiográfica y la evaluación de dimensiones desde posiciones parasternales han sido bien descritas. Por el contrario, la posición apical en la ecocardiografía del ratón se ha descuidado en parte debido a dificultades técnicas. Utilizando una posición de plataforma horizontal, es difícil obtener una ventana acústica suficiente para imágenes de vista de cuatro cámaras. Para facilitar la toma de imágenes de esta posición, la plataforma se puede inclinar hacia la izquierda, una manipulació…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

El estudio fue financiado por el Instituto Ludwig Boltzmann para la Investigación Vascular Pulmonar.

Materials

RMV-707B scan head 30 MHz Visual Sonics P/N 11459 mouse scan head
VisualSonics Vevo 770® High-Resolution Imaging System Visual Sonics 770-230 ultrasound machine
Veet depilation creme for sensitive skin Veet 07768307 
Surgical tape Durapore 3M 3M Deutschland GmbH 1538-1 for fixation
Askina Brauncel cellulose swabs B.Braun 9051015
Aquasonic ultrasound gel Parker Laboratories Inc. BT025-0037L
Electrode Gel GE medical systems information technologies Inc. 2034731-002 apply to extremities for countinous ECG and heart rate monitoring
Thermasonic gel warmer Parker Laboratories Inc. 82-04-20 to reduce heat loss warm up the ultrasound gel before use

Referências

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  3. Egemnazarov, B., et al. Pressure overload creates right ventricular diastolic dysfunction in a mouse model: assessment by echocardiography. Journal of the American Society of Echocardiography. 28, 828-843 (2015).
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Citar este artigo
Egemnazarov, B., Kwapiszewska, G., Marsh, L. M. Echocardiographic Measurement of Right Ventricular Diastolic Parameters in Mouse. J. Vis. Exp. (146), e58021, doi:10.3791/58021 (2019).

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