अपमानजनक पाड़ आधारित ऊतक के विनाशकारी निगरानी-इंजीनियर रक्त वाहिका ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी का उपयोग विकास
Summary
गुणवाला उत्तेजना के साथ biodegradable पॉलिमर पाड़ आधारित ऊतक-इंजीनियर रक्त वाहिकाओं के वास्तविक समय संस्कृति में संवहनी और पाड़ गिरावट की प्रक्रिया की निगरानी के लिए विनाशकारी और लंबी अवधि के लिए प्रोटोकॉल द्वारा एक कदम ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी का उपयोग यहां वर्णित है ।
Abstract
संरचनात्मक और यांत्रिक गुणों के साथ इंजीनियर संवहनी भ्रष्टाचार प्राकृतिक रक्त वाहिकाओं के लिए इसी तरह की धमनी बाईपास की बढ़ती मांग को पूरा करने के लिए उम्मीद कर रहे हैं । विकास की गतिशीलता और क्षरण बहुलक पाड़ आधारित ऊतक-इंजीनियर रक्त वाहिकाओं (TEBVs) गुणवाला उत्तेजना के साथ remodeling प्रक्रिया का लक्षण संवहनी ऊतक इंजीनियरिंग के लिए महत्वपूर्ण है । ऑप्टिकल इमेजिंग तकनीक इंजीनियर ऊतक के vascularization की निगरानी के लिए शक्तिशाली उपकरण के रूप में बाहर खड़ा करने के लिए वास्तविक समय संस्कृति में उच्च संकल्प इमेजिंग सक्षम । यह कागज एक विनाशकारी और तेजी से वास्तविक समय इमेजिंग के विकास की निगरानी और दीर्घकालिक संस्कृति में TEBVs ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी (OCT) का उपयोग करके remodeling रणनीति को दर्शाता है । ज्यामितीय आकृति विज्ञान प्रक्रिया, दीवार मोटाई, और अलग संस्कृति समय अंक और गुणवाला उत्तेजना की उपस्थिति में TEBV मोटाई की तुलना सहित, मूल्यांकन किया जाता है । अंत में, OCT गुणवाला उत्तेजना या नहीं और प्रत्येक पोत क्षेत्र में, के तहत पुनर्निर्माण के ऊतकों में बहुलक के क्षरण के वास्तविक समय अवलोकन के लिए व्यावहारिक संभावनाओं प्रदान करता है बहुलक गिरावट का उपयोग कर के आकलन के साथ तुलना में स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (SEM) और ध्रुवीकरण माइक्रोस्कोप ।
Introduction
ऊतक इंजीनियर रक्त वाहिकाओं (TEBVs) एक आदर्श संवहनी भ्रष्टाचार के रूप में सबसे होनहार सामग्री की है1. आदेश में भ्रष्टाचार के विकास के लिए मूल जहाजों के रूप में समान संरचनात्मक और कार्यात्मक गुणों के साथ चिकित्सकीय उपयोगी हो, कई तकनीकों को संवहनी समारोह2,3बनाए रखने के लिए डिज़ाइन किया गया है । यद्यपि वहां प्रत्यारोपण के दौरान स्वीकार्य प्रत्यक्षता दरों के साथ जहाजों इंजीनियर गया है और चरण III नैदानिक अध्ययन4में, दीर्घकालिक संस्कृति और उच्च लागत भी TEBVs के विकास की निगरानी की आवश्यकता दिखा । extracellular मैट्रिक्स की समझ (ECM) विकास, रिमॉडलिंग, और biomimetic chemo में TEBVs में अनुकूलन प्रक्रियाओं-यांत्रिक वातावरण संवहनी ऊतक इंजीनियरिंग के विकास के लिए महत्वपूर्ण जानकारी प्रदान कर सकते हैं.
आदर्श छोटे व्यास इंजीनियर जहाजों के विकास को ट्रैक करने के लिए रणनीति5 , विनाशकारी बाँझ, अनुदैर्ध्य, तीन आयामी और मात्रात्मक होना चाहिए । TEBVs विभिंन संस्कृति शर्तों के तहत इस इमेजिंग रूपरेखा द्वारा मूल्यांकन किया जा सकता है, यहां तक कि परिवर्तन से पहले और संवहनी प्रत्यारोपण के बाद भी शामिल है । रणनीतियां इंजीनियर जहाजों के रहने की सुविधाओं का वर्णन करने की जरूरत है । ऑप्टिकल इमेजिंग तकनीक दृश्य और ऊतक जमाव और ठहराव की सामग्री की अनुमति देते हैं । अंय लाभ की संभावना को सक्षम करने के लिए कर रहे है गहरे ऊतक और उच्च संकल्प6,7के साथ लेबल मुक्त इमेजिंग । हालांकि, छवि विशेष अणुओं और वास्तविक समय की निगरानी के लिए कम आसानी से सुलभ ऑप्टिकल उपकरण एक महत्वपूर्ण व्यावहारिक बाधा है, जो रैखिक ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी के व्यापक आवेदन सीमित है. ऑप्टिकल जुटना टोमोग्राफी (अक्टूबर) हृदय हस्तक्षेप चिकित्सा8गाइड करने के लिए एक व्यापक रूप से इस्तेमाल किया नैदानिक उपकरण के रूप में intravascular इमेजिंग रूपरेखा के साथ एक ऑप्टिकल दृष्टिकोण है । साहित्य में अक्टूबर की विधि TEBVs9,10, संवहनी ऊतक इंजीनियरिंग अनुसंधान के लिए सकारात्मक इमेजिंग विधियों के साथ युग्मित की दीवार की मोटाई का आकलन करने के लिए एक तरह के रूप में सूचित किया गया था । जबकि, इंजीनियर संवहनी विकास और remodeling की गतिशीलता नहीं देखा गया था ।
इस पांडुलिपि में, हम चार सप्ताह संस्कृति के लिए biodegradable बहुलक पाड़ आधारित TEBVs की तैयारी का विस्तार । मानव गर्भनाल संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं (HUASMCs) का विस्तार कर रहे है और एक छिद्रित ह्रास polyglycolic एसिड (पीजीए) पाड़ों में उपप्रतिक्रिया में वरीयता प्राप्त । Biodegradable पॉलिमर ऊतक इंजीनियरिंग के लिए एक अस्थायी सब्सट्रेट में भूमिका निभाते हैं और एक निश्चित गिरावट दर11है । आदेश में पाड़ गिरावट और नव ऊतक गठन, ECM और पीजीए पाड़ के बीच एक उचित मैच सुनिश्चित करने के लिए प्रभावी संवहनी remodeling के लिए महत्वपूर्ण कारक हैं । छिड़काव प्रणाली देशी जहाजों के यांत्रिक microenvironment simulates और दबाव उत्तेजना के तहत एक सुसंगत विकृति बनाए रखता है ।
प्रस्तुत प्रोटोकॉल का उद्देश्य TEBVs इमेजिंग और संस्कृति की दीर्घकालिक निगरानी के लिए एक अपेक्षाकृत सरल और गैर विनाशकारी रणनीति का वर्णन है । इस प्रोटोकॉल रूपात्मक परिवर्तन और विभिंन संस्कृति की स्थिति के तहत इंजीनियर जहाजों की मोटाई माप के दृश्य के लिए उपयोग किया जा सकता है । इसके अतिरिक्त, ऊतक इंजीनियरिंग पाड़ों में बहुलक आधारित सामग्री क्षरण का विश्लेषण पहचान के लिए किया जा सकता है । इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (SEM) और इस प्रोटोकॉल, सहसंबंध और extracellular मैट्रिक्स वितरण और पीजीए गिरावट के ठहराव में इस्तेमाल किया जा सकता है, जो पाड़ का आकलन की सुविधा कर सकते है खुर्दबीन स्कैनिंग के तरीकों के संयोजन से गिरावट अक्टूबर इमेजिंग के साथ संयुक्त ।
Protocol
Representative Results
Discussion
संरचनात्मक और यांत्रिक मूल रक्त वाहिकाओं के उन लोगों के लिए इसी तरह के गुणों के साथ इंजीनियर जहाजों उत्पन्न करने के लिए नैदानिक उपयोग के लिए समय को कम करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं और संवहनी इंजीनियर?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम इस काम के समर्थन के लिए चीन के गुआंग्डोंग प्रांत (2016B070701007) के विज्ञान और प्रौद्योगिकी योजना परियोजना को स्वीकार करना चाहते हैं ।
Materials
| PGA mesh | Synthecon | ||
| silicone tube | Cole Parmer | ||
| connector | Cole Parmer | ||
| intravascular OCT system | St. Jude Medical, Inc | ILUMIEN™ OPTIS™ SYSTEM | |
| scanning electron microscopic | Philips | FEI Philips XL-30 | |
| polarized microscope | Olympus | Olympus BX51 | |
| sutures | Johnson & Johnson | ||
| pulsatile pump | Guangdong Cardiovascular Institute | ||
| LightLab Imaging software | St. Jude Medical, Inc |
Referências
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