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Un test In Vitro pour détecter l’activité ARNt-isopentényl transférase

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

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Un test In Vitro pour détecter l’activité ARNt-isopentényl transférase

DOI:

10.3791/58100-v

•

07:46 min

•

October 08, 2018

•

Antonio E. Chambers*¹, Adam E. Richardson*¹, David F. Read, Thomas J. Waller, Douglas A. Bernstein, Philip J. Smaldino

¹Department of Biology,Ball State University, ²Department of Genome Sciences,University of Washington, ³Department of Molecular, Cellular, and Developmental Biology,University of Michigan

Capítulos

00:04Título
00:39Preparing a 20% Polyacrylamide Denaturing Gel
02:17RNA Isopentenylation Assay
05:14Results: Detection of Isopentenylation by Mod5
06:42Conclusion

Summary

Tadução automática

Nous décrivons ici un protocole pour la caractérisation biochimique de l’enzyme de RNA-modification de la levure, Mod5 et discuter de comment ce protocole pourrait être appliqué à d’autres enzymes de modification des RNA.

Tags

TRNA-Isopentenyl Transferase In Vitro Assay RNA Modification Biochemical Characterization Recombinant Enzymes RNA Modifying Enzymes Acrylamide Gel Urea Gel TBE Buffer RNA Isopentenylation Assay DMAPP Mod5 2-mercaptoethanol RNA Precipitation

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