Medición de la temperatura del cuerpo de ratón con termómetro infrarrojo pasiva Anafilaxia sistémica y evaluación de la alergia alimentaria
Summary
Aquí presentamos un nuevo método para medir con precisión las diferencias de temperatura del cuerpo en pasiva Anafilaxia sistémica (PSA) y modelos de ratón de alergia de alimentos utilizando un termómetro infrarrojo. Este procedimiento ha sido duplicado exactamente en resultados anteriores de PSA.
Abstract
Medición de temperatura corporal del ratón es de suma importancia para la investigación de las alergias y síntomas anafilácticos. Sondas rectales para las lecturas de temperatura es común, y se han demostrado para ser exacta y valiosa en este sentido. Sin embargo, este método de medición de la temperatura requiere los ratones anestesiados con el fin de introducir la sonda sin lesión al animal. Esto limita la capacidad de observar otros fenotipos del ratón al mismo tiempo. Para investigar otros fenotipos y medir la temperatura, sondas rectales no son ideales, y se desea otro método. Aquí, presentamos un método no invasivo de medición de la temperatura que renuncia el requisito para la anestesia del ratón manteniendo fiabilidad igual a las sondas rectales en la medición de la temperatura corporal. Usamos un termómetro infrarrojo que detecta la temperatura de la superficie corporal en rangos entre 2 y 150 milímetros. Este método de medición de la temperatura corporal tiene éxito en reproducir confiablemente las tendencias de cambio de temperatura durante los experimentos de anafilaxia pasiva sistema en ratones. Nos muestran que las temperaturas superficiales del cuerpo son aproximadamente 2,0 ° C inferiores a las mediciones de la sonda rectal, pero el grado de caída de temperatura sigue la misma tendencia. Además, utilizamos la misma técnica para observar los ratones en un modelo de alergia alimentaria para evaluar niveles de actividad y la temperatura simultáneamente.
Introduction
Medición de la temperatura corporal ha sido una parte esencial del control de los efectos de los síntomas anafilácticos en animales modelos1,2. Las diferencias de temperatura se han medido tradicionalmente por Termómetros de sonda rectal en ratones3,4. Con estas mediciones, los investigadores han retratado confiablemente las diferencias de temperatura entre las variables; sin embargo, este método es un procedimiento lento y causa señal de socorro a los ratones, que pueden aumentar la temperatura del núcleo corporal. Sondaje rectal también puede causar lagrimeo y la infección mucosa3. Por otra parte, los ratones se deben anestesiar para humanamente Introduzca la sonda rectal para medir la temperatura3. Este es un proceso lento, y prohíbe la medición de las temperaturas sucesivas dentro de un período corto de tiempo. Además, no se puede observar fenotipos de actividad de ratones durante este tiempo hasta que el anestésico se usa totalmente apagado, que es otro proceso desperdiciador de tiempo. Más recientemente, otros métodos confiables para medir la temperatura del cuerpo han utilizado etiquetas transpondedor infrarroja pasiva implantados subcutáneamente o transmisores de radio que incluyen un sensor de temperatura3,5,6. Aunque se aceptan como la práctica ideal por algunos investigadores, estos métodos no son ampliamente utilizados debido a los altos costos iniciales y la angustia a los ratones, debido a la implantación quirúrgica de un sensor de temperatura debajo de la piel u otra parte del cuerpo.
Para demostrar que una diferencia de temperatura es un reflejo exacto de los síntomas en una enfermedad modelo1,2, ratones deben estar despierto durante la medición de la temperatura y poder volver a su normal actividad fenotípica inmediatamente antes y después de la medición. Para ello, se buscó un método por el cual esto se podría conseguir.
Nuestro objetivo era conocer con precisión y a bajo costo la temperatura corporal del ratón, sin necesidad de anestesia y sin restricciones en la actividad, para permitir la observación de fenotipos conductuales durante y después del tiempo de medición de la temperatura. Para lograr este objetivo, era evidente que una técnica menos invasiva que la temperatura rectal estándar se requiere. Los termómetros infrarrojos se han utilizado durante décadas en medicina clínica, especialmente en pediatría, para obtener una lectura precisa de la temperatura. Ha sido un método alternativo que ha permitido a los clínicos en forma rápida y precisa obtener mediciones de temperatura en bebés y niños inquietos que son activamente móviles. Implementado esta misma técnica en ratones y han desarrollado un método exitoso para obtener temperaturas sin anestesia. Lo importante, nos demuestran que este método es capaz de replicar los resultados de Anafilaxia sistémica pasivo bien establecidas con respecto a cambios de temperatura, mientras que también siendo capaces de observar la actividad del ratón a través de la medición. Además, utilizamos el mismo método para evaluar temperaturas corporales de ratones alérgica a los alimentos, mientras al mismo tiempo investigar otros síntomas, para demostrar que la temperatura corporal es un fiel reflejo del nivel de actividad y fenotipo general de la ratón.
Protocol
Representative Results
Discussion
El protocolo descrito se estableció con el objetivo de medir la temperatura corporal sin utilizar anestesia. A pesar de su relativa facilidad con que la temperatura pueden obtenerse lecturas, hay varias advertencias que acomodar a esta técnica, además de los efectos más obvios tales como manejo de estrés y diferentes temperaturas.
En primer lugar, para mantener las lecturas de la temperatura constante durante todo el experimento, el lugar donde la temperatura se está midiendo debe ser pr…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Las becas de investigación en Kawakami laboratorio fue apoyado por los NIH: R01 AR064418-01A1, R01 HL124283-01, R21 AI 115534-01 y R41AI124734-01.
Materials
| Non-contact infrared thermometer | SinoPie | DT-8861 | |
| Anti-dinitrophenyl (DNP) IgE | Sigma Aldrich | D8406-.2MG | |
| PrecisionGlide 30G needle | BD | 305128 | |
| PrecisionGlide 26G needle | BD | 305111 | |
| 1 mL syringe | BD | 309659 | |
| Dinitrophenyl – human serum albumin | Biosearch Technologies | D-5059-10 | |
| Ovalbumin from chicken egg white | Sigma Aldrich | A5503-50G | |
| Imject Alum | ThermoFisher Scientific | 77161 | |
| Animal Feeding Needles, disposable | Fisher Scientific | 01-208-87 |
Referências
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