Aqui descrevemos a técnica de ultra-som de alta frequência para análise na vivo de fetos em camundongos. Esse método permite o acompanhamento de fetos e a análise dos parâmetros da placenta, bem como o fluxo de sangue materno e fetal durante a gravidez.
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Artigo de método
Ultra-som de alta frequência para a análise do desenvolvimento Fetal e placentário na Vivo
Neste artigo
Resumo
Resumo
Ecografia é um método usado para detectar anomalias de órgãos e tumores nos tecidos humanos e animais. O método é não-invasivo, indolor e inofensivo, e a aplicação é fácil, rápido e pode ser feita em qualquer lugar, mesmo com dispositivos móveis. Durante a gravidez, o ecografia canonicamente é usada para acompanhar atentamente o desenvolvimento fetal. A técnica é importante para avaliar a restrição de crescimento intra-uterino (IUGR), uma complicação de gravidez com a curto e longo prazo consequências da saúde para a mãe e o feto. Compreender o processo de IUGR é indispensável para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas eficazes.
O sistema de ultra-som utilizado neste manuscrito é um dispositivo de ultra-som produzido para a análise de pequenos animais e pode ser usado em várias áreas de pesquisa, incluindo a investigação de gravidez. Aqui nós descrevemos o uso do sistema de análise em vivo de fetos de natural killer (NK) célula/mastócito (MC)-deficientes mães que dão à luz filhotes crescimento restrito. O protocolo inclui a preparação do sistema, manipulação dos ratos antes e durante as medições e o uso do modo-B, color doppler e modo doppler de onda de pulso. Foram analisados tamanho fetal, tamanho da placenta e fornecimento de sangue para o feto. Encontramos tamanhos reduzidos de implantação e menores placentas em camundongos NK/MC-deficiente do meio da gestação em diante. Além disso, MC/NK-deficiência foi associado ausente e inverteu o fluxo de diastólica final no fetal umbilicalis mesentéricos(UmA) e um índice de resistência elevada. Os métodos descritos no protocolo podem ser facilmente usados para tópicos relacionados e não relacionados à pesquisa.
Introdução
Ultra-som é ondas sonoras com frequências acima da faixa audível do ouvido humano, superior a cerca de 20 kHz1. Animais como morcegos, país de Gales, golfinhos2,3, ratos4, ratos5, e lémures rato6 todos usar ultra-som para orientação ou comunicação. Seres humanos aproveitam-se do ultra-som para diversas aplicações técnicas e médicas. Um aparelho de ultra-som é capaz de criar a onda sonora e distribuir e representar o sinal. Se o ultra-som encontra um obstáculo, o som é refletido, absorvido ou atravessá-la. A aplicaçã....
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Protocolo
Todos os métodos descritos aqui foram aprovados pelo "Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD."
1. procedimento experimental
- Companheiro de 6 a 8 semanas de idade feminina MC-deficiente C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) ratos e MC-suficiente C57BL/6J-Cpa3+/+ (controles de colônia; Cpa3+/+) com os machos BALB/c.
- Definir o dia de gestação (gd) 0 após a confirmação do plugue vaginal e tratar as fêmeas imediatamente após a confirmação do plug.
Nota: Um plug é o esperma do macho no orifício vaginal da....
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Resultados
Componentes individuais do sistema de ultra-som usado neste manuscrito são mostrados na Figura 1. A Figura 2 mostra o representante ultra-som imagens adquiridas no modo B-gd5, 8, 10 e 12 (B) e medição de área de implantação correspondente resultados (A), demonstrando uma área de implantação de redução significativa de anti-CD122-tratados Cpa3Cre / + ratos de gd10 em diante.
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Discussão
Usando nosso sistema de ultra-som, demonstrámos restrição de crescimento fetal em mães MC/NK-deficiente de gd10 na. Além disso, no gd10 e 12, observamos dimensões reduzidas da placenta e no gd14 a ausência ou a reversão de fluxo diastólico de final nas UmAs de alguns fetos de ratos uMC/uNK-deficiente. Este sinal de vascularização pobre foi associado com um índice de resistência significativa das artérias indicando IUGR. Resultados confirmam o papel importante das uMCs e uNKs durante a gravidez e o bem-estar fetal e na co.......
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Divulgações
Os autores não têm nada para divulgar.
Agradecimentos
Muitos agradecimentos a empresa de instrumento Imaging (especialmente a Magdalena Steiner, Katrin Suppelt e Sandra Meyer) pelo seu apoio rápido e agradável e por responder todas as perguntas sobre o sistema de imagem e seu uso rapidamente e completamente. Nós estamos gratos ao Prof Hans-Reimer Rodewald e Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Alemanha) para fornecer a colônia Cpa3. Além disso, agradecemos a Stefanie Langwisch, quem estava encarregado das colônias de rato e quem gerou as imagens na Figura 1.
O trabalho e o sistema da imagem latente foram financiados por subsídios da Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) para A.C.Z (ZE526/....
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb) | BioLegend | 123204 | Klon TM-β 1; 500 µ g |
| Sistema Vevo 2100 | FujiFilm VisualSonics Inc. | Transdutor Software MS550D-0421 | |
| Vevo LAB | FujiFilm VisualSonics Inc. | ||
| Isoflurano | Baxter | PZN: 6497131 | |
| Gel de eletrodo | Parker | 12_8 | |
| Fita cirúrgica | 3M Transpore | 1527-1 | |
| Creme para os olhos | Bayer | PZN: 1578675 | |
| Aplicadores com ponta de algodão | Raucotupf | 11969 | 100 peças |
| Creme depilatório | Reckitt Benckiser | ||
| Compressas | Nobamed Paul Danz AG | 856110 | 10 x 10 cm |
| Gel de ultrassom | Gello GmbH | 246000 |
Referências
- Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren? Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).
- Jones, G. Echolocation. Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).
- Simmons, J. A.
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Reimpressões e permissões
