Creación de Anastomosis de colon en ratones
Summary
Fuga anastomótica o avería después de la cirugía es una causa importante de morbimortalidad postoperatoria. La cirugía para crear una anastomosis colónica es un método confiable y reproducible para el estudio de los mecanismos de cicatrización de las anastomosis.
Abstract
Anastomosis intestinales se realizan comúnmente en las operaciones electivas y emergentes. Aún así, si existen pérdidas anastomóticas son un muy temidas complicaciones de cirugías de colon y pueden ocurrir en hasta un 26% de las anastomosis quirúrgicas, con mortalidad que hasta un 39% para los pacientes con una pérdida de tal. Actualmente, existe una escasez de datos que detalla los mecanismos celulares de cicatrización anastomótica. Diseñar estrategias preventivas y tratamiento modalidades de fuga anastomótica se podría potenciada enormemente por una mejor comprensión de la cicatrización anastomótica apropiado.
Un modelo murino es ideal, ya que estudios anteriores han demostrado que la anastomosis murina es la más clínico similar al caso humano en comparación con otros modelos animales. Ofrecemos un modelo murino fácilmente reproducible de la anastomosis colónica en ratones que permitirá otra ilustración de la cicatrización anastomótica.
Introduction
Una complicación muy temida de anastomosis quirúrgica del intestino es anastomosis ruptura o fuga. Fuga anastomótica, que causa derramamiento del contenido intraluminal en la cavidad abdominal, es potencialmente mortal y puede rápidamente llevar a sepsis intraabdominal; tasas de descarga varían de 0.3% a 5.5% después de anastomosis del intestino y levantan a entre 0.5% y 26% para la anastomosis colónica1,2. Las tasas de mortalidad después de fugas pueden ser tan altas como 39% debido a la rápida aparición de sepsis y progresión rápida a la muerte tras contaminación intraabdominal3. Estrategias preventivas y modalidades de tratamiento actualmente se basan en Fisiopatología que no se entiende completamente.
Actualmente, cicatrización anastomótica es a menudo comparado con la curación de herida cutánea más ampliamente estudiado, que está demostrando para ser un facsímil relativamente pobre. Se produce la consolidación de una serie de fases superpuestas, a partir de la fase de retraso inicial. Durante los días 0-4 después de la creación de la anastomosis intestinal, la fase lag se define por una respuesta inflamatoria aguda que borra la herida de restos celulares. A continuación, durante días 3-4, proliferación fibroblástica y la producción de colágeno tipifica la fase fibrophasia. Finalmente, después de 10 días, un período prolongado de colágeno que remodela se conoce como la fase de maduración. Es importante que tenga en cuenta que fuerza anastomótica es bastante baja y depende del apoyo extrínseco de quirúrgicamente colocados grapas o la sutura hasta el colágeno es depositado4. Entender el papel y el momento cada capa de la pared del intestino desempeña en la cicatrización anastomótica y la participación en tipos de la célula inflamatoria mediada por los macrófagos, así como marcadores sustitutos desdoblamiento para predecir fracaso anastomótico o éxito podría reducir la morbilidad, mortalidad y gastos sanitarios, siguiendo las indicaciones de las operaciones de colon5.
El modelo murino se ha demostrado en estudios previos para ser útil en mímica anastomosis humana6. Mientras que son populares, probadas y bien estudiado el modelo murino de anastomosis colónico, particularmente el método descrito por Komen et al. 7, estos modelos favorecen ileocecal o ascendente colocolonic técnicas anastomóticas8. Estudios previos de pacientes humanos han demostrado diferencias significativas en las tasas de fuga entre colocolonic, ileocecal y anastomosis colorrectales, resaltando la necesidad de más modelos experimentales en diferentes localizaciones anatómicas. Métodos adicionales, popularmente usados están dirigidos al desarrollo de un modelo que crea intencionalmente una fuga anastomótica en lugar de dilucidar los mecanismos celulares necesarios para la normal cicatrización anastomótica9. Modelos de ratón se han intentado en el pasado pero tienen las tasas de dehiscencia de la anastomosis o signos de fugas (es decir, formación de absceso) significativamente menor que los seres humanos y ratones6,7. Además, las líneas experimentales más genéticamente modificadas están disponibles en ratones de ratas. Esto hace que el modelo de rata menos útiles para un modelo de anastomosis. Además, porcinos y caninos modelos han tenido investigación clínica menos que el modelo murino6,7.
Proponemos un procedimiento seguro, técnicamente sencillo y rápidamente y fácilmente reproducible para la creación de anastomosis colónicas en un modelo murino que debe facilitar la mayor investigación en el mecanismo de herida anastomótica curación10 .
Protocol
Representative Results
Discussion
Hay varios pasos fundamentales para asegurar el éxito de y minimizar la morbilidad/mortalidad asociada a este procedimiento. En primer lugar, garantizar el manejo cuidadoso del tejido intestinal y tener cuidado para evitar lesiones de tracción al girar las vísceras para exponer los dos puntos. Tensión excesiva en el intestino o el mesenterio puede lesiones la necrosis intestinal del intestino o vasculatura y causa del sitio de la anastomosis. Además, afiladas pinzas o fórceps con dientes deben no utilizarse para ma…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ninguno
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
Referências
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