Estenose Atrial Esquerdo induzida Arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 no rato
Summary
Estenose atrial esquerdo (LAS) é uma nova técnica cirúrgica para estudar os mecanismos subjacentes arterialization venoso pulmonar e hipertensão pulmonar do grupo 2 (PH). Aqui, apresentamos um protocolo para contrair o átrio esquerdo usando um clipe de titânio para causar arterialization venoso pulmonar e moderar o PH em um rato.
Abstract
Desconhece-se o mecanismo de arterialization de venosa pulmonar induzida por estenose mitral e hipertensão pulmonar do grupo 2 (PH). Não há nenhum modelo de roedor do grupo 2 de PH, devido à estenose mitral (MS), para facilitar a investigação dos mecanismos da doença e possíveis estratégias terapêuticas. Apresentamos um modelo do rato de romance de pulmonar venosa induzida por congestão pulmonar venosa arterialization e grupo 2 PH causada por estenose atrial esquerdo (LAS). LAS é conseguida pela constrição do átrio esquerdo usando um clipe de titânio semi-cerrados. Após a cirurgia de LAS, um rato modelo com uma velocidade de fluxo transmitral maior que ou igual a 2,0 m/s na ecocardiografia se desenvolve gradualmente arterialization venoso pulmonar e grupo 2 PH ao longo de um período de 8 a 10 semanas. Neste protocolo, nós fornecemos o procedimento passo a passo de como realizar a cirurgia de LAS. O modelo de rato de LAS apresentado imita MS em humanos e é útil para estudar o mecanismo molecular subjacente de arterialization venosa pulmonar e para a avaliação pré-clínica de terapias para o grupo 2 PH.
Introduction
O objetivo deste artigo é demonstrar o procedimento passo a passo de como realizar a cirurgia de LAS em ratos. Cirurgicamente induzido LAS estreitamente imita MS e cor triatriatum em seres humanos, que envolvem a criação de uma obstrução mecânica no átrio esquerdo1. Obstrução da afluência de (LV) ventricular esquerda muitas vezes faz com que uma congestão da circulação venosa pulmonar, e os pacientes desenvolvem gradualmente o PH. A Organização Mundial de saúde classifica o PH devido a doenças do coração esquerdas no grupo 2, que é o grupo mais prevalente de PH2,3,4. O diagnóstico de PH em pacientes com doenças do coração esquerdos é associado com um maior do que um aumento de sete vezes na mortalidade padronizada de 1 ano4. Atualmente, não há nenhuma terapia aprovada para o grupo 2 PH além de tratamento à base deixou de doenças do coração (por exemplo, cirurgicamente, substituindo a válvula mitral estenóticas). No entanto, nem eficaz da válvula mitral substituição não resolver PH totalmente em até a metade dos pacientes com MS5. Este PH persistente é devido adverso pulmonar vascular remodelação, que é mal compreendido. Portanto, modelos animais são importantes para melhorar a nossa compreensão dos mecanismos moleculares subjacentes de adversos remodelamento vascular pulmonar no grupo 2 PH.
Existem alguns modelos animais do grupo 2 pH arterial coronariana ligadura6,7 e transversal da aorta faixas8,9,10 em roedores são os mais usados modelos animais do grupo 2 PH. A grande desvantagem destes modelos é o envolvimento de LV, que faz com que o resultado dos estudos de PH do grupo 2 difíceis de interpretar. Em contraste, a LV permanece intacta no modelo de LAS. Além disso, o modelo de LAS é clinicamente relevante, porque resulta na evolução lenta e progressiva do PH durante um período de 10 semanas11. Em humanos, MS é considerada significativa se a velocidade de fluxo Doppler transmitral for superior a 2,0 m/s11, e também utilizamos este número como um disco de corte para determinar se a cirurgia de LAS produziu estenose significativa. Além disso, embora o modelo de LAS gera PH ligeira ou moderada, ele demonstra alterações histológicas características, semelhantes em pacientes humanos, nomeadamente o desenvolvimento de arterialization venoso intrapulmonar11. O modelo do rato de LAS é um modelo de PH clinicamente relevante grupo 2 com função preservada de LV e romance. É apropriado para o estudo da fisiopatologia de remodelamento vascular pulmonar persistente, identificando alvos moleculares e testes de novas terapias para o grupo 2 PH.
Protocol
Representative Results
Discussion
O rato-LAS é um modelo de PH de romance grupo 2 que já recebeu um interesse substancial de pesquisadores no campo12,13. Comparando com os dois modelos de grupo 2 existentes, nomeadamente a veia pulmonar estenose (PVS) modelo14, usando leitões e a supracoronary da aorta bandas (SAB) rato modelo8,9,10, o modelo do rato de LAS tem vários vantagen…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Os autores reconhecem a sociedade Mitacs-Japão para a promoção da ciência (JSPS) programa de verão. Ping Yu Xiong foi suportado pelo financiamento do programa de Verão de Mitacs-JSPS para visitar o Jikei University School of Medicine. Dr. Minamisawa é suportado em parte pelo Ministério da educação, cultura, esportes, ciência e tecnologia do Japão (S.M.), o programa de MEXT-Supported para a Fundação de pesquisa estratégica em particular as universidades (S.M.), o veículo de corrida comemorativa Fundação (S.M.) e The Jikei University Graduate pesquisa fundo (S.M.) com apoio financeiro para este projeto. Dr. Archer é suportado em parte pelos E.U. National Institutes of Health (NIH) bolsas NIH 1R01HL113003-01A1 (fevereiro) e NIH 2R01HL071115-08 (fevereiro), a Fundação do Canadá para a inovação, Tier 1 Canadá cadeira de pesquisa em dinâmica mitocondrial e Translational Medicina (fevereiro), a Fundação William J. Henderson, a canadense rede Vascular e unidade cardiopulmonar da Rainha (QCPU).
Os autores reconhecem o Sr. Tadashi Kokubo, chefe de serviços fotográficos do centro de informações acadêmicas no Jikei University School of Medicine, para filmar o vídeo.
Materials
| 5-0 Prolene Suture | Johnson & Johnson – Ethicon | 8725H | Polypropylene suture with HEMO-SEAL Technology |
| Anaesthesia Machine | Wakenyaku Co., Ltd. | BRTK-100A | Air pump and anaethesia machine |
| Angiocatheter guidewire | Self-made | 10 cm guidewire glued to a 1 cc syringe | |
| Chest retractor | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | F-2 | |
| Chest tube 23G | Self-made | 10 cc syringe attached to a 23G needle plus plastic tube | |
| Curved forceps | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | A-14 | |
| Heating pad | Vivaria | MP-916-NV | Keep body temperature at 37 degree celsius |
| Horizon Ligating Clips | Teleflex | REF 003200 | Size Medium-Large |
| Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier For Medium-Large Size Horizon | Teleflex | REF 337085 | Ligation Clips Angled Jaw, (20cm) |
| Needle holder | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | MC-40 | |
| Rodent Respirator | CWE Inc | SAR-830/P | Small animal ventilator |
| Scissors | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | B-12 | Straight scissors ideally with round tips |
| Straight forceps | Natsume Seisakusho Co., Ltd. | A-7 | |
| Tongue depressor | Uchida Yoko Co., Ltd. | 8-615-2417 | Use the wide end |
Referências
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