Typiquement, le modèle d’injection de cou de souris est employé pour évaluer des comportements pruritogen-induits d’éraflure. Cependant, le modèle fournit des informations uniquement sur les démangeaisons, pas la douleur. Ici, un modèle d’injection de joue est introduit chez les souris qui peut être employé pour mesurer simultanément la douleur et les comportements liés aux démangeaisons.
Itch a été défini comme «une sensation cutanée désagréable qui provoque un désir de gratter» par Rothman en 1941. Dans les modèles de souris, les épisodes de rayures sont généralement comptés pour évaluer les démangeaisons induites par les pruritogènes. Cependant, les rapports précédents ont montré que les substances algiciques induisent également des comportements de grattage dans un modèle d’injection de cou de souris, qui est le test le plus commun utilisé pour les comportements de grattage. Cette découverte rend difficile l’étude des démangeaisons chez la souris. En revanche, la capsaïcine, un algogène commun, a réduit les comportements de grattage dans certaines expériences d’injection de cou. Par conséquent, l’effet de la douleur sur les comportements de grattage reste incertain. Il est donc nécessaire de développer une méthode pour étudier simultanément les démangeaisons et la sensation de douleur à l’aide de tests comportementaux. Ici, un modèle d’injection de joue est introduit qui peut être employé pour mesurer simultanément des comportements douleur-et démangeaisons-connexes. Dans ce modèle, les pruritogènes induisent des comportements de grattage tandis que les substances algiciques induisent des comportements d’essuyage. Utilisant ce modèle, l’acide lysophosphatidique (LPA), un médiateur de démangeaison trouvé dans les patients cholestatic présentant la démangeaison, est montré pour induire exclusivement la démangeaison mais pas la douleur. Cependant, dans les modèles de souris, LPA a été rapporté pour être à la fois un pruritogen et un algogen. L’enquête sur les effets de l’APL dans un modèle d’injection de joue de souris a montré que l’APL n’a induit que des égratignures, mais pas des comportements d’essuyage. Ceci indique que l’APL agit comme un pruritogen de la même façon chez les souris et les humains, et démontre l’utilité d’un modèle d’injection de joues pour la recherche sur les démangeaisons.
Démangeaisons a été caractérisée à l’origine comme une sensation qui induit des comportements de grattage pour enlever les matériaux nocifs de la surface de la peau. Cependant, les démangeaisons ont été au centre des thérapies pour les sensations désagréables provoquées par beaucoup de maladies telles que la dermatite atopique, les lésions neurogènes, et la cholestasis1. Dans ces cas, les démangeaisons sont une sensation désagréable grave semblable à la douleur. Par conséquent, les démangeaisons représentent une cible de recherche importante. Le comportement de grattage est le principal indicateur de démangeaisons dans les expériences animales, et les comportements de grattage peuvent être induits chez les souris en injectant des pruritogènes dans la peau sur leur cou2,3. Cependant, une étude précédente a montré que la capsaïcine, un algogène, induit également des comportements de grattage dans un modèle d’injection de cou4, ce qui rend difficile de distinguer les démangeaisons de la douleur dans ce modèle. En revanche, il a été constaté que la capsaïcine réduit les comportements de grattage dans un modèle d’injection du cou, ce qui indique que l’effet de la douleur sur les comportements de grattage est compliqué et dépend des conditions expérimentales. Par conséquent, des mesures simultanées de la douleur et des comportements liés aux démangeaisons permettraient l’analyse précise des pruritogènes et des algogènes. Steven G. Shimada et Robert H. LaMotte ont réussi à mesurer simultanément la douleur et les comportements liés aux démangeaisons en changeant le site d’injection du cou à la joue4. Dans le modèle d’injection de joue, la capsaïcine a induit l’essuyage, mais pas les comportements de grattage, alors que l’histamine, un pruritogen, a seulement induit des comportements de grattage. Par conséquent, ce modèle permet l’évaluation indépendante des démangeaisons et de la douleur, ce qui rend l’injection de la joue un modèle utile pour la recherche sur les démangeaisons. Lorsque vous essayez de déterminer si une substance d’essai est un pruritogène et/ ou un algogène, ce modèle fournit plus d’informations que le modèle d’injection du cou. Cet article décrit une méthode pratique pour effectuer l’injection de joue et compter les accès de grattage ou d’essuyage, et montre l’utilité de cette méthode pour évaluer des comportements de grattage induits par l’acide lysophosphatidique (LPA).
Dans cet article, un modèle d’injection de joue est présenté et montré pour être utile pour l’analyse de la douleur et des comportements liés aux démangeaisons.
Un rapport précédent a montré que les substances algiciques induisent des comportements de grattage dans un modèle d’injection de cou de souris4. En revanche, la capsaïcine a réduit les comportements de rayures dans d’autres expériences d’injection de cou (figure 3). Par conséquent, l’effet de la douleur sur le comportement de grattage reste incertain. Il est donc nécessaire de développer une méthode pour étudier simultanément la douleur et les démangeaisons par le biais de tests comportementaux. En utilisant un modèle d’injection de joue, l’effet d’une substance sur la douleur et la démangeaison peut être évalué.
Il a déjà été rapporté que l’APL intracellulaire active directement TRPV1 et TRPA1 comme un mécanisme de démangeaisons induites par l’APL5. En conséquence, la démangeaison LPA-induite pourrait être histamine indépendante. Une étude précédente a également montré qu’un modèle d’injection de joue peut être employé pour l’évaluation de la démangeaison histamine-indépendante16. Par conséquent, ce modèle peut être utilisé à la fois pour les démangeaisons dépendantes de l’histamine et -indépendantes.
L’une des étapes critiques de cette expérience est l’injection. Parce qu’il s’agit d’un test comportemental aigu, l’anesthésie ne peut pas être utilisée dans l’étape d’injection car elle pourrait affecter ces comportements. Par conséquent, la souris doit être tenue en toute sécurité afin d’effectuer une injection précise. Lorsque l’emprise sur l’animal n’est pas sécurisée, en particulier lors de l’injection d’algogènes forts, les souris peuvent lutter, conduisant à un volume d’injection inexacte et la profondeur, suivie de difficultés à interpréter les résultats. Lorsque vous manipulez une souris, tirez la peau sur la nuque entre le pouce et l’index pour inhiber le mouvement de la souris.
Une autre étape critique est l’analyse comportementale. Parce que le grattage est très rapide, la vidéo doit être regardée attentivement. En outre, l’essuyage peut être difficile à distinguer du toilettage. Par conséquent, l’utilisation de produits chimiques de contrôle positif tels que la capsaïcine est recommandée lors de la première expérience. Les conditions d’enregistrement et de relecture peuvent également affecter le comptage des deux comportements. S’il est difficile d’observer clairement les comportements, des miroirs peuvent être utilisés autour des cages pour améliorer les angles de vision4.
Il convient de noter que le modèle d’injection de jouepeut peut montrer la précision quantitative réduite pour les produits chimiques examinés que dans le modèle d’injection de cou. Comme le montre la figure 3 et la figure 4, la même quantité d’histamine induit plus de comportements de grattage dans le modèle de cou que dans le modèle de joue, et a montré de plus petites variations dans le modèle d’injection de cou. Une fois qu’une substance testée s’est avérée être un pruritogen avec de faibles effets algiciques avec le modèle d’injection de joue, le modèle d’injection de cou est recommandé pour l’analyse quantitative supplémentaire. Même avec ces limitations, le modèle d’injection de joue est utile pour l’évaluation précise des substances d’essai, particulièrement dans le domaine de la recherche de démangeaison.
The authors have nothing to disclose.
Nous sommes reconnaissants aux Drs Steven G. Shimada et Robert H. LaMotte (Yale University School of Medicine, Connecticut) dont les méthodes (référence 4) cette technique a été adaptée. Nous remercions également M. Kentaro Miyahara d’avoir créé les illustrations de souris. Cette étude a été soutenue par une subvention d’aide pour la recherche scientifique du Ministère de l’éducation, de la culture, des sports, des sciences et de la technologie au Japon (Nos 15H02501 et 15H05928 à M.T., et no 16K21691 à H.K.) et Uehara Memorial Foundation (à H.K.). Nous apprécions l’introduction de la méthode d’injection des joues par le professeur LaMotte à l’Université Yale.
capsaicin | Sigma | M2028 | |
diphenhydramine hydrochloride | Wako | 044-19772 | |
histamine | Sigma | H7125 | |
iMovie | Apple | ||
lysophosphatidic acid | Avanti Polar Lipids | 325465-93-8 | |
myjector | Terumo | ss-05M2913 | |
tween-80 | Sigma | P4780 | |
video camera | Panasonic | VX985M |