בדרך כלל, מודל הזרקת הצוואר של העכבר משמש להערכת התנהגויות שריטות הנובעות מהפרוריטוגן. עם זאת, המודל מספק מידע רק על גירוד, לא כאב. כאן, מודל הזרקת הלחי הוא הציג בעכברים אשר ניתן להשתמש בו זמנית למדוד כאב והתנהגויות הקשורות בגירוד.
גירוד הוגדר כ”תחושה עורית לא נעימה העוררת את הרצון לשרוט” על ידי רוטמן ב-1941. בדגמי העכבר, התקפי שריטות נספרים בדרך כלל כדי להעריך את הגירוד המושרה על ידי מתיריגנים. עם זאת, הדיווחים הקודמים הראו כי חומרים האלגברית גם לגרום התנהגויות גירוד במודל הזרקת צוואר העכבר, שהוא הבדיקה הנפוצה ביותר המשמשת עבור התנהגויות גירוד. ממצא זה מקשה על לימוד הגירוד בעכברים. לעומת זאת, קפסאיצין, algogen נפוץ, התנהגויות גירוד מופחת בכמה ניסויים בהזרקה בצוואר. לכן, השפעת הכאב על התנהגויות גירוד נותרת בלתי ברורה. לכן יש לפתח שיטה שתחקור בו את תחושת הגירוד והכאב באמצעות בדיקות התנהגותיות. כאן, מודל הזרקת הלחי הוא הציג אשר ניתן להשתמש בו זמנית למדוד כאב-והתנהגויות הקשורות בגירוד. במודל זה, הפרוטוקגנים לגרום התנהגויות גירוד בעוד חומרים האלגברית לגרום לנגב התנהגויות. באמצעות מודל זה, חומצה ליזוהודית (LPA), מגשר גירוד שנמצא בחולים כולסטטיים עם גירוד, מוצג באופן בלעדי לגרום גירוד אבל לא כאב. עם זאת, בדגמי העכבר, LPA דווחו להיות שניהם מalgogen. חקירת ההשפעות של LPA במודל הזרקת הלחי העכבר הראה כי LPA רק המושרה גירוד, אבל לא ניגוב התנהגויות. הדבר מעיד על כך ש-LPA פועל כפרוטוגן בדומה לעכברים ולבני אדם, ומדגים את כלי העזר של מודל הזרקת הלחי למחקר בגירוד.
גירוד במקור התאפיין בתחושה שגורמת לגירוד התנהגויות להסרת חומרים מזיקים ממשטח העור. עם זאת, גירוד כבר המוקד של טיפולים עבור תחושות לא נעימות שנגרמו על ידי מחלות רבות כגון דרמטיטיס אטופיק, נגעים נוירוגניים, ו כולאוסטזיס1. במקרים אלה, גירוד הוא תחושה קשה ובלתי נעימה דומה לכאב. לכן, גירוד מייצג יעד מחקרי חשוב. התנהגות גירוד היא האינדיקטור העיקרי לגירוד בניסויים בבעלי חיים, והתנהגויות שריטות יכולות להיגרם בעכברים על ידי הזרקת פרוריטוגנס לתוך העור על צווארו2,3. עם זאת, מחקר הקודם הראה כי קפסאיצין, algogen, גם מעורר התנהגויות גירוד הזרקת צוואר מודל4, מה שמקשה להפלות את הגירוד מן הכאב במודל זה. לעומת זאת, זה נמצא כי קפסאיצין מופחתת התנהגויות גירוד במודל הזרקת צוואר, המציין כי השפעת הכאב על התנהגויות גירוד הוא מסובך והוא תלוי בתנאים ניסיוני. לכן, מדידות בו של כאב והתנהגויות הקשורות לגירוד יאפשרו את הניתוח המדויק של הפרוריטוגנים והalgogens. סטיבן ג. שימדע ורוברט ה. למוטה הצליחו לשנות את מדידות הכאב וההתנהגויות הקשורות בו באמצעות שינוי אתר ההזרקה מהצוואר ועד ללחי4. במודל הזרקת הלחי, קפסאיצין המושרה ניגוב, אבל לא התנהגויות גירוד, בעוד היסטמין, התחריטוגן, רק התנהגויות גירוד המושרה. לכן, מודל זה מאפשר הערכה עצמאית של גירוד וכאב, ביצוע הזרקת הלחי מודל שימושי למחקר גירוד. כאשר מנסים לקבוע אם חומר מבחן הוא מalgogen ו/או המודל, מודל זה מספק מידע רב יותר מאשר מודל הזרקת הצוואר. מאמר זה מתאר שיטה מעשית לביצוע זריקת הלחי ולספירת התקפי גירוד או ניגוב, ומציג את כלי השירות של שיטה זו להערכת התנהגויות גירוד הנובעות מחומצה ליזובית (LPA).
במאמר זה, מודל הזרקת הלחי הוא הציג והוכח להיות שימושי ניתוח של כאב והתנהגויות הקשורות בגירוד.
דוח קודם הראה כי חומרים אלגברית לגרום התנהגויות גירוד בתוך מודל הזרקת צוואר העכבר4. לעומת זאת, קפסאיצין הפחתת התנהגויות שריטות בניסויים אחרים בהזרקה בצוואר (איור 3). לכן, השפעת הכאב על התנהגות הגירוד נותרת בלתי ברורה. לכן יש לפתח שיטה לחקור בו את הכאב והגירוד באמצעות בדיקות התנהגותיות. באמצעות מודל הזרקת הלחי, ניתן להעריך את השפעת החומר על הכאב והגירוד.
בעבר דווח כי LPA תאיים ישירות מפעיל TRPV1 ו TRPA1 כמנגנון של גירוד LPA המושרה5. בהתאם לכך, הגירוד המושרה. יכול להיות היסטמין עצמאי המחקר הקודם הראה גם כי מודל הזרקת הלחי יכול לשמש להערכת היסטמין-עצמאי גירוד16. לכן, ניתן להשתמש במודל זה עבור גירוד תלוי-היסטמין ובלתי תלוי.
אחד השלבים הקריטיים בניסוי זה הוא הזריקה. מכיוון שזהו מבחן התנהגותי חריף, לא ניתן להשתמש בהרדמה בשלב ההזרקה מאחר שהיא עלולה להשפיע על התנהגויות אלה. לכן, העכבר צריך להיות מאובטח על מנת לבצע זריקה מדויקת. כאשר החסימה על בעל החיים אינה מאובטחת, במיוחד בעת הזרקת algogens חזקים, העכברים עשויים להיאבק, המובילים לנפח הזרקה מדויק ולעומק, ולאחריו קושי לפרש את התוצאות. בעת טיפול בעכבר, משוך את העור על העורף בין האגודל לאצבע כדי לעכב את התנועה של העכבר.
צעד קריטי נוסף. הוא ניתוח התנהגותי מכיוון שגירוד מהיר מאוד, הסרטון צריך להיות מצופה היטב. יתר על כן, ניגוב יכול להיות קשה להבדיל מלטפח. לכן, השימוש בכימיקלים בשליטה חיובית כגון קפסאיצין מומלץ במהלך הניסוי הראשון. תנאי הקלטה והפעלה חוזרת יכולים להשפיע גם על ספירה של שני התנהגויות. אם קשה להתבונן באופן ברור בהתנהגויות, ניתן להשתמש במראות סביב הכלובים כדי לשפר את זוויות הצפייה4.
יצוין כי מודל הזרקת הלחי עשוי להראות דיוק כמותי מופחתת עבור כימיקלים נבדק מאשר במודל הזרקת הצוואר. כפי שמוצג באיור 3 ואיור 4, אותה כמות של היסטמין המושרה יותר התנהגויות גירוד במודל הצוואר מאשר במודל הלחי, והראה וריאציה קטנה יותר במודל הזרקת הצוואר. לאחר שחומר נבדק הוכח להיות מתחצפת עם אפקטים אלגברית נמוך עם המודל הזרקת הלחי, מודל הזרקת הצוואר מומלץ לניתוח כמותי נוסף. גם עם מגבלות אלה, מודל הזרקת הלחי שימושי להערכה מדויקת של חומרי בדיקה, במיוחד בתחום המחקר בגירוד.
The authors have nothing to disclose.
אנו אסירי תודה לג ‘ סטיבן שימדע ורוברט ה. למוט (בית הספר לרפואה של אוניברסיטת ייל, קונטיקט) מתוך שיטות העיבוד של הטכניקה. אנו מודים גם למר קנטארו מיאקי על יצירת איורים לעכבר. מחקר זה היה נתמך על ידי מענק סיוע למחקר מדעי מן המשרד לחינוך, תרבות, ספורט, מדע וטכנולוגיה ביפן (Nos. 15H02501 ו 15H02501 כדי ת, ו-No. 16K21691 ל-$) ו-Uehara הזיכרון קרן (ל. ק. ה). אנו מעריכים את המבוא של שיטת הזרקת הלחי ע י פרופ ‘ למוט באוניברסיטת ייל.
capsaicin | Sigma | M2028 | |
diphenhydramine hydrochloride | Wako | 044-19772 | |
histamine | Sigma | H7125 | |
iMovie | Apple | ||
lysophosphatidic acid | Avanti Polar Lipids | 325465-93-8 | |
myjector | Terumo | ss-05M2913 | |
tween-80 | Sigma | P4780 | |
video camera | Panasonic | VX985M |