공간 분석 및 쥐 상자 테스트 매달려의 저가 프로토콜 적용 구속 만성 스트레스
Summary
저가 프로토콜 발자국 분석의 구성 및 구속 스트레스 마우스 모델의 운동 장애를 평가 하는 데 유용 후 상자 테스트를 거
Abstract
걸음 걸이 장애 운동 장애를 가진 환자에서 자주 관찰 됩니다. 운동 장애에 대 한 사용 되는 마우스 모델, 걸음 걸이 분석에서는 쥐 환자의 증상을 모방 여부를 결정 하는 중요 한 행동 테스트입니다. 아무 자발적인 모터 형 마우스 모델에서 관찰 하는 때 모터 적자는 자주 스트레스에 의해 유발 됩니다. 따라서, 걸음 걸이 분석 스트레스 로드 다음 마우스 모델에서 모터 형을 평가 하기 위한 중요 한 방법 것입니다. 그러나, 연구원은 걸음 걸이 분석에서 정량 결과 자동으로 받도록 비싼 기구 필요가 얼굴. 스트레스, 스트레스 비싼 기구 전기 충격에 대 한 필요 및 실행 없이 간단한 방법으로 로드 바람직합니다. 따라서, 우리는 상자 테스트 모터 기능을 평가 하 거 종이와 잉크, 공간 분석의 구성 된 간단 하 고 저가 프로토콜 소개 하 고 스트레스 로드 원뿔 튜브와 구속에 의해 정의 된. 쥐의 모터 적자가이 프로토콜에 의해 성공적으로 감지 했다.
Introduction
운동 장애는 초과 또는 자발적 또는 자동 운동1의 소수를 보여주는 신 경계의 소요로 정의 됩니다. 특히, 걸음 걸이 장애 운동 장애2,,34환자 중 자주 설명 되어 있습니다. 따라서, 걸음 걸이 분석 운동 질환의 동물 모델의 유효성 검사에 대 한 적합 한 행동 테스트입니다. 쥐, 자동화 된 걸음 걸이 분석 디딜 방 아6,7에 의해 자연 속도5 및 조정 가능한 속도에서 걷기를 위해 수행 되었습니다. 이러한 분석은 자동으로 걸음 걸이의 정량 결과 제공합니다. 걸음 걸이 장애를 감지 하는 다른 방법은 발자국 분석을 이라고 합니다. 잉크와 피트의 바닥 라벨, 후 쥐 종이에 고 발자국 분석. 처음에, 바 셀 린 그리고 가루 숯8발자국 시각화 하는 데 사용 했다 다음 거짓말 탐지기 종이9 에 잉크 및 인화지10사진 개발자에 의해 대체 되었다. 잉크를 사용 하 여 종이 다른 방법 보다 저렴 하 고 덜 독성 방법11현재까지 남아 있다. 발자국 분석과 자동된 분석5,,67 에 비해 덜 비싼은 풍부한 연구 자금 없이 연구원에 대 한 마우스 모델에 운동 장애를 평가 하기 위해 유용할 것 이다 .
교수형 상자 테스트 와이어 케이지 뚜껑12 를 사용 하 여 4 개의 다리 걸려 테스트의 일종 이며 와이어 메쉬 스크린13. 상자는 상자 센터 바에 따라 정상 회전 메쉬 뚜껑 기구 이다. 걸음 걸이 분석 뿐만 아니라 테스트 수 있습니다 저렴 하 고 쉽게 수행. 따라서, 우리는 교수형을 실시 평가 그립 강도와 균형, 또한이 프로토콜에 발자국 분석 하기 상자 테스트.
스트레스는 운동 장애14,15의 증상을 유도합니다. 아무 자발적인 모터 형 운동 장애16,,1718의 마우스 모델에서 관찰 하는 경우에 모터 적자는 종종 여러 가지 만성 스트레스에 의해 유발 됩니다. 구속은 스트레스 때문에 동물 육체적으로 무사 히19 이며 비용 덜 전용된 기구와 전기 충격 같은 다른 방법에 비해 쥐, 로드에 대 한 일반적으로 사용 되는 방법의 하나 이며 디딜 방 아의 사용과 실행 강제. 구속 수감 숨어 50 mL 원뿔 튜브에 마우스에 의해 수행 되는 관으로 와이어 같은 다른 방법을 메쉬 스 트레이너, 녹화 사지, 거 즈 (검토20)와 동물의 포장 보다 쉽습니다. 이 문서에 요약 하는 면적의 프로토콜 분석 및 교수형 상자 튜브에 의해 구속 후 테스트. 이 프로토콜 자발적인 모터 형 없이 운동 장애의 마우스 모델을 사용 하 여 우리를 도울 것입니다.
Protocol
모든 동물 실험은 인간적 인 방식으로 실시 했다. 기관 동물 실험 위원회의: Jichi 의료 대학 연구 승인. 연구 기관 규정에 따라 동물 실험 및 기본 지침에 대 한 동물 실험의 적절 한 수행과 학술 연구 기관에서 관련 활동에 대 한 일본의 문 부 과학성의. 이 프로토콜에서 사용 하는 마우스 되었습니다21위에서 설명한. 1. 교수형 상자 테스트 각 마우스의 …
Representative Results
Atp1a3 의 heterozygous 남성 쥐 (Atp1a3+ / −)는 마우스 모델 빠른 발병 dystonia 위한 parkinsonism 및 야생-타입 littermates이이 프로토콜에 사용 되었다. Atp1a3+ / − 나이 (그림 5A 와 그림 5B, 원을 열고 광장)의 4 주 보다 야생 타입의 forelimb와 hindlimb 상당히 짧은 보 폭 길이 보였다. ‘스트레스’ Atp1a3+ /…
Discussion
공간 분석 및 테스트 교수형 상자는 마우스의 모터 기능에 대 한 간단 하 고 저렴 한 행동 테스트. 여러 마우스 모델에서 neurobehavioral 고기가이 테스트에 의해 성공적으로 발견 되었습니다. 예를 들어 루 경화 증24, 증 telangiectasia25, Huntington의 질병26 및 dystonia27, 중복의 증가 길이에 비대칭 보 폭의 증가 길이 보 폭 길이 단축 하 …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 JSP (과학의 승진을 위한 일본 사회) KAKENHI (선진적인 과학 연구 c)에 의해 지원 되었다 번호 18 K 07373 (호 성)와 사립 대학에 대 한 보조금.
Materials
| Hanging box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/ | |
| Marking pen | ZEBRA | MO-120-MC-BK | |
| Goal box | O’hara & Co. | http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/ | Accessory for apparatus of balanced beam test |
| Boxes | O’hara & Co. | – | Side wall of runway |
| Black ink | Shin-asahi | – | |
| Red ink | Maruyamakogyo | BC-6 | |
| Disposable Petri Dish | Corning | 351008 | Petri dishe (35 mm in diameter) |
| Askul Multipaper Super White J Monochrome A3 | Askul | 701-712 | White paper (29.7 cm x 42 cm x 0.09mm) |
| 50 mL Conical tube | Corning | 430829 | |
| Square drill | KAKURI Corporation | DIY FACTORY (K32-0313) |
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Citar este artigo
Sugimoto, H., Kawakami, K. Low-cost Protocol of Footprint Analysis and Hanging Box Test for Mice Applied the Chronic Restraint Stress. J. Vis. Exp. (143), e59027, doi:10.3791/59027 (2019).