Модифицированная Гетекопическая задняя Остеомйокутанеаус модель лоскут в крыса для поступательного васкуляризированных композитных аллотрансплантации исследований
Summary
Васкуляризированных композитных аллотрансплантатов предлагает изменяющие жизнь выгоды для трансплантации реципиентов, но биологические причины отторжения трансплантата и васкулопатии остаются плохо понятыми. Хирургическая модель грызунов, представленная здесь, предлагает воспроизводимость, клинически релевантные модели трансплантации, позволяя исследователям оценить отклонения событий и потенциальные терапевтические стратегии, чтобы предотвратить их возникновение.
Abstract
Васкуляризированной композитной аллотрансплантации (VCA) является относительно новой области в реконструктивной хирургии. Клинические достижения в области человеческого VCA включают трансплантацию руки и лица и, в последнее время, брюшную стенку, матку и урогенитальную трансплантацию. Функциональные результаты превзошли первоначальные ожидания, и большинство получателей пользуются улучшенным качеством жизни. Однако по мере накопления клинического опыта необходимо решать проблему хронического отторжения и осложнений, связанных с иммуноподавлением. Во многих случаях, когда графтов не удалось, причинные патологии была ишемическая васкулопатия. Биологические механизмы острого и хронического отторжения, связанного с ВЦА, особенно ишемическая васкулопатия, являются важными областями исследований. Однако, из-за очень небольшого количества пациентов VCA, оценка предлагаемых механизмов лучше решается в экспериментальной модели. Несколько групп использовали животных моделей для решения некоторых из соответствующих нерешенных вопросов в VCA отказа и васкулопатии. В литературе описано несколько моделей с участием различных видов. Здесь мы представляем воспроизводимые модели VCA гетекотопическая задняя часть остеомйокутанеаус лоскут в крыс, которые могут быть использованы для поступательного исследования VCA. Эта модель позволяет серийной оценке трансплантата, в том числе биопсии и различных методов визуализации, сохраняя при этом низкий уровень заболеваемости.
Introduction
Восстановительная хирургия для катастрофических потерь тканей от ампутацией, травм взрыва, злокачественных новообразований и врожденных дефектов ограничена наличием ткани пациента и дополнительной заболеваемости, вызванной на донорских участке. В некоторых случаях, таких как жертвы ожога или четырехстороннее ампутантов, жизнеспособная ткань для реконструкции не доступна пациенту. В 1964 году в Эквадоре была проведена первая современная пересадка рук. Хотя это был технический успех, подавление иммунитета в то время было недостаточным, чтобы предотвратить отторжение, и трансплантат был потерян менее чем за 3 недели1. В 1998 и 1999, первые трансплантаты руки в самомоднейшей эре иммуноподавления были выполнены в Лионе, Франции2 и Луисвилле, кентукки, США3. В первый раз, Реконструктивная хирурги могут заменить, как с как. Трансплантация лица была впервые выполнена в 20054, и в настоящее время регулярно выполняется ряд других трансплантатов VCA, таких как брюшной стенки5, матки и урогенитальных трансплантаций6.
В отличие от твердых трансплантации органов, большинство методов VCA связаны с наличием весьма антигенной донорской кожи. Клинический опыт определил, что острый отказ кожи относительно прост в контроле, но может способствовать хроническому отторжению основных тканей и сосудов, которые не реагируют на лечение7. Сосудистая дисфункция, связанная с аллоиммунным ответом, является более зловещим препятствием для области VCA7. Макровакровопатии привести к перфузии дефицита, задержка заживления и воспалительных заболеваний. Оба свободно агрессивной васкулопатии большого сосуда и очаговых гиперплазии интимал происходят в руках трансплантации получателей7. Кроме того, микровакровопатии вероятно, способствовать VCA осложнений, а также и может даже привести к отказу событий. В то время как иммунные и Неиммунные факторы, вероятно, играют роль в васкулопатии реципиентов трансплантации рук, специфические механизмы, продвиганые дисфункцию дистальных сосудов в VCA, неизвестны, особенно в контексте низкосортных, хронических отвержения. Эти нерешенные вопросы требуют развития животных VCA модель, которая позволит для последовательной оценки трансплантата во время клинического хода отказа VCA/техническое обслуживание и васкулопатии. Такая модель будет предлагать информацию о отторжении и васкулопатии в условиях иммуноподавления, инфекционной проблемы, и/или других послеоперационных травматических травм8,9.
Здесь представлена аллогенной крысы VCA гетериопик остеомйокутанеаус задняя модель лоскут. На основе ранее опубликованных моделей VCA, эта процедура является технически легко выполнить, воспроизводимые в большом количестве, и экспонаты минимальной заболеваемости и дискомфорта для получателя животного. Эта модель была разработана, чтобы позволить клинических и гистопатологических оценок принятия VCA против отторжения, и дает возможность оценить основные иммунные и Неиммунные механизмы, участвующие в отторжении.
Protocol
Representative Results
Discussion
При разработке этой модели VCA были рассмотрены несколько ключевых вопросов. Во-первых, важно, чтобы включить нетронутыми кость (голени и малоберцовой кости), костный мозг, и кожи в трансплантата. В то время как клинические трансплантации рук от взрослых доноров не переносят значительное…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана Управлением помощника министра обороны по делам здравоохранения в рамках программы по медицинским исследованиям, направленной Конгрессом, под премией No. W81XWH-13-2-0057. Мнения, интерпретации, выводы и рекомендации являются мнениями авторов и не обязательно одобрены министерством обороны.
Materials
| Acepromazine | Henry Schein | 5700850 | |
| Adventitia Scissors | ASSI | SAS15R8 | |
| Approximator Clamp (Double) | ASSI | ABB2V, ABB22V | |
| Approximator Clamp (single) | FST | 00398-02 | |
| Clamp Applying Forceps | ASSI | CAF4 | |
| Dissecting Scissors | ASSI | SDS18R8 | |
| Flushing blunt needle 27G | SAI | ||
| Heparin Sodium | Sagent | 25021-400-30 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar | ASSI | 103000BPS03 | |
| Jewelers forceps #3 | FST | 11231-30 | |
| Ketamine HCl 100 mg/ml | Zoetis | 043-304 | DEA License required |
| Lactated Ringer Solution | Hospira | 0409-7953-03 | |
| Lactated Ringer Solution + 5% Dextrose | Hospira | 0409-7953-09 | |
| Meloxicam | Henry Schein | 11695-6925-2 | |
| Micro forceps | ASSI | JFAL3 | |
| Micro needle holder | ASSI | B138 | |
| Prograf (Tacrolimus) 5 mg/ml | Astellas | 0469-3016-01 | |
| Suture, 10-0 Prolene | Ethicon | W2790 | or 10-0 Ethilon (2830) |
| Suture, 4-0 Coated Vicryl | Ethicon | J714D | |
| Vessel Dilator Forceps | ASSI | D5AZ | |
| Xylazine | VetOne | 13985-612-50 |
Referências
- Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World. Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).
- Dubernard, J. M., et al. Human hand allograft: report on first 6 months. Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).
- Jones, J. W., Gruber, S. A., Barker, J. H., Breidenbach, W. C. Successful hand transplantation. One-year follow-up. Louisville Hand Transplant Team. The New England Journal of Medicine. 343 (7), 468-473 (2000).
- Devauchelle, B., et al. First human face allograft: early report. Lancet. 368 (9531), 203-209 (2006).
- Broyles, J. M., et al. Functional abdominal wall reconstruction using an innervated abdominal wall vascularized composite tissue allograft: a cadaveric study and review of the literature. Journal of Reconstructive Microsurgery. 31 (1), 39-44 (2015).
- Kollar, B., et al. Innovations in reconstructive microsurgery: Reconstructive transplantation. Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 800-806 (2018).
- Kaufman, C. L., et al. Graft vasculopathy in clinical hand transplantation. American Journal of Transplantation. 12 (4), 1004-1016 (2012).
- Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation. Birth Defects Research Part C: Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).
- Kaufman, C. L., et al. Immunobiology in VCA. Transplantation International. 29 (6), 644-654 (2016).
- Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , (2011).
- Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat. Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).
- Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation. Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).
