Summary

माउस Calves पर लगातार मालिश की तरह perturbations के आवेदन और परिणामी इंट्रामस्क्युलर दबाव परिवर्तन की निगरानी

Published: September 20, 2019
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Summary

यहाँ हम माउस बछड़ों के लिए परिभाषित यांत्रिक भार लागू करने के लिए और सहवर्ती इंट्रामस्क्युलर दबाव परिवर्तन की निगरानी के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन. प्रयोगात्मक प्रणाली है कि हम विकसित किया है शारीरिक व्यायाम और मालिश के लाभकारी प्रभाव के पीछे तंत्र की जांच के लिए उपयोगी हो सकता है.

Abstract

मालिश आम तौर पर दर्द और सूजन से राहत के लिए फायदेमंद माना जाता है. हालांकि पिछले अध्ययन ों कंकाल की मांसपेशियों पर मालिश के विरोधी भड़काऊ प्रभाव की सूचना दी है, पीछे आणविक तंत्र खराब समझ रहे हैं. हमने हाल ही में स्थानीय चक्रीय संपीड़न (एलसीसी) लागू करने के लिए एक सरल उपकरण विकसित किया है, जो अलग आयाम के साथ इंट्रामस्क्युलर दबाव तरंगों को उत्पन्न कर सकता है। इस उपकरण का उपयोग करके, हमने दिखा दिया है कि एलसीसी सिटू में मैक्रोफेज की भड़काऊ प्रतिक्रियाओं को रोकदेता है और स्थिरीकरण-प्रेरित मांसपेशी शोष को कम करता है। यहाँ, हम अनुकूलन और एलसीसी के आवेदन के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन स्थिरीकरण प्रेरित सूजन और माउस hindlimbs के कंकाल की मांसपेशियों के शोष के खिलाफ एक मालिश की तरह हस्तक्षेप के रूप में. प्रोटोकॉल है कि हम विकसित किया है शारीरिक व्यायाम और मालिश के लाभकारी प्रभाव अंतर्निहित तंत्र की जांच के लिए उपयोगी हो सकता है. हमारे प्रयोगात्मक प्रणाली मांसपेशी homeostasis के यांत्रिक विनियमन स्पष्ट करने के लिए विश्लेषणात्मक दृष्टिकोण का एक प्रोटोटाइप प्रदान करता है, हालांकि आगे के विकास के लिए और अधिक व्यापक अध्ययन के लिए किए जाने की जरूरत है.

Introduction

मालिश आम तौर पर दोनों दर्द से राहत और प्रतिस्पर्धी एथलीटों और गैर athletes के बीच शारीरिक प्रदर्शन के सुधार के लिए फायदेमंद माना जाता है1,2. वास्तव में, पिछले अध्ययनों से पता चला है कि मालिश स्थानीय सूजन को दबा3 और बाद व्यायाम मांसपेशियों की क्षति से वसूली का संकेत देता है4,5. मालिश के लाभकारी प्रभाव अंतर्निहित आणविक तंत्र काफी हद तक अज्ञात रहते हैं.

मालिश पर मशीनी जांच के साथ कठिनाइयों में से एक प्रयोगात्मक तकनीक जिसके द्वारा मालिश की तरह हस्तक्षेप का परीक्षण कर रहे हैं की पुन: उत्पादनक्षमता से संबंधित है. पिछले अध्ययनों में, प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं है कि मालिश नकल ज्यादातर शारीरिक हस्तक्षेप के आवेदन शामिल चिकित्सकों के शरीर के अंगों का उपयोग कर, जैसे हथेलियों और उंगलियों6,7,8. इससे उनके परिमाण, आवृत्ति, अवधि और विधा को ठीक से पुन: उत्पन्न करना कठिन हो जाता है।

कई उपकरणों को लक्षित ऊतकों के लिए परिभाषित यांत्रिक भार लागू करने के लिए विकसित किया गया है. उदाहरण के लिए, ज़ेंग एट अल ने चूहों के हिंदलिंब्स9 और वांग एट अल के लिए लंबाई-वार यांत्रिक लोडिंग के लिए एक वायवीय प्रणाली विकसित की है। वास्तविक समय प्रतिक्रिया नियंत्रण10| उनकी तुलना में, हमारे स्थानीय चक्रीय संपीड़न (LCC) प्रणाली बहुत आसान है, निर्माण के लिए अब तक कम लागत की मांग. फिर भी, हम इंट्रामस्क्युलर दबाव परिवर्तन है कि हल्के मांसपेशियों में संकुचन के दौरान उत्पन्न कर रहे हैं पुन: पेश कर सकते हैं. इस उपकरण का उपयोग करना, हम सफलतापूर्वक प्रदर्शन किया है कि मालिश की तरह यांत्रिक हस्तक्षेप स्थानीय अंतरालीय तरल पदार्थ गतिशीलता modulate और स्थिरीकरण प्रेरित मांसपेशी शोष11को कम.

यहाँ, हम अपने डिवाइस और प्रोटोकॉल है, जो मदद कर सकता है व्यायाम और मालिश के सकारात्मक प्रभाव के पीछे आणविक तंत्र का पता लगाने के विवरण का वर्णन. प्रोटोकॉल की रूपरेखा अनुपूरक चित्र 1के रूप में प्रस्तुत की गई है।

Protocol

सभी पशु प्रयोगों विकलांग व्यक्तियों के लिए राष्ट्रीय पुनर्वास केंद्र की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति के अनुमोदन के तहत आयोजित किया गया. 1. माउस द्विपक्षीय हिंडिंब्स की अचलीकरण <p class="jove_c…

Representative Results

हमारी पिछली टिप्पणियों के अनुरूप12, गैस्ट्रोकेनियस मायोफाइबर्स के सीएसए में हिंडिम्ब स्थिरीकरण (चित्र 2ए , बी) की कमी काफी कम हो गई थी । इसके अलावा, हमारे इम्यूनोफ्लोरेसेंस धु?…

Discussion

हम एक मालिश की तरह यांत्रिक उत्तेजना, जो विरोधी भड़काऊ प्रभाव है लागू करने के लिए एक विधि का वर्णन किया है. हमारी प्रणाली लाभ निम्नलिखित है, तब भी जब उन लोगों के साथ तुलना में पहले की सूचना दी. सबसे पहले, प?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

हम परियोजना के दौरान उनके लगातार समर्थन के लिए के.Nakanishi, के हमामोतो, एन Kume, और के Tsurumi धन्यवाद. यह काम जापानी स्वास्थ्य, श्रम और कल्याण मंत्रालय से इंट्रामरल रिसर्च फंड द्वारा समर्थित भाग में था; विज्ञान के संवर्धन के लिए जापान सोसायटी से वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए अनुदान में सहायता; निजी विश्वविद्यालयों में सामरिक अनुसंधान फाउंडेशन के लिए MEXT समर्थित कार्यक्रम, 2015-2019 जापानी शिक्षा, संस्कृति, खेल, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय (S1511017) से.

Materials

Aluminum wire DAISO JAPAN B028 An aluminum wire is used to avoid escaping restriction by the wire
Blood pressure telemeter Millar SPR-671 A blood pressure telemeter is used to mesure intramuscular pressure.
DAPI Thermo Fisher Scientific D1306 DAPI is a fluorescent probe which is commonly used to stain DNA for fluorescent microscopy.
Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 (Dilution ratio, 1:500) Invitrogen A11034 Antibody for immunohistochemical staining.
Goat anti-rat Alexa Fluor 568 (Dilution ratio, 1:500)) Invitrogen A11077 Antibody for immunohistochemical staining.
ImageJ NIH N/A Analysis software for image
LabChart8 ADInstrumens   Analysis software for acquiring biological signals.
Prolong gold Thermo Fisher Scientific P36930 Prolong gold is for mounting stained samples.
Protein Block Serum-Free Dako X090930-2 For blocking non-specific background staining in immunohistochemical procedures.
Rat monoclonal anti-laminin-2 antibody (Dilution ratio, 1:1000) Sigma Aldrich L0663 Antibody for immunohistochemical staining.
Rat monoclonal anti-F4/80 antibody (Dilution ratio, 1:500) Abcam ab6640 Antibody for immunohistochemical staining.
Rabbit polyclonal anti-MCP-1 antibody (Dilution ratio, 1:1000) Abcam ab25124 Antibody for immunohistochemical staining.
Rabbit polyclonal anti-TNF-α antibody (Dilution ratio, 1:1000) Abcam ab66579 Antibody for immunohistochemical staining.
Surgical tape 3M Japan 1530EP-0 Surgical tape is used to restrict joint movement.

Referências

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Citar este artigo
Sakitani, N., Maekawa, T., Saitou, K., Suzuki, K., Murase, S., Tokunaga, M., Yoshino, D., Sawada, K., Takashima, A., Nagao, M., Ogata, T., Sawada, Y. Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes. J. Vis. Exp. (151), e59475, doi:10.3791/59475 (2019).

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