पेरिवस्कुलर वसा ऊतकों द्वारा मॉडुलन पर ध्यान केंद्रित के साथ अलग Mesenteric धमनियों का उपयोग संवहनी टोन प्रतिक्रिया का मूल्यांकन
Summary
प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए तार मायोग्राफी का उपयोग करने के लिए mesenteric धमनियों से अलग करने के लिए एक प्रकार का सममितीय तनाव का मूल्यांकन करने के लिए चूहों, endothelial कोशिकाओं और perivascular वसा ऊतकों से जारी किए गए कारकों द्वारा मॉडुलन के विशेष विचार के साथ.
Abstract
परिवर्तित संवहनी टोन प्रतिसादिता पथभौतिकीय उत्तेजकता हृदय और चयापचय रोगों की एक विस्तृत श्रृंखला के विकास के लिए योगदान देता है । Endothelial शिथिलता कम vasodilatation और धमनियों की वृद्धि वाहिकासंकीर्णन के लिए एक प्रमुख दोषी का प्रतिनिधित्व करता है । वसा (फैट) धमनियों के आसपास के ऊतकों endothelium पर निर्भर छूट और/या संवहनी चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं के संकुचन के नियमन में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं । अंतर-endothelium और perivascular वसा ऊतकों के बीच वार्ता पूर्व vivo का मूल्यांकन किया जा सकता है एक तार पेशीलेखन प्रणाली द्वारा घुड़सवार रक्त वाहिकाओं का उपयोग । तथापि, विभिन्न प्रजातियों, युगों, आनुवंशिक पृष्ठभूमियों और/या रोगभौतिकीय दशाओं के जंतुओं से व्युत्पन्न धमनियों के लिए इष्टतम विन्यास स्थापित किया जाना चाहिए ।
Introduction
धमनियों की विस्फार और संकुचन क्रमशः उनके संवहनी चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं के लिए छूट और सिकुडनों द्वारा प्राप्त कर रहे हैं । छोटी धमनियों की संवहनी प्रतिक्रिया में परिवर्तन स्वायत्त नसों और रक्त में मौजूद हार्मोन (जैसे, catecholamines, एंजियोटेन्सिन द्वितीय, सेरोटोनिन, vasopressin) द्वारा धमनी रक्तचाप के समस्थैतिक विनियमन के लिए योगदान. स्थानीय स्तर पर, चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं के संवहनी प्रतिक्रियाओं के दोनों endothelial कोशिकाओं से संकेतों द्वारा संग्राहक हैं और धमनियों के आसपास वसा ऊतक (चित्रा 1).
Endothelium न केवल एक निष्क्रिय बाधा है, लेकिन यह भी रक्त और अंतर्निहित संवहनी चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं के बीच संकेतों का आदान प्रदान करने के लिए एक सतह के रूप में कार्य करता है । विभिंन vasoactive पदार्थ जारी करके, endothelium संवहनी टोन प्रतिक्रियाएं1के स्थानीय नियंत्रण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है । उदाहरण के लिए, acetylcholine के जवाब में, endothelial नाइट्रिक ऑक्साइड सिंथेस (enos) नाइट्रिक ऑक्साइड का उत्पादन करने के लिए endothelial में सक्रिय है (NO), जिसमें घुलनशील guanylyl cyclase सक्रिय द्वारा अंतर्निहित संवहनी चिकनी मांसपेशियों की छूट लाती है (sgc) 2. अंय vasoactive पदार्थ cyclooxygenases के उत्पादों (जैसे, prostacyclin और thromboxane एक2), lipoxygenase (जैसे, 12-hydroxyeicosatetraenoic एसिड, 12-hete), और साइटोक्रोम P450 monooxygenases (hete और epoxyeicosatrienoic एसिड, EETs), प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों (ROS), और vasoactive पेप्टाइड्स (जैसे, endothelin-1 और एंजियोटेन्सिन द्वितीय), और endothelium-hyperpolarizing कारक (EDHF)3व्युत्पंन । Endothelium के बीच एक नाजुक संतुलन-वाहिकाविस्फारक व्युत्पंन और वाहिकाविस्फारक स्थानीय रक्तनली का संचालक टोन4,5बनाए रखने के ।
Endothelial रोग endothelial पर निर्भर vasodilatation6, संवहनी उंर बढ़ने7की एक बानगी में हानि की विशेषता है । उंर के साथ, endothelium की क्षमता vasodilatation को बढ़ावा देने के उत्तरोत्तर कम हो जाता है, मोटे तौर पर एक कम नहीं bioज्नलफधता के कारण, साथ ही साथ असामांय अभिव्यक्ति और endothelium में eNOS के समारोह और संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं में sGC8 , 9 , 10. कम नहीं पशुमूल endothelium पर निर्भर vasoconstrictors11,12के उत्पादन potentiates । वृद्ध धमनियों में, endothelial रोग हाइपरप्लासिया मीडिया में कारण बनता है, के रूप में दीवार की मोटाई में चिह्नित वृद्धि, औसत दर्जे का नाभिक की संख्या, जो उच्च रक्तचाप और atherosclerosis में धमनियों में और अधिक मोटा होना की याद ताजा कर रहे हैं द्वारा परिलक्षित मानव में मनाया मरीजों को13,14। इसके अलावा, जैसे मोटापा, मधुमेह या उच्च रक्तचाप endothelial रोग के विकास में तेजी लाने के रूप में रोगविज्ञानी स्थितियों15,16।
पेरिवस्कुलर वसा ऊतक (PVAT) संवहनी संरचना और समारोह17को विनियमित करने के लिए कई adipokines विज्ञप्ति. Pvat के विरोधी सिकुड़ा प्रभाव, जैसे adiponectin, नहीं, हाइड्रोजन पेरोक्साइड और हाइड्रोजन सल्फाइड18,19,20के रूप में आराम कारकों से मध्यस्थता है । हालांकि, स्थान और pathophysiological स्थिति पर निर्भर करता है, PVAT भी विभिन्न धमनियों में सिकुड़ा प्रतिक्रियाओं में वृद्धि कर सकते हैं21. Pvat द्वारा उत्पादित समर्थक संकुचनशील पदार्थों में एंजियोटेंसिन-II, लेप्टिन, रेजिइन, और ROS22,23शामिल हैं । अलग रक्त वाहिकाओं पर अध्ययन के अधिकांश में, PVAT वाहिकाएँ के लिए एक सरल संरचनात्मक समर्थन के रूप में माना गया है और इस तरह रक्त वाहिका अंगूठी खंडों की तैयारी के दौरान हटा दिया. चूंकि वसा रोग उच्च रक्तचाप और संबद्ध हृदय जटिलताओं24के लिए एक स्वतंत्र जोखिम कारक का प्रतिनिधित्व करता है, रक्त वाहिकाओं के आसपास pvat पर विचार किया जाना चाहिए जब संवहनी जवाबदेही की जांच विभिन्न धमनियों ।
बहु तार मायोग्राफ सिस्टम व्यापक रूप से महाधमनी, mesenteric, गुर्दे, ऊरु, मस्तिष्क और कोरोनरी धमनियों सहित रक्त वाहिकाओं की एक किस्म के रक्तनली का संचालक कार्यों की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है25,26. इस के साथ साथ वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग करेगा तार मायोग्राफी का मूल्यांकन करने के लिए mesenteric धमनियों में संवहनी प्रतिसादिता आनुवंशिक रूप से संशोधित माउस मॉडल से अलग, के साथ मॉडुलन पर एक विशेष ध्यान केंद्रित PVAT.
Protocol
Representative Results
Discussion
इसके अलावा endothelial कोशिकाओं से, PVAT से व्युत्पंन संकेतों चिकनी मांसपेशी टोन जेट30के नियमन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं । स्वस्थ pvat कोई और विरोधी भड़काऊ adiponectin विज्ञप्ति धमनियों, जो मोटापे और मे…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम हांगकांग के अनुसंधान अनुदान परिषद [१७१२४७१८ और १७१२१७१४], हांगकांग स्वास्थ्य और चिकित्सा अनुसंधान कोष [१३१४२६५१ और १३१४२६४१], हांगकांग के सहयोगात्मक अनुसंधान निधि [C7055-14G] से अनुदान द्वारा वित्तीय सहायता, और राष्ट्रीय बुनियादी चीन के अनुसंधान कार्यक्रम [९७३ कार्यक्रम 2015CB553603] ।
Materials
| Acetylcholine | Sigma-Aldrich | A6625 | Stock concentration: 10-1 M Working concentration: 10-10 to 10-5 M |
| L-NAME (Nω-nitro-L-arginine methyl ester) | Sigma-Aldrich | N5751 | Stock concentration: 3 x 10-2 M Working concentration: 10-4 M |
| Phenylephrine | Sigma-Aldrich | P6126 | Stock concentration: 10-2 M Working concentration: 10-10 to 10-5 M |
| U46619 (9,11-dideoxy-9α,11αmethanoepoxy prostaglandin F2α) | Enzo | BML-PG023-0001 | Stock concentration: 10-5 M Working concentration: 1-3 x 10-8 M |
| Multiwire myograph | Danish MyoTechnology (DMT) | 620M | |
| PowerLab 4/26 | ADInstruments | ML848 | |
| Labchart7 | ADInstruments | – | |
| Adipo-SIRT1 wild type mice | Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong | CULATR NO.: 4085-16 | |
| Silicon-coated Petri dishes | Danish MyoTechnology (DMT) | ||
| Tungsten wires | Danish MyoTechnology (DMT) | 300331 | |
| Surgical tools |
Referências
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