इस्कीमिया रिपरफ्यूजन चोट की स्थापना में मेटास्टैटिक लिवर ट्यूमर के Murine मॉडल
Summary
हम विस्तार से एक चिकित्सकीय प्रासंगिक कोलोरेक्टल कैंसर जिगर मेटास्टेसिस (CRLM) ट्यूमर मॉडल और ट्यूमर के विकास और मेटास्टेसिस में जिगर ischemia reperfusion के प्रभाव का वर्णन (मैं / इस मॉडल को बेहतर जिगर metastatic विकास के सर्जरी प्रेरित पदोन्नति अंतर्निहित तंत्र को समझने में मदद कर सकते हैं.
Abstract
लिवर इस्किमिया और रिफ्यूजन (आई/आर) चोट, एक आम नैदानिक चुनौती, एक अनिवार्य pathophysiological प्रक्रिया है कि कई ऊतक और अंग क्षति प्रेरित करने के लिए दिखाया गया है बनी हुई है। हाल ही में प्रगति और चिकित्सीय दृष्टिकोण के बावजूद, समग्र रुग्णता विशेष रूप से अंतर्निहित पैरेन्काइमल असामान्यताओं के साथ रोगियों में असंतोषजनक बनी हुई है। आक्रामक कैंसर के विकास और मेटास्टेसिस के संदर्भ में, शल्य चिकित्सा I/R ट्यूमर पुनरावृत्ति को विनियमित करने के प्रमोटर होने का संदेह है। इस लेख का उद्देश्य यकृत I/R और कोलोरेक्टल यकृत मेटास्टेसिस के नैदानिक रूप से प्रासंगिक murine मॉडल का वर्णन करना है। ऐसा करने में, हम स्थापित करने और उनके नियमित अनुसंधान अभ्यास के लिए इस मॉडल को सही करने में अन्य जांचकर्ताओं की सहायता करने के लिए बेहतर जिगर metastases को बढ़ावा देने पर जिगर I/R के प्रभाव को समझने का लक्ष्य.
Introduction
यकृत मेटास्टैटिक रोग1के विकास के लिए सबसे आम स्थलों में से एक है . मृत्यु लगभग हमेशा जिगर में ट्यूमर के विकास के साथ जुड़े जटिलताओं के कारण है. जिगर में metastatic ठोस ट्यूमर के साथ रोगियों में, सर्जरी रोग नियंत्रण और एक संभव उपचारात्मक दृष्टिकोण के लिए एक महत्वपूर्ण हस्तक्षेप बनी हुई है. तथापि, अधिकांश रोगी अंततः आवर्तक रोग के साथ उपस्थित होते हैं , मुख्य रूप से यकृत2,3में . यकृत सर्जरी के दौरान, intraoperative खून बह रहा है आम है, अक्सर रक्त आधान और रक्त स्रावन के नियंत्रण के लिए विभिन्न तकनीकी दृष्टिकोण की आवश्यकता, संवहनी clamping तरीकों सहित. तथापि, ऐसे उपाययकृत इस्कीमिया/रिफ्यूजन (आई/आर) यकृत ऊतक के लिए कारण होते हैं। hepatocellular समारोह पर I/R के प्रतिकूल प्रभाव अच्छी तरह से प्रलेखित किया गया है. जिगर मैं / आर अपमान भड़काऊ रास्ते4के माध्यम से रक्त के प्रवाह की बहाली के दौरान भड़काऊ cascades प्रज्वलित . न केवल जिगर I/R चोट जिगर की विफलता के लिए योगदान करता है, लेकिन वर्तमान सबूत भी पता चलता है कि मैं / हम पहले की सूचना दी है कि शल्य तनाव प्रतिरक्षा कोशिकाओं जो न केवल प्राथमिक ट्यूमर के विकास में मदद करता है के सक्रियण लाती है, लेकिन यह भी परिसंचरण के भीतर कैंसर की कोशिकाओं पर कब्जा करके metastases की सुविधा6.
यहाँ हम विस्तार से एक तकनीक का वर्णन करने के लिए एक जिगर metastasis माउस ट्यूमर मॉडल स्थापित. इस मॉडल में, हम हेपेटिक इस्किमिया रिपरफ्यूजन चोट को प्रेरित करने के लिए एक विधि भी प्रस्तुत करते हैं जो हेपेटेक्टोमी के दौरान नैदानिक रूप से मौजूद सर्जिकल तनाव के लिए एक किराए के रूप में कार्य करता है। कैंसर इंजेक्शन और यकृत I/R के संयुक्त तरीकों को सफलतापूर्वक प्राथमिक ट्यूमर लकीर आया है, जो रोगियों में CRLM के विकास की व्याख्या कर सकते हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
इस पांडुलिपि में वर्णित पशु मॉडल दो प्रमुख दृष्टिकोण पर आधारित है। पहले कैंसर कोशिकाओं की क्षमता को पहचान करने के लिए स्थानीय और जिगर lobes में proliferate है. दूसरा ट्यूमर के विकास और मेटास्टेसिस को प्रभावित कर?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखक भाषाई संशोधन के लिए सारा Minemyer और अलेक्जेंडर Comerci धन्यवाद.
Materials
| Dulbecco's Modified Eagle Medium | Lonza | 12-614F | |
| Fetal Bovine Serum | Lonza | 900-108 | |
| L-Glutamin | Gibco | 25030-081 | |
| Penicilin | Fisher scientific | 15-140-122 | |
| Stretomysin | Fisher scientific | 15-140-122 | |
| HEPES | Fisher Scientific | SH3023701 | |
| Trypsin | Hyclone | sh30042.02 | |
| Cell culture Flask 75cm | 5 Cells Star | 658170 | |
| 15ml PP Conical Tubes | BioExcell | 41021037 | |
| Trypan Blue Stain | Giibco | 15250-061 | |
| Gauze | Fisherbrand | 1376152 | |
| Cautry | Bovie | AA01 | |
| Microvascular clamp | Finescience tools | 18055-03 | |
| Micro-Serrefine clamp applicator with lock | Fine science toosl | FST-18056-14 | |
| Spring scissor | Fine science toosl | FST-15021-15 | |
| Vessel Dilator | Fine science toosl | FST-00276-13 | |
| Magnetic fixator Retraction system | Fine science toosl | FST-18200020 | |
| Micro-Adson Forceps | Fine science toosl | FST-11019-12 | |
| Micro-Adson Forceps | Fine science toosl | FST-11018-12 | |
| 4-0 polypropylene suture | Ethicon | K881H | |
| Needle holder | Harvard Apparatus | 72-8826 | |
| Heating Pad | Fisher scientific | 1443915 | |
| Clipper | Oster | 559A | |
| Povidone-Iodine solution | Medline | MDS093945 | |
| Syringe 1ml 25G | BD safety Glide | 305903 | |
| Insulin syringe 0.5 ml | BD insulin Syringes | 32946 | |
| Cotton -Tipped Applicator | Fisher Scientific | 23-400-101 | |
| Surgical Microscope | Leica | LR92240 | |
| Mycoplasma Elisa Kit | Roche | 11663925910 | |
| Ketamine | Putney | #056344 | |
| Xylazine | NADA | #139-236 | |
| ALT strip | Heska | 15809554 | |
| AST strip | Heska | 15809542 | |
| LDH strip | Heska | 15809607 |
Referências
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