Summary

ヒト炎症反応の個々の変動を評価するための最小紅斑用量(MED)試験の精密実施

Published: October 03, 2019
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Summary

最小限の紅斑用量(MED)検査は、紫外線光線療法の投与スケジュールを確立するために使用されます。炎症反応の個々の変動を評価することができますが、再現可能な結果を達成するための方法論を欠いています。ここでは、MEDの精密実装を提示し、炎症反応における個々の変動を捕捉する能力を実証する。

Abstract

最小限の紅斑用量(MED)検査は、皮膚の表面に紅斑(炎症性赤色)を生成するために必要な紫外線(UV)照射の最小量を決定するための臨床設定で頻繁に使用されます。この文脈では、MEDは乾癬および湿疹のような一般的な皮膚状態のためのUV光線療法の開始用量を決定する重要な要因と見なされる。研究の設定では、MEDテストはまた、炎症反応の人内および間の変動を評価するための強力なツールである可能性があります。しかし、MED試験は研究環境での使用に広く採用されておらず、このアッセイから再現可能な結果を得るための障壁である公表されたガイドラインの欠如のために起こり得る。また、MEDを確立するためのプロトコルや機器は大きく異なり、研究室間での結果の比較が困難です。ここでは、他の機器や実験室環境に容易に適応できる新設計のプロトコルと方法を用いて、表面性紅斑を誘導し、測定するための正確で再現性の高い方法について述べている。ここで説明する方法には、このプロトコルが任意のUV放射源に適合できるように、他の機器に標準化された投与スケジュールの外挿を可能にする手順の詳細が含まれています。

Introduction

最小紅斑用量(MED)試験は、通常UVB範囲内の放射線に対する皮状感受性を評価するためのFDA承認の手順であるが、MEDはUVおよび可視スペクトル1の他の波長で決定することができる。紅斑は、毛細血管のエンゲージメントによって引き起こされる皮膚の表面上の表面的な赤みとして定義されます(紅斑の後期段階は、より一般的に日焼けとして知られています)。MED検査は、皮膚の赤みの測定可能な変化の最小単位を生成する紫外線(UV)放射線の最小量を識別するために、皮膚科学文献と臨床光線療法の設定で広く使用されています。MED試験は、ほとんどの市販の日焼け施設で使用されるものと同等の市販のUVランプで達成することができます。

MED試験は、主に皮膚の色素沈着と放射線の強度とタイプに応じて投与スケジュールで、所定の時間の間、目に見えるスペクトルから皮膚の表面に紫外線または光の連続的な分散を含む.この手順は、乾癬および湿疹2、3などの皮膚状態に対するUV放射線療法を受けている患者の投与スケジュールを決定するために臨床設定で一般的に使用される。臨床設定でMEDを決定するための基本的な手順は、他の場所で説明されています4,そして、皮膚感受性の個々の変動に応じて、UV放射線の総投与量を上方または下方に調整するために使用することができます.

皮膚色素沈着は、おそらくMED手順6からの結果を導行および測定する上で最も重要な被験者特異的変数である。これは、最小限の紅斑応答を呼び起こすのに必要な紫外線暴露の持続時間は、参加者のフィッツパトリック皮膚タイプ(FST)によって定義される参加者の皮膚の明るさまたは暗さによって主に決定されるからである。FST7は、ヒトの皮膚色を分類するための数値スキームである。フィッツパトリックスケールは、ヒトの皮膚色素沈着8、9に関する皮膚科学的研究のための認識されたツールであり、最も明るい(FST I)から最も暗い(FST VI)までの6つのカテゴリーの1つに人間の皮膚を分類する。

暗いFSTタイポロジは、より長いUV持続時間を必要とするため、FSTの正確な分類が重要です。自己報告、皮膚科医のインタビュー、計装ベースの評価など、幅広いアプローチを用いて、FSTの正確な評価方法に関する広範な文献があります。FSTの観察者評価は現在と相関しているが、自然な肌の色10と相関することが示されているが、FSTはアンケート12および/または客観的評価を介して自己報告を用いて主観的に11を決定することができる。分光光光度計。スペクトロフォトメトリーによるフィッツパトリックタイピングは、多くの研究10、13、14、15における参加者の自己報告と密接に関連することが示されている。

臨床サービスにおけるMED試験の有用性および広範な使用にもかかわらず、このプロシージャは、炎症刺激に応答する個々の変動の測定のための実験室の設定で広く採用されていない。ここで概説する方法論の目的は、MED試験手順の精度と再現性を高める技術とステップバイステップの手順を提供し、きめ細かいことに焦点を当てた実験室の設定で将来の作業を容易にすることです。炎症反応における個々の変動の定量化。さらに、炎症の人と人の変動を正確に捕捉するこの標準化されたプロトコルの能力を示す代表的な結果を提供する。

Protocol

人間のボランティアの使用を含む以下に説明するすべての方法は、地元の機関審査委員会(IRB)によってレビューされ、承認されており、ヘルシンキとベルモント報告書の宣言に従っています。すべての参加者 (N=72) は、IRB プロトコルによって規定されているインフォームド コンセントに署名しました。包含/除外基準および中止手順は、参加者の安全性を最大化するように設計されており、こ…

Representative Results

表1に示すタイミングスケジュールは、各FSTの暴露事象の中間点(すなわち、絞り3または4)で、平均してMEDを捕捉するために計算された新しい投与スケジュールである。計算されたスケジュールの基準は以下の通りです。 以前の研究では、FST 2を有する個人の場合、UVB範囲の放射線の中央値MEDはcm2あたり66.9ミリワット(mW)、FST 3では77.429 mW/cm2、FST</sup…

Discussion

ここで説明する MED テストの精密な実装は、一般的な使用を達成した他の既存のラボベースの炎症性の課題に対していくつかの利点を提供する可能性があります。例えば、吸引ブリスタープロトコル17、18、19は、その後、サイトカイン微小環境に直接アクセスするために注射器で吸引される皮膚上の液体充填水疱を上げる。</su…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、バージニア工科大学科学発見基金からの助成金によって支援されました。

Materials

6-aperture dose testing patch (“Cuff”) Daavlin    
Medical grade adhesive solvent
Non-reflective UV proof cloth
Radiometer SolarLight Model 6.2 UVB Meter
Single use aloe or burn gel
Spectrophotometer Konika-Minolta CM-2600D
Stopwatch
UV lamp – Fiji Sun Sperti Emission spectrum 280nm-400nm, approximately 25% UVB
UV-proof safety glasses (2 pair)
UV-proof sleeve
White cotton gloves (2 pair)

Referências

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Citar este artigo
Richey, J. A., Sullivan-Toole, H., Strege, M., Carlton, C., McDaniel, D., Komelski, M., Epperley, A., Zhu, H., Allen, I. C. Precision Implementation of Minimal Erythema Dose (MED) Testing to Assess Individual Variation in Human Inflammatory Response. J. Vis. Exp. (152), e59813, doi:10.3791/59813 (2019).

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