Precision implementering av minimal erythema dose (MED) testing for å vurdere individuell variasjon i Human inflammatorisk respons

Summary

Minimal erythema dose (MED) testing brukes til å etablere doserings planer for ultrafiolett stråling fototerapi. Det kan vurdere individuell variasjon i inflammatorisk respons, men mangler metodikk for å oppnå reproduserbar resultater. Her presenterer vi en presisjon implementering av MED og demonstrere sin evne til å fange individuell variasjon i inflammatorisk respons.

Abstract

Minimal erythema dose (MED) testing brukes ofte i kliniske innstillinger for å bestemme den minste mengden av ultrafiolett (UV) bestråling som er nødvendig for å produsere erythema (inflammatorisk rødhet) på overflaten av huden. I denne sammenhengen regnes MED MED som en nøkkelfaktor for å bestemme Start doser for UV-fototerapi for vanlige hudtilstander som psoriasis og eksem. I forskning innstillinger, MED testing har også potensial til å være et kraftig verktøy for å vurdere innenfor-og mellom-personer variasjon i inflammatoriske responser. Men MED testing har ikke vært allment vedtatt for bruk i forskning innstillinger, sannsynligvis på grunn av mangel på publiserte retningslinjer, som er en barriere for å oppnå reproduserbar resultater fra denne analysen. Også protokoller og utstyr for å etablere MED varierer mye, noe som gjør det vanskelig å sammenligne resultater på tvers av laboratorier. Her beskriver vi en presis og reproduserbar metode for å indusere og måle overfladisk erythema ved hjelp av nydesignede protokoller og metoder som lett kan tilpasses annet utstyr og laboratoriemiljøer. Metoden beskrevet her inkluderer detaljer om prosedyrer som vil tillate ekstrapolering av en standardisert dosering tidsplan til annet utstyr slik at denne protokollen kan tilpasses alle UV-stråling kilde.

Introduction

Minimal erythema dose (MED) testing er en FDA-godkjent prosedyre for å evaluere hud følsomhet for stråling vanligvis i UVB-serien, selv om MED kan bestemmes ved andre bølgelengder i UV og synlig spektrum¹. Erythema er definert som overfladisk rødhet på overflaten av huden forårsaket av overfylling av blodkar (senere stadier av erythema er mer kjent som solbrenthet). MED testing har blitt brukt mye i Dermatology litteratur og kliniske fototerapi innstillinger for å identifisere minimal mengde ultrafiolett (UV) stråling som vil produsere den minste enhet av målbar endring i rødhet i huden. Med testing kan oppnås med en kommersielt tilgjengelig UV-lampe, tilsvarende det som brukes i de fleste kommersielle tanning fasiliteter.

Med testing innebærer kontinuerlig spredning av UV-stråling eller lys fra det synlige spekteret på overflaten av huden for en forhåndsbestemt tidsrom, med dosering tidsplaner avhengig først og fremst på pigmentering av huden og intensiteten og type stråling . Denne fremgangsmåten brukes vanligvis i kliniske innstillinger for å bestemme doserings planer for pasienter som får UV-stråling terapi for hudsykdommer som psoriasis og eksem^2,3. Grunnleggende prosedyrer for fastsettelse av MED i kliniske innstillinger har blitt beskrevet andre steder⁴, og kan brukes til å justere den totale dosen av UV-stråling oppover eller nedover, avhengig av individuell variasjon i hudens følsomhet.

Pigment i huden er kanskje den viktigste fagspesifikke variabelen i å gjennomføre og måle resultater fra MED-prosedyren⁶. Dette er fordi varigheten av UV-eksponering som kreves for å fremkalle den minimale erythema responsen er hovedsakelig bestemt av letthet eller mørke av deltakerens hud, som definert av deltakerens Fitzpatrick hudtype (FST). FST⁷ er en numerisk ordning for å klassifisere menneskets hudfarge. Fitzpatrick skalaen er et anerkjent verktøy for dermatologisk forskning på menneskelig hud pigmentering^8,9, og klassifiserer menneskelig hud i en av seks kategorier fra letteste (FST i) til mørkeste (FST vi).

Mørkere FST-typologier krever lengre UV-varighet, derfor er nøyaktig klassifisering av FST viktig. Det er en omfattende litteratur om metoder for nøyaktig vurdering av FST, ved hjelp av en rekke tilnærminger, inkludert egen rapport, hudlege intervju og instrumentering-basert vurdering. Observer rangeringer av FST har vist seg å være korrelert med gjeldende, men ikke naturlig hudfarge¹⁰, kan imidlertid FST fastsettes subjektivt¹¹ bruke egen rapport via spørreskjema¹² og/eller objektiv vurdering via Spektrofotometri. Fitzpatrick typing by Spektrofotometri har vist seg å relatere seg tett til deltakerens egen rapport i en rekke studier på^10,13,14,15.

Til tross for nytte og utstrakt bruk av MED testing i kliniske tjenester, har denne prosedyren ikke vært allment vedtatt i laboratorie innstillinger for måling av individuell variasjon som svar på Pro-inflammatorisk stimulering. Formålet med metodikken som er skissert her er å gi teknikker og trinnvise prosedyrer som øker presisjonen og reproduserbarheten i MED-testprosedyren, for å lette fremtidig arbeid i laboratoriemiljøer som fokuserer på finkornet kvantifisering av intra-individuell variasjon i inflammatorisk respons. Vi gir videre representative resultater som illustrerer evnen til denne standardiserte protokollen til å nøyaktig fange person-til-person variasjon i betennelse.

Protocol

Alle metoder som er beskrevet nedenfor, inkludert bruk av frivillige har blitt gjennomgått og godkjent av den lokale institusjonelle Review Board (IRB), og er i samsvar med erklæringen av Helsingfors og Belmont Report. Alle deltakere (N = 72) signert informert samtykke som forbudt av IRB protokollen. Kriterier for inkludering/ekskludering og seponering er utformet for å maksimere deltakernes sikkerhet, og eventuelle avvik fra disse prosedyrene bør vurderes i lys av deres innvirkning på risiko og toleranse for mennes…

Representative Results

Tidsplanen tidsplan presentert i tabell 1 er en roman dosering tidsplan som ble beregnet å fange med, i gjennomsnitt, på midtpunktet av eksponeringen hendelsen (dvs. Aperture 3 eller 4) for hver FST. Grunnlaget for den beregnede tidsplanen er som følger. Tidligere arbeid har fastslått at for personer med FST 2 er median MED for stråling i UVB-serien 66,9 milliwatt (mW) per cm2, 77,429 MW/cm2 for FST 3 og 85,0 for FST 416. Unde…

Discussion

Presisjon implementering av MED testing som beskrevet her kan tilby flere fordeler fremfor andre bevarte Lab-baserte inflammatoriske utfordringer som har oppnådd populær bruk. For eksempel, sug av blemmer protokoller^17,18,19 Hev en væske fylt blemmer på huden som deretter pustende med en sprøyte for å få direkte tilgang til cytokin mikromiljøet. Selv om hud blemmer er et velkjent verktøy for å studere hudens immunologi…

Materials

6-aperture dose testing patch (“Cuff”)	Daavlin
Medical grade adhesive solvent
Non-reflective UV proof cloth
Radiometer	SolarLight	Model 6.2 UVB Meter
Single use aloe or burn gel
Spectrophotometer	Konika-Minolta	CM-2600D
Stopwatch
UV lamp – Fiji Sun	Sperti		Emission spectrum 280nm-400nm, approximately 25% UVB
UV-proof safety glasses (2 pair)
UV-proof sleeve
White cotton gloves (2 pair)