Aqui, apresentamos um protocolo para realizar uma avaliação hemodinâmica invasiva do ventrículo direito e artéria pulmonar em camundongos usando uma abordagem de cirurgia de caixa aberta.
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Artigo de método
Avaliação Hemodinâmica Invasiva para o Sistema Ventricular Direito e hipertensão arterial pulmonar induzida por hipóxia em camundongos
Neste artigo
Resumo
Resumo
A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença cardiopulmonar crônica e grave. Os ratos são um modelo animal popular usado para imitar esta doença. No entanto, a avaliação da pressão ventricular direita (RVP) e da pressão pulmonar da artéria (PAP) permanece tecnicamente desafiadora em camundongos. RVP e PAP são mais difíceis de medir do que a pressão ventricular esquerda por causa das diferenças anatômicas entre os sistemas cardíaco esquerdo e direito. Neste artigo, descrevemos um método de medição hemodinâmica do coração direito estável e sua validação usando camundongos saudáveis e PAH. Este método é baseado na cirurgia open-chest e na sustentação mecânica da ventilação. É um procedimento complicado em comparação com procedimentos torácicos fechados. Enquanto um cirurgião bem treinado é necessário para esta cirurgia, a vantagem deste procedimento é que ele pode gerar parâmetros rvp e PAP ao mesmo tempo, por isso é um procedimento preferível para a avaliação dos modelos de HAP.
Introdução
A hipertensão arterial pulmonar (HAP) é uma doença cardiopulmonar crônica e grave com elevação da pressão arterial pulmonar (PAP) e pressão ventricular direita (RVP) causada pela proliferação celular e fibrose de pequenas artérias pulmonares 1. Cateteres de artéria pulmonar, também chamados de cateteres Swan-Ganz2,são comumente usados no monitoramento clínico de RVP e PAP. Além disso, um sistema de monitoramento PAP sem fio tem sido usado clinicamente3,4,5. Para imitar a doença para estudo em camundongos, um ambiente hipóxico é ....
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Protocolo
O protocolo animal foi revisado e aprovado pelo Institutional Animal Care and Use Committee no Fuwai Hospital, Chinese Academy of Medical Science, Peking Union Medical College (NO.0000287). Os animais experimentais foram alojados e alimentados de acordo com as diretrizes do bem-estar animal na China.
NOTA: Oito a 12 semanas de idade machos C57BL ratos foram alojados em um ambiente com um 12 h escuro / 12 h ciclo de luz. Os camundongos PAH foram alojados por 4 semanas uma concentração de oxigênio de 10%, mantidos por uma câmara de hipóxia controlada por oxigênio para induzir hipertensão pulmonar, e camundongos controle foram alojados no ar d....
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Resultados
O cateter transdutor de pressão foi inserido no ventrículo direito(Figura 3A)através de um túnel expandido por uma agulha de 25 G, e uma forma de onda RVP típica (Figura 3C)foi obtida. O cateter foi continuamente ajustado e avançado lentamente e mantido no mesmo eixo que a artéria pulmonar ao passar pela válvula pulmonar(Figura 3B). Quando o sensor de pressão foi inserido com sucess.......
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Discussão
A intubação do traqueal é a primeira etapa importante para cirurgias da aberto-caixa. O método clássico de intubação traqueal para pequenos animais, como ratos ou camundongos, envolve fazer uma incisão em forma de T na traqueia e inserir diretamente tubos traqueais do tipo Y na traqueia. Na prática, descobrimos que este método não é fácil durante a operação. A tubulação do traqueal do Tipo Y é muito grande para pequenos animais e forma um ângulo com a traqueia. Assim, é difícil reparar a tubulação no lugar. Além disso, u.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Esta pesquisa é apoiada pelo Projeto de Pós-Graduação em Educação e Reforma Do Ensino da Faculdade de Medicina da União de Pequim (10023-2016-002-03), pelo Fuwai Hospital Youth Fund (2018-F09) e pelo Fundo diretor do Laboratório-Chave de Pesquisa Pré-clínica de Pequim e Avaliação de Materiais de ImplanteS Cardiovasculares (2018-PT2-ZR05).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| 2,2,2-Tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-5G | para o |
| controlador de temperatura animal | Physitemp Instruments da anestesia, Inc. | TCAT-2LV | Para controle de temperatura |
| Pinça de dissecção | Fine Science Tools, Inc. | 11274-20 | Para cirurgia |
| Gemini Cautery System | Gemini | GEM 5917 | Para cirurgia |
| Cateter intravenoso (22G) | BD angiocath | 381123 | Para intubação |
| LabChart 7.3 | ADInstruments | Para análise de dados | |
| Sistema de iluminação de luz | Olympus | Para cirurgia | |
| Cateter Mikro-Tip | Millar Instruments, Houston, TX | SPR-1000 | Para medição de pressão |
| Millar Pressure-Volume Systems | Millar Instruments, Houston, TX | MVPS-300 | Para medição de pressão |
| Controlador de O2 e câmara de hipóxia | Biospherix | ProOx 110 | Para hipóxia crônica |
| Sistema de aquisição de dados PowerLab | ADInstruments | PowerLab 16/30 | Para gravação de |
| dados TesouraFerramentas de Belas Ciências, Inc. | 14084-08 | Para cirurgia | |
| Ventilador para pequenos animais | Harvard Apparatus | Mini-Vent 845 | Para cirurgia |
| Estereomicroscópio | Olympus | SZ61 | Para cirurgia |
| Fita cirúrgica | 3M | Para cirurgia | |
| Enzima Terg-a-zyme | Sigma-Aldrich | Z273287-1EA | Para limpeza de cateteres |
Referências
- Humbert, M., et al. Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension. Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).
- Chatterjee, K. The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint. Circulation
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Reimpressões e permissões
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