चूहों में तीव्र स्ट्रोक के बाद मस्तिष्क वसूली का आकलन करने के लिए एक प्रीक्लिनिकल मॉडल
Summary
इस अध्ययन का उद्देश्य 1-90 के बाद मध्य मस्तिष्क धमनी occlusion/reperfusion (MCAO/R) के बाद मस्तिष्क इंफेक्शन और संवेदी कार्य का परीक्षण करके मस्तिष्क इस्केमिया की वसूली और अगली कड़ी चरणों में अनुसंधान के लिए एक पशु मॉडल की स्थापना और पुष्टि करना है चूहों में दिन।
Abstract
इस अध्ययन का उद्देश्य वसूली और अगली कड़ी चरणों में एक पशु मस्तिष्क इस्केमिया मॉडल की स्थापना और मान्य करना था। नर स्प्राग-डावले चूहों में एक मध्य मस्तिष्क धमनी ऑक्सीलेशन/रिपरफ्यूजन (MCAO/R) मॉडल चुना गया था । चूहे के वजन (260−330 ग्राम) को बदलकर, थ्रेड बोल्ट प्रकार (2636/2838/3040/3043) और मस्तिष्क infarct समय (2-3 घंटे), एक उच्च लोंगा स्कोर, एक बड़ा infarct मात्रा और एक बड़ा मॉडल सफलता अनुपात लोंगा के स्कोर और टीटीसी धुंधला का उपयोग कर के जांच की गई । इष्टतम मॉडल स्थिति (300 ग्राम, 3040 थ्रेड बोल्ट, 3 एच मस्तिष्क इंफ्लेट समय) का अधिग्रहण किया गया था और संवेदी मोटर कार्यों और infarct मात्रा के मूल्यांकन के माध्यम से रिपरफ्यूजन के बाद 1-90 दिन अवलोकन अवधि में उपयोग किया गया था। इन स्थितियों में, द्विपक्षीय विषमता परीक्षण में 1 से 90 दिनों तक एक महत्वपूर्ण अंतर था, और ग्रिड-वॉकिंग परीक्षण में 1 से 60 दिनों तक एक महत्वपूर्ण अंतर था; दोनों मतभेद एक उपयुक्त संवेदी मोटर कार्यात्मक परीक्षण हो सकता है। इस प्रकार, मस्तिष्क इस्केमिया की वसूली और अगली कड़ी चरणों में एक उपन्यास चूहा मॉडल की सबसे उपयुक्त स्थिति पाई गई: 300 ग्राम चूहे जो 3 एच मस्तिष्क infarct के लिए 3040 थ्रेड बोल्ट के साथ MCAO से गुजरे और फिर रिपरफ्यूज किए गए। उपयुक्त संवेदी विज्ञान कार्यात्मक परीक्षण एक द्विपक्षीय विषमता परीक्षण और ग्रिड-वॉकिंग परीक्षण थे।
Introduction
मस्तिष्क इस्केमिया को विभिन्न पोस्ट-स्ट्रोक संकेतकों के साथ तीन चरणों में विभाजित किया गया है: तीव्र चरण (1 सप्ताह के भीतर), वसूली चरण (1 सप्ताह से 6 महीने), और अगली कड़ी चरण (6 महीने से अधिक) । वर्तमान में, अधिकांश अध्ययन अपने महत्वपूर्ण प्रभाव और बहु-सापेक्ष अनुसंधान मॉडल1,2,3के कारण मस्तिष्क इस्केमिया के तीव्र चरण पर ध्यान केंद्रित करते हैं। हालांकि, मस्तिष्क इस्केमिया की वसूली और अगली कड़ी चरणों को विकलांग की दीर्घकालिक जटिलता के कारण नजरअंदाज नहीं किया जा सकता है। इसलिए, इस अध्ययन का उद्देश्य मस्तिष्क इस्केमिया की वसूली और अगली कड़ी चरणों पर शोध करने के लिए एक स्थिर, विश्वसनीय और अपेक्षाकृत सरल पशु मॉडल का पता लगाना है।
कई प्रयोगात्मक मस्तिष्क इस्केमिया मॉडल में, हम सही मध्य मस्तिष्क धमनी (एमसीए) में थ्रेड बोल्ट प्रविष्टि के माध्यम से मध्य मस्तिष्क धमनी ऑक्सीलेशन (MCAO) का उपयोग करते हैं। यह मॉडल मानव स्ट्रोक के समान है, जो बड़े अनाप-शनाप मात्रा का उत्पादन कर सकता है, जिसके परिणामस्वरूप स्ट्रोक से संबंधित कई व्यवहार विकार होते हैं, और थ्रेड बोल्ट4,5,6को हटाकर रक्त रिपरफ्यूजन (आर) की अनुमति दे सकते हैं। MCAO/R भी मस्तिष्क इस्केमिया7के सोने के मानक पशु मॉडल माना जाता है । इसके अलावा, मस्तिष्क की चोट की गंभीरता व्यास और धागे बोल्ट की प्रविष्टि लंबाई, मस्तिष्क इस्केमिया की अवधि, और पशु वजन (बड़े चूहों बड़ा दिमाग और मोटा मस्तिष्क वाहिकाओं है)8पर निर्भर करता है । इसलिए, थ्रेड बोल्ट प्रकार, इंफर्ट टाइम और चूहे के वजन को बदलकर, MCAO/R चूहों में मस्तिष्क इस्केमिया की वसूली और अगली कड़ी चरणों के लिए एक उपयुक्त मॉडल पाया जा सकता है। चूहे के मॉडल को मान्य करने के लिए, हमने टीटीसी धुंधला और संवेदी कार्य प्रयोगों (एक द्विपक्षीय विषमता परीक्षण, ग्रिड-वॉकिंग टेस्ट, रोटारोड टेस्ट और एक लिफ्टिंग रस्सी परीक्षण) का उपयोग करके MCAO/R मॉडल के 1 दिन, ३५-दिन, ६०-दिवस और ९० दिन के अध्ययन का प्रदर्शन किया ।
Protocol
Representative Results
Discussion
एक्यूट सेरेब्रल इस्केमिया में अच्छी तरह से उपयोग किए जाने वाले विधियों और व्यवहार संकेतकों की स्थापना करने वाले कई मॉडलों में मस्तिष्क इस्केमिया16,17की वसूली और अगली कड़ी चरणों म?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (८१६०३३१५, ८१६०३३१६), चीन में जियांग्शी प्रांत की प्रमुख अनुसंधान और डी योजना (20171ACH80001), फुजियान प्रांत के कॉलेजों और विश्वविद्यालयों में औद्योगिक और अकादमिक सहयोग परियोजनाओं द्वारा समर्थित किया गया था चीन (2018Y41010011) ।
Materials
| Anatomical Microscope | Leica (Germany) | S8 | Microscopic operating instrument |
| Blade | Gellette | / | Cutting brain sections |
| Constant Temperature Shaking Bed | Taicang Experimental Equipment Factory | THZ-C | To keep the brain sections stained evenly and at a constant temperature |
| Digital Camera | Canon | 700D | For taking pictures of TTC staining |
| Electric Shaver | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 3000# | Removal of hair from the neck of rats |
| Forceps Hamostatic | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 14 cm | Using for brain removing |
| Image Pro Plus Software | Media Cybernetics Inc. | 6.0 | Analyze the infarct volume |
| Isoflurane | RWD Life Science | 217170702 | Anesthetic gas |
| Microforceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
| Microshear | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Vascular micromanipulation |
| Ophthalmic Forceps | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Auxiliary skin and muscle anatomy |
| Pphthalmic Scissors | Shanghai Jinzhong Medical Devices Co., Ltd. | 10 cm | Using for cutting the skin of neck |
| Rat Brain Slice Mold | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | 400 g | For standard, uniform cutting of brain tissue |
| Rat Rotating Bar Fatigue Apparatus | Anhui Zhenghua Biological Instrument and Equipment Co., Ltd. | ZH-300B | To test the sensorimotor function |
| Small Animal Anaesthesia Machine | Shanghai Yuyan Scientific Instruments Co., Ltd. | ABM3000 | A gas anesthetic machine |
| Small Animal Thermostat | Beijing Damida Technology Co., Ltd. | DM.7-YLS-20A | To maintain animal body temperature constant during operation |
| Surgical Scissors | Shanghai Medical device Co., Ltd. | 16 cm | Using for decapitate and brain removing |
| Suture | Shanghai Jinhuan Medical Devices Co., Ltd. | 4-0 / 5-0 | Using for skin and muscle sutures / Using for vascular ligations |
| Thread Bolt | Beijing Cinontech Co. Ltd. | 2636/2838/3040/3043-A4 | Blockage of the middle cerebral artery in rats |
| 5-triphenyl-2H-tetrazolium chloride (TTC) | Sigma | LOT#BCBP3272V | Brain section staining reagent |
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