Koronar progenitor celler og opløselige biomarkører i hjerte-kar-prognose efter koronar Angioplasty

Summary

Udvikling af større bivirkninger hjerte-kar-hændelser, som påvirker hjerte-kar-prognose efter koronar angioplastik, er påvirket af omfanget af koronar skader og vaskulær reparation. Brugen af nye koronar cellulære og opløselige biomarkører, reaktiv til vaskulære skader og reparation, er nyttige til at forudsige udviklingen af MacEs og prognose.

Abstract

Større bivirkninger hjerte-kar-hændelser (MacEs) har en negativ indvirkning på den kardiovaskulære prognose hos patienter, der gennemgår koronarangioplastik på grund af koronarisk iskæmisk skade. Omfanget af koronarskader og mekanismerne i vaskulær reparation er faktorer, der påvirker den fremtidige udvikling af MacEs. Iboende vaskulære funktioner som plak egenskaber og koronararterie kompleksitet har vist prognose oplysninger for MacEs. Brugen af intrakoronarcirkulerende biomarkører er imidlertid blevet postuleret som en bekvem metode til tidlig identifikation og prognose for MacEs, da de i højere grad afspejler dynamiske mekanismer, der involverer koronarskader og reparation. Bestemmelse af koronar cirkulerende biomarkører under angioplastik, såsom antallet af subpopulationer af mononukleare stamceller celler (MPCs) samt koncentrationen af opløselige molekyler, der afspejler inflammation, cellevedhæftning og reparation, giver mulighed for vurdering af den fremtidige udvikling og prognose for MacEs seks måneder efter koronarangioplasty. Denne metode fremhæves af dens translationelle karakter og bedre ydeevne end perifere blod cirkulerende biomarkører vedrørende forudsigelse af MacEs og dens virkning på den kardiovaskulære prognose, som kan anvendes til risikostratificering af patienter med koronararteriesygdom, der gennemgår angioplastik.

Introduction

Koronar angioplastik og stening repræsenterer en bjærgning procedure for patienter med koronararteriesygdom (CAD). Men, store bivirkninger hjerte-kar-hændelser (MacEs), herunder hjerte-kar-død, myokardieinfarkt, koronar restenose, og episoder af angina eller dekompensere hjertesvigt, kan forekomme måneder efter koronar intervention, hvilket fik uforudsete besøg på hospitalet. MacEs er almindelige på verdensplan, og deres morbi-dødelighed er høj¹.

Koronar iskæmisk skade inducerer tidlig vaskulær respons og reparative mekanismer, der involverer mobilisering af MpCs på grund af deres differentiering evne og / eller angio-reparative potentiale, samt produktion af opløselige molekyler som intercellulære vedhæftning molekyler (ICAMs), matrix metalloproteinases (MMPs), og reaktiv ilt ilt, arter afspejler celle vedhæftning, væv remodeling, og oxidativ stress. Selv om iboende vaskulære træk som plaque egenskaber og koronararterie kompleksitet er blevet brugt til at forudsige MacEs, nogle undersøgelser har antydet, at biomarkører relateret til mekanismerne for skade og reparation forekommer i koronar endothelium kunne være meget nyttigt for tidlig identifikation og prognose af hjerte-kar-hændelser hos patienter med CAD forelagt koronar angioplastik^2,3,4,5.

Fortsat interesse i at forstå de mekanismer, der ligger til grund for CAD-skade og reparation, har motiveret efterforskere til at studere intrakoronarcirkulerende biomarkører, fordi koronarprøvetagning i højere grad afspejler vaskulære skader og reparation^6. Men, karakterisering af koronar biomarkører i humane undersøgelser har været knappe^7,8,9. Formålet med denne undersøgelse var derfor at beskrive en metode til bestemmelse af mængden af koronarcirkulerende MpCs og opløselige molekyler, der afspejler både vaskulær skade og reparation, og at vise, om disse biomarkører er forbundet med MacEs og den kliniske prognose for CAD-patienter, der gennemgik koronar angioplastik. Denne metode er baseret på anvendelse af vaskulære-relaterede, cirkulerende MpCs og opløselige molekyler opnået ved prøveudtagning steder tættest på fartøjets skader. Det kan også være nyttigt for kliniske undersøgelser for underekstremitetisk, slagtilfælde, vaskulitis, venøs trombose, og andre skader, der involverer vaskulær skade og reparation.

Protocol

Denne protokol er i overensstemmelse med de institutionelle retningslinjer fra den etiske komité for menneskelig forskning. 1. Koronar angiografi, ultralyd, og blodprøvetagning Anmod om kliniske og demografiske oplysninger på basisbasis før koronarintervention. Indsamle den enkeltes data: alder, køn, nuværende rygning status, body mass index (BMI), højt blodtryk, dyslipidæmi, diabetes mellitus, medicin, og indikationen for nuværende koronar angiografi. Udfør koron…

Representative Results

Koronar, venøs sinus og perifert blod blev indsamlet fra 52 patienter, der gennemgik koronarangiografi (figur 1) og viste en høj forekomst af hypertension og dyslipidæmi. Ved den kliniske opfølgning var 11 (21,1 %) MacEs fandt sted 6 måneder efter koronar angiografi: død (n = 1), angina kræver hospitalsdeltagelse (n = 6), myokardieinfarkt (n = 2), og / eller tegn på hjertesvigt (n = 4). Base…

Discussion

Blodtapning fra de berørte koronararterie kan være svært. Nogle gange er koronararterien knap nok tilgængelig. I så fald kan prøveudtagning fra venøs sinus være et alternativ. Vi udførte valideringstest, der sammenlignede cirkulerende biomarkører i koronararterie vs venøs sinus, uden væsentlige forskelle. Udførelsen af cirkulerende biomarkører blev dog kun valideret for koronarprøvetagning. Derfor er udførelsen af biomarkører opnået fra venøs sinus er endnu ikke undersøgt.

…

Materials

BSA	Roche	10735086001	Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending.
Calibration Beads	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-607	MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests
CD133/1 (AC133)-PE	Milteny Biotec / MACS	#130-080-801	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD184 (CXCR4)-PE-VIO770	Miltenyi Biotec / MACS	#130-103-798	Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated
CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-601	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD34-FITC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-081-001	The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34
CD45- VioBlue	Miltenyi Biotec / MACS	#130-092-880	Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated
Conical Tubes	Thermo SCIENTIFIC	#339651	15ml conical centrifuge tubes
Cytometry Tubes	FALCON Corning Brand	#352052	5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile.
EDTA	BIO-RAD	#161-0729	Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe <0.01%, As <1ppm, Insolubles <0.005%
Improved Neubauer	Without brand	Without catalog number	Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2)
K2 EDTA Blood Collection Tubes	BD Vacutainer	#367863	Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL.
Lymphoprep	Stemcell Technologies	01-63-12-002-A	Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL
Paraformaldehyde	SIGMA-ALDRICH	#SZBF0920V	Fixation of biological samples, (powder, 95%)
Pipette Transfer 1,3mL	CRM Globe	PF1016, PF1015	The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy.
Test Tubes	KIMBLE CHASE	45060 13100	Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm