Descrevemos um protocolo estendido de condicionamento do medo que produz overtraining e incubação do medo em ratos. Este protocolo envolve uma única sessão de treinamento com pares de choque de tom de 25 tons (ou seja, overtraining) e uma comparação de respostas de congelamento condicionadas durante testes de contexto e sinalização 48 h (curto prazo) e 6 semanas (longo prazo) após o treinamento.
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Artigo de método
Incubação do medo usando um protocolo estendido de condicionamento do medo para ratos
Neste artigo
Resumo
Resumo
A memória emocional tem sido estudada principalmente com paradigmas de condicionamento do medo. O condicionamento do medo é uma forma de aprendizado através da qual os indivíduos aprendem as relações entre eventos aversivos e estímulos neutros. Os procedimentos mais amplamente utilizados para estudar memórias emocionais implicam o condicionamento do medo em ratos. Nessas tarefas, o estímulo incondicionado (EUA) é um choque de pé apresentado uma ou várias vezes em sessões únicas ou várias, e a resposta condicionada (CR) está congelando. Em uma versão desses procedimentos, chamada de condicionamento do medo cued, um tom (estímulo condicionado, CS) é emparelhado com choques de pés (EUA) durante a fase de treinamento. Durante o primeiro teste, os animais são expostos ao mesmo contexto em que o treinamento ocorreu, e as respostas de congelamento são testadas na ausência de choques e tons de pés (ou seja, um teste de contexto). Durante o segundo teste, o congelamento é medido quando o contexto é alterado (por exemplo, manipulando o cheiro e as paredes da câmara experimental) e o tom é apresentado na ausência de choques de pé (ou seja, um teste de sinalização). A maioria dos procedimentos de condicionamento do medo cued implicam poucos pares de choque de tom (por exemplo, 1-3 ensaios em uma única sessão). Há um crescente interesse por versões menos comuns envolvendo um grande número de pares (ou seja, overtraining) relacionados ao efeito duradouro chamado incubação do medo (ou seja, as respostas ao medo aumentam ao longo do tempo sem maior exposição a eventos aversivos ou estímulos condicionados). Tarefas prolongadas de condicionamento do medo têm sido fundamentais para a compreensão dos aspectos comportamentais e neurobiológicos da incubação do medo, incluindo sua relação com outros fenômenos psicológicos (por exemplo, transtorno de estresse pós-traumático). Aqui, descrevemos um protocolo estendido de condicionamento do medo que produz overtraining e incubação do medo em ratos. Este protocolo envolve uma única sessão de treinamento com pares de choque de tom de 25 tons (ou seja, overtraining) e uma comparação de respostas de congelamento condicionadas durante testes de contexto e sinalização 48 h (curto prazo) e 6 semanas (longo prazo) após o treinamento.
Introdução
A memória é um processo psicológico que abrange diferentes fases: aquisição de informações, consolidação (permite a estabilidade das informações adquiridas) e recuperação (evidência para o processo de consolidação)1. Durante a fase de consolidação, ocorrem o estabelecimento de novas conexões sinápticas e a modificação das conexões pré-existentes. Isso sugere a necessidade de um período de tempo durante o qual ocorrem eventos moleculares e fisiológicos responsáveis por essas alterações1,,2. Essas alterações fisiológicas ou moleculares variam se os eventos recuperados são emocionalmente c....
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Protocolo
O protocolo a seguir foi aprovado pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Fundación Universitaria Konrad Lorenz (IACUC-KL). A declaração universal dos direitos dos animais emitida pela Liga Internacional dos Direitos dos Animais, Genebra, Suíça (1989), e os princípios éticos de experimentação com animais emitidos pelo ICLAS foram respeitados.
1. Preparação do assunto
- Selecione ratos Wistar adultos masculinos (n = 12). Abriga-os em grupos de quatro por gaiola durante três dias de aclimatação, antes do início do protocolo de treinamento e teste. Forneça aos ratos acesso gratuito à água durante todo o experimento. C....
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Resultados
Foram analisadas variações no percentual de tempo de congelamento durante diferentes estágios da sessão de treinamento para todos os sujeitos (n = 12) utilizando-se um teste t dependente(Tabela 1). Os animais foram ativos e exploraram a câmara experimental durante os primeiros três minutos da sessão de treinamento (primeiro dia do protocolo), tempo durante o qual não foram entregues tons ou choques (ou seja, linha de base-BL). Conforme mostrado na
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Discussão
O presente protocolo estendido de condicionamento do medo é uma abordagem eficiente e válida para avaliar a memória emocional em períodos curtos (48 h) e longo prazo (6 semanas). Assim, o protocolo permite estudar o overtraining e temer fenômenos de incubação em ratos. Entre as diferentes vantagens deste protocolo estão as seguintes. Oferece dois tipos de testes de memória, ou seja, contexto e sugestão, que permitem identificar o efeito diferencial de dois atrasos (48h e 6 semanas) em meio a manipulações de contexto e de.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
O apoio financeiro para esta pesquisa foi fornecido pela Fundación Universitaria Konrad Lorenz - número de subvenção 9IN15151. Os autores gostariam de agradecer ao Departamento de Comunicações da Universidade Konrad Lorenz por sua ajuda na gravação e edição do vídeo, em particular Natalia Rivera e Andrés Serrano (Produtores). Além disso, Nicole Pfaller-Sadovsky e Lucia Medina por seus comentários sobre o manuscrito, e Johanna Barrero, reitora da Corporacion Universitaria Iberoamericana, para colaboração institucional. Os autores não têm conflitos de interesse.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Ácido acético (ácido etanóico) | https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/acetic_acid | ||
| Estimulação Aversiva Pacote de Corrente | MED Associates Inc | ENV-420 | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Teste contextual protocol.pro | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Teste de sugestão protocol.pro | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Inserção de Parede Curva | MED Associates Inc | VFC-008-CWI | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Data processing.zip | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Caixa de Controle NIR/Luz Branca | MED Associates Inc | NIR-100 | |
| Troca Rápida Unidade de Piso/Panela para Mouse | MED Associates Inc | ENV-005FPU-M | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Pequeno Gabinete de Mesa e Fonte de Alimentação | MED Associates Inc | SG-6080D | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Estimulador/Scrambler Aversivo Autônomo (115 V / 60 Hz) | MED Associates Inc | ENV-414S | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Câmara de Condicionamento de Medo Padrão | MED Associates Inc | VFC-008 | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Protocolo de treinamento VFC.pro | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Pacote de Condicionamento de Medo de Vídeo para Rat | MED Associates Inc | MED-VFC-SCT-R |
Referências
- Frankland, P. W., Bontempi, B. The organization of recent and remote memories. Nature Reviews Neuroscience. 6 (2), 119-130 (2005).
- Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, P. W., Kida, S. Activation of LVGCCs and CB1 receptors requi....
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Reimpressões e permissões
