Intubação Orotraqueal Repetida em Camundongos

Summary

O objetivo deste artigo é descrever um método refinado de intubação do rato de laboratório. O método é não invasivo e, portanto, ideal para estudos que requerem monitoramento serial da função respiratória e/ou instilação de tratamentos no pulmão.

Abstract

A literatura descreve vários métodos para intubação de camundongos que requerem visualização da grunagem através da cavidade oral ou incisão no pescoço ventral para confirmação direta da colocação da cânula na traqueia. A dificuldade relativa ou o trauma tecidual induzido ao sujeito por tais procedimentos pode ser um impedimento para a capacidade do pesquisador de realizar estudos longitudinares. Este artigo ilustra uma técnica na qual a manipulação física do camundongo após o uso de um depilatório para remover cabelos do pescoço ventral permite a visualização transcutânea da traqueia para intubação orotraqueal, independentemente do grau da pele Pigmentação. Este método é inócuo ao sujeito e facilmente alcançado com uma compreensão limitada da anatomia murina. Essa abordagem refinada facilita a intubação repetida, que pode ser necessária para monitorar a progressão da doença ou a instilação dos tratamentos. O uso deste método pode resultar em uma redução do número de animais e habilidade técnica necessária para medir a função pulmonar em modelos de camundongos de doenças respiratórias.

Introduction

O rato de laboratório é um modelo animal comum para doenças respiratórias humanas. Assim, existem vários métodos publicados para a intubação do rato para fins tanto de instilação de tratamentos quanto de medição da mecânica respiratória. A maioria dos procedimentos descritos requer visualização da gária através da cavidade oral com equipamentos especializados como laringoscópio ou fonte de luz de fibra óptica^{1,,2,,3,,4,,5,,6,7}. No entanto....

Protocol

Todas as atividades de animais aqui descritas foram aprovadas pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais (IACUC) da Universidade Estadual de Ohio e foram conduzidas em instalações credenciadas pela AAALAC.

1. Preparação do procedimento

1. Construa a plataforma de entubação. Para alcançar a inclinação da plataforma apropriada, utilize um aglutinante de 3,6 cm (três polegadas). Dobre um comprimento de 15-20 cm de seda 3-0 ou outro material de rosca ao meio e adere as extremidades da rosca ao topo da plataforma inclinada com fita para criar um laço de suspensão(Figura 1).
2. Selecione uma....

Results

Monitoramento serial da função pulmonar da linha de base
As fêmeas balb/c de dez semanas e os camundongos C57BL/6 de 10 semanas (n = 3 de cada cepa) foram entubados utilizando o método descrito nos dias 0, 3, 10 e 17. Após a intubação em cada dia, o sujeito foi conectado a um ventilador mecânico fornecido com 100% de oxigênio (Tabela de Materiais). A resistência respiratória (Rrs) foi medida utilizando-se a técnica de oscilação forçada para 60 s após uma inflação profunda de 25 cm H

Discussion

A intubação utilizando a técnica de visualização traqueal transcutânea oferece uma abordagem refinada ao método padrão de incisão cutânea. Com atenção especial a vários passos-chave, a intubação pode ser facilmente e rapidamente alcançada. O animal deve ser colocado diretamente em recumbência dorsal na plataforma de intubação com o rato preso em retração suave. Isso estenderá o animal para o alinhamento vertical e o posicionamento adequado para a intubação. Além disso, o creme depilatório não deve permanecer em contato c.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cateter intravenoso de 18 G x 1 1/4", Safelet	Fisher Scientific	#14-841-14	Cânula para intubação
70% de etanol, 10 L	Fisher Scientific	25467025	Cânula
de limpeza Papel abrasivo (lixa)	Porter-Cable	74001201	Preparação da cânula
Injeção AnaSed (solução estéril de xilazina) (100 mg/mL)	Akorn Animal Health	NDC# 59399-111-50
Fita de rotulagem Anesthesia Blue (0.5 in x 14 yds)	Fisher Scientific	15966	Restrição na plataforma de intubação
Sutura de seda trançada sem agulha, não estéril, (3-0)	Henry Schein	Item #1007842	Plataforma de intubação
Almofada Isotérmica	Deltaphase Braintree Scientific	39DP	Mouse termorregulação e recuperação
Operação Deltaphase Placa	Braintree Scientific	39OP	Recuperação de rato (antes da extubação)
Água destilada	ThermoFisher	15230253	Limpeza de rato após depilação
Tesoura ocular, angular, afiada/afiada	Harvard Apparatus	72-8437	Preparação da cânula
FlexiVent (Módulo FX 2)	Scireq	N/A	Registre os dados da função pulmonar (não é necessário realizar o procedimento, usado neste estudo para validar o procedimento)
Esponjas de gaze	Fisher scientific	13-761-52	Depilação
Heavy-Duty 3 "3-Ring View Binders	Staples	24690CT	Plataforma de intubação
Instat Software	Graphpad N	/ A	Software de análise estatística
Seringa de insulina (0,5 cc, U100)	Fisher Administração de	de 329461
Injeção de cetamina HCl, USP (100 mg/mL)	Llyod Laoratórios	Lista nº 4871	Anestesia
Bulbo de insuflação pulmonar	Aparelho Harvard	72-9083	Confirme a colocação da cânula
Microfórceps, curva, lisa	Aparelho Harvard	72-0445	Retraia a língua e crie tensão no pescoço para visualização
da cânulaNair (loção depilatória), frasco de 9 onças	Church & Dwight	42010440	Depilação
Solução salina estéril (0,9%), 10 mL	Fisher Scientific	NC9054335	Anestesia, limpeza da pele após a depilação