Apresentado aqui é um protocolo para estudar o comportamento anedônico e depressão em ratos. Combina dois métodos comportamentais bem estabelecidos, a preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades, com um sistema automatizado de monitoramento de consumo alimentar e líquido, para investigar indiretamente o comportamento dos roedores usando parâmetros substitutos.
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Artigo de método
Preferência por sacarose e testes de hipofagia induzidos por novidades em ratos usando um sistema automatizado de monitoramento da ingestão de alimentos
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
A prevalência e incidência de transtornos depressivos estão aumentando em todo o mundo, afetando cerca de 322 milhões de indivíduos, ressaltando a necessidade de estudos comportamentais em modelos animais. Neste protocolo, para estudar o comportamento anedônico e anedônico semelhante à depressão em ratos, a preferência estabelecida por sacarose e os testes de hipofagia induzidos por novidades são combinados com um sistema automatizado de monitoramento de consumo alimentar e líquido. Antes dos testes, no paradigma de preferência da sacarose, os ratos machos são treinados por pelo menos 2 dias para consumir uma solução de sacarose, além da água da torneira. Durante o teste, os ratos são novamente expostos à solução de água e sacarose. O consumo é registrado a cada segundo pelo sistema automatizado. A razão entre sacarose e a ingestão total de água (razão de preferência de sacarose) é um parâmetro substituto para a anedonia. No teste de hipofagia induzida pela novidade, os ratos machos passam por um período de treinamento no qual são expostos a um lanche palatável. Durante o treinamento, os roedores mostram uma ingestão estável de lanches na linha de base. No dia do teste, os animais são transferidos de gaiolas domésticas para uma gaiola fresca e vazia representando um novo ambiente desconhecido com acesso ao conhecido lanche palatável. O sistema automatizado registra a ingestão total e sua microestrutura subjacente (por exemplo, latência à aproximação do lanche), fornecendo insights sobre comportamentos anedônicos e ansiosos. A combinação desses paradigmas com um sistema de medição automatizado fornece informações mais detalhadas, juntamente com maior precisão, reduzindo erros de medição. No entanto, os testes utilizam parâmetros substitutos e apenas retratam depressão e anedonia de forma indireta.
Introdução
Em média, 4,4% da população mundial é afetada pela depressão. Estes representam 322 milhões de pessoas em todo o mundo, um aumento de 18% em relação a dez anos atrás1. Segundo estimativas da Organização Mundial da Saúde, a depressão será a segunda no ranking de Anos de Vida Ajustado por Incapacidade em 20202. Para enfrentar a crescente prevalência de transtornos afetivos e estabelecer novas estratégias intervencionistas, é necessário estudar melhor esse comportamento. Antes e além do exame em humanos, são necessários estudos em animais.
Vários modelos foram estabelecidos para estudar component....
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Protocolo
O cuidado com os animais e os procedimentos experimentais seguiram as diretrizes específicas de ética institucional e foram aprovados pela autoridade estadual para pesquisa animal.
1. Funcionamento do sistema de monitoramento automatizado
NOTA: Ao operar o sistema de monitoramento automatizado, é crucial documentar todas as ações na caixa de comentários incluídas no software imediatamente antes da ação. A descrição deve ser digitado na caixa de comentários e, pressionando Save,ela é salva com um ponto de tempo específico. Os prazos são significativos na análise dos dados, uma vez que o sistema regi....
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Resultados
Para testar a distribuição de dados, foi utilizado o teste Kolmogorov-Smirnov. Os testes T foram utilizados quando os dados foram normalmente distribuídos e o teste Mann-Whitney-U foi utilizado, se não. Anova unidirecional seguida de teste pós-hoc tukey foi usado para comparação de vários grupos normalmente distribuída. ANOVA unidirecional, seguida do teste de comparação múltipla de Dunn, foi utilizado em casos de distribuição não normal. As diferenças entre os grupos foram consideradas significativas quando p &.......
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Discussão
A preferência por sacarose e os testes de hipofagia induzidos por novidades são duas técnicas estabelecidas para avaliar a anedonia em ratos. Sua combinação com o sistema automatizado de monitoramento da ingestão de alimentos permite uma análise mais detalhada em ratos não perturbados e reduz a medição errônea.
A incidência de erros é reduzida por diferentes abordagens. Primeiro, para resolver o erro ocorrido devido ao derramamento, a lacuna entre o funil de alimentos e o portão permite que mi.......
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Divulgações
A.S. é consultora da A & R Berlin, Boehringer-Ingelheim, Takeda e Schwabe. Não existem conflitos de interesse.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado pelo financiamento da Fundação Alemã de Pesquisa (STE 1765/3-2) e do Financiamento Universitário charité (UFF 89/441-176, A.S.).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Montagem LH Cage Mount - RAT-FOOD - inclui montagem de gaiola de aço inoxidável, hopper, bloqueador, acoplamento | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMPRF01 | |
| Montagem LH Cage Mount desplugado - RAT - FOOD inclui montagem de gaiola de aço inoxidável, hopper, bloqueador, adaptador desplugado, acoplamento | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMUPRF01 | |
| gaiola c/ 2 aberturas - RAT - gaiola modificada costum - inclui tampo da gaiola e garrafa de água padrão | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCR02 | caixa única |
| Coleta de dados Laptop Windows - Configurado com Software BioDAQ | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EUA | Enriquecimento BLT003 | |
| (tubos de plástico, roer madeira) | distribuído pela instalação animal | ||
| Migalhas de biscoito Graham da HoneyMaid | Nabisco, East Hanover, NJ, | EUA ASIN: | lanche palatável para teste NIH |
| rack de polímero de baixa vibração | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EUA | BRACKR | |
| ratos Sprague Dawley machos Código de | Envigo | : 002 | |
| Modelo #2210 32x Port BioDAQ Central Controller - inclui cabos e kit | de calibraçãoResearch Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCC32_03 | |
| Controlador de sensor periférico - inclui cabo | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BPSC01 | |
| SigmaStat 3.1 | Systat Software, San Jose, CA, USA | análise estatística | |
| Bloqueador de aço inoxidável | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BBLKR | |
| dieta padrão para roedores com 10 kcal% de gordura | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, EUA | D12450B | |
| sacarose em pó | Roth | 4621.1 | para SPT |
Referências
- World Health Organization. Depression. , Available from: https://www.who.int/health-topics/depression (2018).
- Reddy, M. S. Depression: the disorder and the burden. Indian Journal of Psychological Medicine. 32 (1), 1-2 (2010).
- Cryan, J. F., Mombereau, C.
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Reimpressões e permissões
