نموذج موجة الانفجار منخفضة الكثافة للتقييم قبل السريري لإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة المغلقة الرأس في القوارض
Summary
نقدم هنا بروتوكولا لنموذج موجة الانفجار للقوارض للتحقيق في الآثار العصبية البيولوجية والفسيولوجية المرضية لإصابات الدماغ الرضحية الخفيفة إلى المتوسطة. لقد أنشأنا إعدادا يعمل بالغاز وعلى مقاعد البدلاء مزودا بأجهزة استشعار الضغط مما يسمح بتوليد موثوق به وقابل للتكرار من إصابات الدماغ الرضحية الخفيفة إلى المتوسطة الناجمة عن الانفجار.
Abstract
إصابات الدماغ الرضحية (TBI) هي مشكلة صحية عامة واسعة النطاق. TBI الخفيف هو الشكل الأكثر انتشارا من الصدمات العصبية ويمثل عددا كبيرا من الزيارات الطبية في الولايات المتحدة. لا توجد حاليا علاجات معتمدة من إدارة الأغذية والعقاقير (FDA) متاحة ل TBI. ويزيد تزايد حالات الإصابة بالسل الناجم عن الانفجار المرتبط بالجيش من حدة الحاجة الملحة إلى علاجات فعالة للإصابة بالسل. لذلك ، فإن النماذج الحيوانية الجديدة قبل السريرية TBI التي تلخص جوانب TBI المرتبطة بالانفجار البشري ستعزز بشكل كبير الجهود البحثية في العمليات العصبية البيولوجية والفسيولوجية المرضية الكامنة وراء TBI الخفيف إلى المعتدل بالإضافة إلى تطوير استراتيجيات علاجية جديدة ل TBI.
نقدم هنا نموذجا موثوقا به وقابلا للتكرار للتحقيق في الآثار الجزيئية والخلوية والسلوكية ل TBI الخفيف إلى المعتدل الناجم عن الانفجار. نحن نصف بروتوكولا خطوة بخطوة ل TBI الخفيف المغلق الرأس الناجم عن الانفجار في القوارض باستخدام إعداد على مقاعد البدلاء يتكون من أنبوب صدمة يعمل بالغاز مزود بأجهزة استشعار الضغط الكهرضغطية لضمان ظروف اختبار متسقة. تتمثل فوائد الإعداد الذي أنشأناه في التكلفة المنخفضة نسبيا وسهولة التركيب وسهولة الاستخدام وسعة الإنتاجية العالية. تشمل المزايا الإضافية لنموذج TBI غير الغازي هذا قابلية التوسع في ذروة الضغط الزائد للانفجار وتوليد نتائج قابلة للتكرار خاضعة للرقابة. وقد تم تقييم قابلية تكرار نموذج TBI هذا وأهميته في عدد من التطبيقات النهائية، بما في ذلك التحليلات العصبية البيولوجية والعصبية المرضية والفسيولوجية العصبية والسلوكية، مما يدعم استخدام هذا النموذج لتوصيف العمليات الكامنة وراء مسببات TBI الخفيف إلى المتوسط.
Introduction
تمثل إصابات الدماغ الرضحية (TBI) أكثر من مليوني زيارة للمستشفيات كل عام في الولايات المتحدة وحدها. يمثل مرض السل الخفيف الناتج عادة عن حوادث السيارات أو الأحداث الرياضية أو السقوط حوالي 80٪ من جميع حالات الإصابة بالسل1. يعتبر TBI الخفيف “المرض الصامت” لأن المرضى غالبا ما لا يعانون من أي أعراض علنية في الأيام والأشهر التالية للإهانة الأولية ، ولكن يمكن أن يصابوا بمضاعفات خطيرة مرتبطة ب TBI في وقت لاحق من الحياة2. علاوة على ذلك ، ينتشر TBI الخفيف الناجم عن الانفجار بين أعضاء الخدمة العسكرية ، وقد ارتبط بخلل الجهاز العصبي المركزي المزمن3،4،5،6. نظرا لارتفاع معدل الإصابة بالسل الخفيف المرتبط بالانفجار TBI7,8 ، أصبحت النمذجة قبل السريرية للعمليات العصبية البيولوجية والفسيولوجية المرضية المرتبطة ب TBI الخفيف محورا في تطوير تدخلات علاجية جديدة ل TBI.
تاريخيا، ركزت أبحاث السل في المقام الأول على الأشكال الحادة من الصدمات العصبية، على الرغم من العدد المنخفض نسبيا من حالات السل البشرية الشديدة. تم تطوير نماذج القوارض قبل السريرية ل TBI البشري الحاد ، بما في ذلك التأثير القشري الخاضع للرقابة (CCI) 9,10 وإصابات قرع السوائل (FPI)11 ، وكلاهما راسخ لإنتاج تأثيرات فسيولوجية مرضية موثوقة 12,13. وقد وضعت هذه النماذج الأساس لما هو معروف اليوم عن التهاب الأعصاب والتنكس العصبي وإصلاح الخلايا العصبية في TBI. على الرغم من تطوير معرفة كبيرة بالفيزيولوجيا المرضية ل TBI ، إلا أنه لا توجد حاليا علاجات فعالة معتمدة من إدارة الأغذية والعقاقير متاحة ل TBI.
وفي الآونة الأخيرة، تم توسيع نطاق تركيز بحوث السل لتشمل طائفة أوسع من الأمراض المرتبطة بالسل بهدف نهائي هو تطوير تدخلات علاجية فعالة. ومع ذلك ، فقد تم إنشاء عدد قليل من النماذج قبل السريرية ل TBI الخفيف التي أظهرت تأثيرات قابلة للقياس ، ولم يحقق سوى عدد قليل من الدراسات في طيف TBI الخفيف 2,14,15. وبما أن السل الخفيف يمثل الغالبية العظمى من جميع حالات السل، هناك حاجة ماسة إلى نماذج موثوقة من السل الخفيف لتسهيل البحث في المسببات والفيزيولوجيا العصبية للحالة البشرية، من أجل تطوير استراتيجيات علاجية جديدة.
بالتعاون مع مهندسي الطب الحيوي وعلماء فيزياء الفضاء الجوي ، أنشأنا نموذجا قابلا للتطوير لموجة الانفجار المغلقة الرأس ل TBI الخفيف إلى المتوسط. تم تطوير نموذج القوارض قبل السريرية هذا خصيصا للتحقيق في آثار ديناميكيات القوة ، بما في ذلك موجات الانفجار وحركة التسارع / التباطؤ ، والتي ترتبط ب TBI البشري الخفيف الذي تم الحصول عليه في القتال العسكري والأحداث الرياضية وحوادث السيارات والسقوط. نظرا لأن الموجات الانفجارية ترتبط بديناميكيات القوة التي تسبب TBI الخفيف لدى البشر ، فقد تم تصميم هذا النموذج لإنتاج شكل موجة فريدلاندر ثابت مع دفعة ، والتي يتم قياسها على أنها رطل لكل بوصة مربعة (psi) * مللي ثانية (مللي ثانية). يتم تحجيم مستوى الدافع ليقل عن منحنيات فتك الرئة المحددة للفئران والجرذان من أجل إجراء التحقيقات قبل السريرية 16،17،18. بالإضافة إلى ذلك ، يسمح هذا النموذج بالتحقيق في إصابة الانقلاب و contrecoup بسبب قوى الدوران السريعة لرأس الحيوان. هذا النوع من الإصابات متأصل في عدة أنواع من عروض TBI السريرية ، بما في ذلك تلك التي لوحظت في كل من السكان العسكريين والمدنيين. لذلك ، يناسب هذا النموذج متعدد الاستخدامات حاجة تشمل عروضا سريرية متعددة ل TBI.
ينتج النموذج قبل السريري المعروض هنا تغيرات فسيولوجية مرضية موثوقة وقابلة للتكرار مرتبطة ب TBI الخفيف السريري كما هو موضح في عدد من الدراسات السابقة17،19،20،21،22،23. أظهرت الدراسات التي أجريت على هذا النموذج أن الفئران التي تعرضت لموجة انفجار منخفضة الكثافة أظهرت التهابا عصبيا وإصابة محورية وتلف الأوعية الدموية الدقيقة والتغيرات الكيميائية الحيوية المتعلقة بإصابة الخلايا العصبية والعجز في اللدونة قصيرة الأجل والاستثارة المتشابكة19. ومع ذلك، لم يحفز نموذج TBI الخفيف هذا أي تغيرات عصبية مرضية عيانية، بما في ذلك تلف الأنسجة والنزيف والورم الدموي والكدمات19 التي لوحظت بشكل شائع في الدراسات التي استخدمت نماذج TBI الغازية المعتدلة إلى الشديدة10,24. أظهرت الأبحاث السابقة19,21,22,23 أن هذا النموذج قبل السريري يمكن استخدامه لتوصيف العمليات العصبية البيولوجية والفسيولوجية المرضية الكامنة وراء مسببات TBI17,19,20,21,22,23 الخفيفة والمعتدلة. ويسمح هذا النموذج أيضا باختبار مركبات واستراتيجيات علاجية جديدة، فضلا عن تحديد أهداف جديدة ومناسبة لتطوير تدخلات فعالة في مجال TBI19،21،22،23.
تم تطوير هذا النموذج للتحقيق في الآثار الناجمة عن موجات الانفجار وكذلك قوى الدوران السريع على النتائج الجزيئية والخلوية والسلوكية في القوارض. على غرار نموذج موجة الانفجار المعروض هنا ، تم تطوير عدد من النماذج قبل السريرية التي تحاول تلخيص TBI الخفيف إلى المعتدل باستخدام موجات الضغط الزائد التي يحركها الغاز2،14،17،25،26،27،28. وتشمل بعض القيود المفروضة على النماذج الأخرى ما يلي: يتم تثبيت الحيوان على شبكة سلكية ويتم تجميد الرأس عند الاصطدام. تتعرض الأعضاء الطرفية للموجة بالإضافة إلى الدماغ ، مما يخلق المتغيرات المربكة للصدمات المتعددة ؛ والنماذج كبيرة وثابتة ، مما يحد من تغيير وتكييف المعلمات الحرجة لظروف نموذج أفضل تذكرنا ب TBI البشري.
تتمثل فوائد إعداد أنبوب الصدمة الذي يعمل بالغاز على الطاولة في التكلفة المنخفضة نسبيا لنفقات الاستحواذ والتشغيل ، بالإضافة إلى سهولة التركيب والاستخدام. علاوة على ذلك ، يسمح الإعداد بتشغيل عالي الإنتاجية وتوليد موجات انفجار قابلة للتكرار يتم التحكم فيها ونتائج في الجسم الحي في كل من الفئران والجرذان. من أجل التحكم في ظروف الاختبار المتسقة (أي موجة الانفجار المستمرة والضغط الزائد) ، تم تجهيز الإعداد بأجهزة استشعار الضغط. تشمل مزايا هذا النموذج ل TBI قابلية التوسع في شدة الإصابة وأن TBI الخفيف يتم تحفيزه باستخدام إجراء غير جراحي مغلق الرأس. تزداد ذروة الضغط الزائد وإصابات الدماغ اللاحقة مع أغشية البوليستر السميكة بطريقة متسقة قابلة للتطوير17. تعد القدرة على قياس شدة TBI من خلال سمك الغشاء أداة مفيدة لتحديد المستوى ، حيث تصبح مقاييس النتائج المحددة (على سبيل المثال ، التهاب الأعصاب) واضحة. كما يسمح توفير التدريع الواقي للأعضاء الطرفية بإجراء تحقيق مركز في آليات TBI الخفيفة عن طريق تجنب أو تقليل المتغيرات المربكة للإصابة الجهازية ، مثل إصابة الرئة أو الصدر. علاوة على ذلك ، يسمح هذا الإعداد بتحديد الاتجاه ، الذي تضرب به موجة الانفجار / تخترق الرأس (أي وجها لوجه أو جانبيا أو أعلى أو تحت) وبالتالي يمكن التحقيق في أنواع مختلفة من الإهانات التي تسبب TBI. يستخدم الإجراء القياسي للحث على TBI الخفيف إلى المعتدل الموصوف هنا التعرض الجانبي لتقييم آثار إصابة موجة الانفجار بالاقتران مع إصابة الانقلاب و contrecoup بسبب قوى الدوران السريعة. علاوة على ذلك ، من أجل التحقيق حصريا في الإصابات الناجمة عن الانفجار ، يمكن استخدام التعرض لموجة الانفجار من أعلى إلى أسفل في هذا النموذج.
Protocol
Representative Results
Discussion
نقدم هنا نموذج TBI خفيف قبل السريري فعال من حيث التكلفة وسهل الإعداد والتنفيذ ، ويسمح بنتائج تجريبية عالية الإنتاجية وموثوقة وقابلة للتكرار. يوفر هذا النموذج درعا واقيا للأعضاء الطرفية للسماح بإجراء تحقيق مركز في آليات TBI الخفيفة مع الحد من المتغيرات المربكة للإصابة الجهازية. في المقابل، ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر R. Gettens و N. St. Johns و P. Bennet و J. Robson على مساهماتهم في تطوير نموذج TBI. دعمت منح NARSAD للباحثين الشباب من مؤسسة أبحاث الدماغ والسلوك (F.P. و M.J.R.) ، ومنحة بحثية من صندوق داريل ك. الملكي للبحوث لمرض الزهايمر (F.P.) وجائزة مؤسسة PhRMA (M.J.R.) هذا البحث. تم دعم هذا العمل من خلال زمالات ما قبل الدكتوراه من المؤسسة الأمريكية للتعليم الصيدلاني (A.F.L و B.P.L).
Materials
| 3/8 SAE High Pressure Hydraulic Hose | Eaton Aeroquip | R2-6-6-36M | Available from Grainger |
| 3/8'' Quick Connect Female Plugs | Karcher | KAR 86410440 | |
| 3/8'' Quick Connect Male Plugs | Karcher | KAR 86410440 | |
| ANY-maze video tracking software | Stoelting Co. | ANY-maze software | |
| Clear Mylar membrane | ePlastics.com | POLYCLR0.003 | http://www.eplastics.com/Plastic/Clear_Polyester_Film/POLYCLR0-003; Clear Mylar membrane is sold in various thicknesses. All are sold by vendor listed above. |
| Compound Slide Table (X2) | Grizzly Industrial | G5757 | |
| Deadman Gas Control Ball Valve | Coneraco Inc. | 71-502-01 | "Apollo", Available from Grainger |
| Driver and driven section (murine) | own design/production | n/a | For further information please contact the authors |
| Driver and driven section (rat) | own design/production | n/a | For further information please contact the authors |
| Ear Muffs | 3M | 37274 | Available from Grainger |
| Gas Regulator – Hi Flow 3500-600-580 | Harris | 3003539 | |
| Helium Gas | AirGas | HE 300 | Tanks are available in various sizes |
| Inhalation Anesthesia System | VetEquip | 901806 | |
| Input Module | National Instruments | NI 9223 | |
| Isoflurane | Baxter | NDC 10019-360-40 | Ordered by veterinarian |
| Laboratory Timer/Stopwatch | Fisher Scientific | 50-550-352 | |
| Labview version 12.0 | National Instruments | Data Acquistion Software | |
| Magnetic Dial Indicator/Micrometer | Grizzly Industrial | G9849 | |
| MATLAB | MathWorks | Software for pressure recording analysis | |
| Oxygen Regulator | Medline | HCS8725M | |
| PC for Data Processing | Dell | ||
| Polyvinylchloride Tubing – 25.4 mm | FORMUFIT | P001FGP-WH-40×3 | |
| Pressure sensors | PCB Piezotronics | 102A05 | |
| Receiver USB Chassis | National Instruments | DAQ-9171 | |
| Sensor Signal Conditioner | PCB Piezotronics | 482C series | |
| Stainless NSF-Rated Mounting Table | Gridmann | GR06-WT2448 | |
| T Handle Allen Wrench – 3/16'' | S&K | 73310 |
Referências
- Bazarian, J. J., et al. Mild traumatic brain injury in the United States, 1998–2000. Brain Injury. 19 (2), 85-91 (2005).
- Meabon, J. S., et al. Repetitive blast exposure in mice and combat veterans causes persistent cerebellar dysfunction. Science Translational Medicine. 8 (321), (2016).
- Mac Donald, C. L., et al. Detection of blast-related traumatic brain injury in U.S. military personnel. New England Journal of Medicine. 364 (22), 2091-2100 (2011).
- Fischer, B. L., et al. Neural activation during response inhibition differentiates blast from mechanical causes of mild to moderate traumatic brain injury. Journal of Neurotrauma. 31 (2), 169-179 (2014).
- Peskind, E. R., et al. Cerebrocerebellar hypometabolism associated with repetitive blast exposure mild traumatic brain injury in 12 Iraq war Veterans with persistent post-concussive symptoms. Neuroimage. 54, 76-82 (2011).
- Jorge, R. E., et al. White matter abnormalities in veterans with mild traumatic brain injury. American Journal of Psychiatry. 169 (12), 1284-1291 (2012).
- Hoge, C. W., et al. Mild traumatic brain injury in U.S. Soldiers returning from Iraq. New England Journal of Medicine. 358 (5), 453-463 (2008).
- Eskridge, S. L., et al. Injuries from combat explosions in Iraq: injury type, location, and severity. Injury. 43 (10), 1678-1682 (2012).
- Lighthall, J. W. Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model. Journal of Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).
- Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).
- McIntosh, T. K., et al. Traumatic brain injury in the rat: characterization of a lateral fluid-percussion model. Neurociência. 28 (1), 233-244 (1989).
- Thompson, H. J., et al. Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation. Journal of Neurotrauma. 22 (1), 42-75 (2005).
- Osier, N., Dixon, C. E. Mini Review of Controlled Cortical Impact: A Well-Suited Device for Concussion Research. Brain Sciences. 7 (7), (2017).
- Goldstein, L. E., et al. Chronic traumatic encephalopathy in blast-exposed military veterans and a blast neurotrauma mouse model. Science Translational Medicine. 4 (134), (2012).
- Rodriguez-Grande, B., et al. Gliovascular changes precede white matter damage and long-term disorders in juvenile mild closed head injury. Glia. 66 (8), 1663-1677 (2018).
- Bowen, I. G., Fletcher, E. R., Richmond, D. R., Hirsch, F. G., White, C. S. Biophysical mechanisms and scaling procedures applicable in assessing responses of the thorax energized by air-blast overpressures or by nonpenetrating missiles. Annals of the New York Academy of Sciences. 152 (1), 122-146 (1968).
- Turner, R. C., et al. Modeling clinically relevant blast parameters based on scaling principles produces functional & histological deficits in rats. Experimental Neurology. , 520-529 (2013).
- Lucke-Wold, B. P., et al. Elucidating the role of compression waves and impact duration for generating mild traumatic brain injury in rats. Brain Injury. 31 (1), 98-105 (2017).
- Hernandez, A., et al. Exposure to mild blast forces induces neuropathological effects, neurophysiological deficits and biochemical changes. Molecular Brain. 11 (1), 64 (2018).
- Bittar, A., et al. Neurotoxic tau oligomers after single versus repetitive mild traumatic brain injury. Brain Communications. 1 (1), (2019).
- Logsdon, A. F., et al. Salubrinal reduces oxidative stress, neuroinflammation and impulsive-like behavior in a rodent model of traumatic brain injury. Brain Research. 1643, 140-151 (2016).
- Lucke-Wold, B. P., et al. Bryostatin-1 Restores Blood Brain Barrier Integrity following Blast-Induced Traumatic Brain Injury. Molecular Neurobiology. 52 (3), 1119-1134 (2015).
- Logsdon, A. F., et al. Altering endoplasmic reticulum stress in a model of blast-induced traumatic brain injury controls cellular fate and ameliorates neuropsychiatric symptoms. Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 421 (2014).
- Dixon, C. E., et al. A fluid percussion model of experimental brain injury in the rat. Journal of Neurosurgery. 67 (1), 110-119 (1987).
- Long, J. B., et al. Blast overpressure in rats: recreating a battlefield injury in the laboratory. Journal of Neurotrauma. 26 (6), 827-840 (2009).
- Budde, M. D., et al. Primary blast traumatic brain injury in the rat: relating diffusion tensor imaging and behavior. Frontiers in Neurology. 4, 154 (2013).
- Genovese, R. F., et al. Effects of mild TBI from repeated blast overpressure on the expression and extinction of conditioned fear in rats. Neurociência. 254, 120-129 (2013).
- Kuriakose, M., Rama Rao, K. V., Younger, D., Chandra, N. Temporal and Spatial Effects of Blast Overpressure on Blood-Brain Barrier Permeability in Traumatic Brain Injury. Scientific Reports. 8 (1), 8681 (2018).
- Cernak, I., et al. The pathobiology of blast injuries and blast-induced neurotrauma as identified using a new experimental model of injury in mice. Neurobiology of Disease. 41 (2), 538-551 (2011).
- Prima, V., Serebruany, V. L., Svetlov, A., Hayes, R. L., Svetlov, S. I. Impact of moderate blast exposures on thrombin biomarkers assessed by calibrated automated thrombography in rats. Journal of Neurotrauma. 30 (22), 1881-1887 (2013).
- Mishra, V., et al. Primary blast causes mild, moderate, severe and lethal TBI with increasing blast overpressures: Experimental rat injury model. Scientific Reports. 6, 26992 (2016).
- Tompkins, P., et al. Brain injury: neuro-inflammation, cognitive deficit, and magnetic resonance imaging in a model of blast induced traumatic brain injury. Journal of Neurotrauma. 30 (22), 1888-1897 (2013).
- Kuriakose, M., et al. Tailoring the Blast Exposure Conditions in the Shock Tube for Generating Pure, Primary Shock Waves: The End Plate Facilitates Elimination of Secondary Loading of the Specimen. Public Library of Science One. 11 (9), 0161597 (2016).
- Panzer, M. B., et al. A Multiscale Approach to Blast Neurotrauma Modeling: Part I – Development of Novel Test Devices for in vivo and in vitro Blast Injury Models. Frontiers in Neurology. 3, 46 (2012).
- Logsdon, A. F., et al. A mouse Model of Focal Vascular Injury Induces Astrocyte Reactivity, Tau Oligomers, and Aberrant Behavior. Archives of Neuroscience. 4 (2), (2017).
- Lee, M. C., Klassen, A. C., Heaney, L. M., Resch, J. A. Respiratory rate and pattern disturbances in acute brain stem infarction. Stroke. 7 (4), 382-385 (1976).
- Ikeda, K., et al. The respiratory control mechanisms in the brainstem and spinal cord: integrative views of the neuroanatomy and neurophysiology. Journal of Physiological Sciences. 67 (1), 45-62 (2017).
- Alilain, W. J., Horn, K. P., Hu, H., Dick, T. E., Silver, J. Functional regeneration of respiratory pathways after spinal cord injury. Nature. 475 (7355), 196-200 (2011).
- Logsdon, A. F., et al. Blast exposure elicits blood-brain barrier disruption and repair mediated by tight junction integrity and nitric oxide dependent processes. Scientific Reports. 8 (1), 11344 (2018).
- Logsdon, A. F., et al. Nitric oxide synthase mediates cerebellar dysfunction in mice exposed to repetitive blast-induced mild traumatic brain injury. Scientific Reports. 10 (1), 9420 (2020).
- Huber, B. R., et al. Blast exposure causes dynamic microglial/macrophage responses and microdomains of brain microvessel dysfunction. Neurociência. 319, 206-220 (2016).
- Gama Sosa, M. A., et al. Low-level blast exposure disrupts gliovascular and neurovascular connections and induces a chronic vascular pathology in rat brain. Acta Neuropathologica Communications. 7 (1), 6 (2019).
- Abutarboush, R., et al. Exposure to Blast Overpressure Impairs Cerebral Microvascular Responses and Alters Vascular and Astrocytic Structure. Journal of Neurotrauma. 36 (22), 3138-3157 (2019).
- Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. Animal models of traumatic brain injury. Nature Reviews: Neuroscience. 14 (2), 128-142 (2013).
- Petraglia, A. L., et al. Concussion in the absence of head impact: a case in a collegiate hammer thrower. Current Sports Medicine Reports. 14 (1), 11-15 (2015).
- Viano, D. C., Casson, I. R., Pellman, E. J. Concussion in professional football: biomechanics of the struck player–part 14. Neurosurgery. 61 (2), 313-327 (2007).
