Un modèle à base de capsules pour l’infestation immature des stades de tiques dures sur des souris de laboratoire
Summary
Dans cette étude, un système d’alimentation pour les stades nymphaux et larvaires de la tique dure a été développé à l’aide d’une capsule attachée à la souris de laboratoire. La capsule d’alimentation est faite à partir de matériaux flexibles et reste fermement attachée à la souris pendant au moins une semaine et permet une surveillance confortable de l’alimentation des tiques.
Abstract
Les tiques sont des parasites d’alimentation sanguine obligatoires à tous les stades de développement (à l’exception des œufs) et sont reconnues comme vecteurs de divers agents pathogènes. L’utilisation de modèles de souris dans la recherche sur les tiques est essentielle pour comprendre leurs interactions biologie et tiques-hôtes-pathogènes. Ici, nous démontrons une technique non laborieuse pour l’alimentation des stades immatures de tiques dures sur les souris de laboratoire. L’avantage de la méthode est sa simplicité, sa courte durée et sa capacité à surveiller ou à collecter des tiques à différents moments d’une expérience. En outre, la technique permet l’attachement de deux capsules individuelles sur la même souris, ce qui est bénéfique pour une variété d’expériences où deux groupes différents de tiques sont nécessaires pour se nourrir sur le même animal. La capsule non irritante et flexible est faite à partir de matériaux facilement accessibles et minimise l’inconfort des animaux expérimentaux. En outre, l’euthanasie n’est pas nécessaire, les souris récupèrent complètement après l’expérience et sont disponibles pour une réutilisation.
Introduction
Les tiques sont des vecteurs importants de plusieurs agents pathogènes et représentent un risque sérieux pour la santé animale et humaine1. La mise en place d’un système d’alimentation efficace est cruciale pour étudier leur biologie, les interactions tiques-hôte-pathogènes ou l’établissement de mesures de contrôle efficaces. Actuellement, plusieurs systèmes d’alimentation artificielle, qui évitent l’utilisation d’animaux vivants sont disponibles pour les tiques2,,3,4 et ceux-ci devraient être utilisés chaque fois que les conditions expérimentales le permettent. Cependant, dans divers contextes expérimentaux, ces systèmes ne parviennent pas à imiter de manière appropriée les caractéristiques physiologiques spécifiques et l’utilisation d’animaux vivants est nécessaire pour obtenir des résultats pertinents.
Les souris de laboratoire sont couramment utilisées pour l’étude de nombreux systèmes biologiques et sont couramment utilisées comme hôtes pour nourrir les tiques5,,6,7,8,9. Les deux méthodes les plus courantes pour nourrir les tiques immatures sur les souris comprennent les infestations libres et l’utilisation de chambres de confinement attachées à la souris. Les infestations gratuites sont principalement utilisées pour les stades larvaires et les tiques engorgées peuvent tomber dans une zone où elles peuvent être récupérées. Les chambres de confinement sont généralement composées de bouchons acryliques ou en polypropylène qui sont collés au dos de la souris. La première technique est un système naturel efficace pour l’alimentation des tiques, mais ne permet pas une surveillance étroite au cours de l’expérience parce que les tiques individuelles sont dispersées dans différentes parties du corps hôte. En outre, les tiques engorgées qui tombent à une zone de récupération peuvent être contaminées par des excréments et de l’urine10,11,12,13,14 qui peuvent gravement affecter la condition physique de la tique ou ils peuvent être endommagés ou mangés par la souris s’il n’y a pas de séparation entre l’animal et la zone de récupération15. Les systèmes de chambre permettent le confinement des tiques à une zone définie, cependant, le processus de collage est laborieux et les bouchons sont souvent faiblement adhérents à la colle et donc ils se détachent souvent au cours de l’expérience16,17,18,19. Les bouchons sont également raides, inconfortables, et conduisent à des réactions cutanées, qui empêchent la réutilisation des souris et nécessite leur euthanasie après l’expérience.
Dans notre étude précédente, nous avons développé avec succès un système efficace utilisant des chambres faites de mousse d’acétate d’éthylène-vinyle (EVA) pour nourrir les tiques sur les lapins de laboratoire20. Ici, nous avons adapté ce système à un modèle de souris et proposons une méthode simple et propre pour nourrir les stades immatures de tiques dures dans des capsules fermées à base de mousse EVA. Plus précisément, notre système utilise des capsules élastiques en mousse EVA collées aux souris rasées avec séchage rapide (3 min), colle en latex non irritante. Cette technique permet une fixation ferme et durable des capsules à la souris expérimentale, ainsi qu’une infestation/collecte efficace des tiques pendant tout le cours de l’expérience. La capsule plate est faite de matériaux flexibles et n’empêche pas la manipulation de la souris à des fins de collecte de sang ou à d’autres fins. Le système convient principalement aux stades de tique nymphé, mais avec une légère modification, il peut être utilisé pour nourrir les larves ainsi. La méthode peut être complétée par une seule personne expérimentée et une formation approfondie n’est pas nécessaire.
Protocol
Representative Results
Discussion
L’étape la plus critique dans le protocole est le collage ferme de la capsule à la peau de la souris. Par conséquent, la colle en latex doit être appliquée homogénéirement à toute la surface eva-mousse de la capsule et une pression constante pendant 3 minutes doit être appliquée, en particulier sur le côté gauche et droit de la capsule. Nous recommandons également le placement de la capsule aussi loin vers l’avant sur le dos que possible pour éviter son enlèvement par la souris en utilisant ses pattes …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous reconnaissons l’assistance technique d’Alain Bernier Français’Institut national de la recherche agronomique (INRAE) et d’Océane Le Bidel (ANSES). L’étude a été soutenue par le DIM One Health – Région Île-de-France (Acronyme du projet: NeuroPaTick). Les souris ont été achetées par l’ANSES. Le Dr Jeffrey L. Blair est reconnu pour avoir examiné la version antérieure du manuscrit.
Materials
| EVA-foam 2 mm thick, (low density) | Cosplay Shop | EVA-45kg (950/450/2 mm) | It can be ordered also via Amazon (ref. no. B07BLMJDXD) |
| Heat Shrink Tubing Electric Wire Wrap Sleeve | Amazon | B014GMT1AM | Different diameters of Heat Shrink Tubing are available via Amazon. |
| Mice BALB/cByJ | Charles River | Strain code 627 | |
| Mice C57BL/6 | Charles River | Strain code 664 | |
| No-toxic Latex Glue | Tear mender | Fabric & Leather Adhesive | Also available also via Amazon (ref. no. B001RQCTUU) |
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