Стволовые клетки постоянно расследуются как потенциальные методы лечения для людей с повреждением миокарда, однако, их снижение жизнеспособности и удержания в травмированных тканях может повлиять на их долгосрочную эффективность. В этой рукописи мы описываем альтернативный метод доставки стволовых клеток в модели мурина травмы ишемии реперфузии.
Существует значительный интерес к использованию стволовых клеток (СС) для восстановления сердечной функции у лиц с травмами миокарда. Чаще всего, сердечной терапии стволовыми клетками изучается путем доставки SCs одновременно с индукцией травмы миокарда. Однако этот подход представляет собой два существенных ограничения: ранняя враждебная провоспалительные ишемические условия могут повлиять на выживание пересаженных ЦП, и он не представляет собой сценарий инфаркта подостра, при котором, скорее всего, будут использоваться ЦП. Здесь мы описываем две части серии хирургических процедур для индукции ишемии-реперфузии травмы и доставки мезенхимальных стволовых клеток (MSCs). Этот метод введения стволовых клеток может позволить для более длительной жизнеспособности и удержания вокруг поврежденных тканей, минуя первоначальный иммунный ответ. Модель травмы ишемии реперфузии была вызвана у мышей сопровождается доставкой мезенхимальных стволовых клеток (3,0 х10 5), стабилически выражая репортер гена светлячок люцифераза под constitutively выраженный промоутер CMV, внутримойокардиально 7 дней спустя. Эти животные были изображены с помощью ультразвуковой и биолюминесцентной визуализации для подтверждения травмы и инъекции клеток, соответственно. Важно отметить, что при выполнении этого двух процедурного подхода к доставке SC не было дополнительной скорости осложнений. Этот метод введения стволовых клеток, коллективно с использованием самых известных генов репортера, может позволить in vivo исследование жизнеспособности и удержания пересаженных SCs в ситуации хронической ишемии обычно видели клинически, а также в обход первоначального провоспалительный ответ. Таким образом, мы установили протокол для задержки доставки стволовых клеток в миокард, который может быть использован в качестве потенциального нового подхода в содействии регенерации поврежденной ткани.
Сердечно-сосудистые заболевания остаются наиболее распространенной причиной заболеваемости и смертности во всем мире. Сердечные ишемические события, как было установлено, наносят ущерб общей функции миокарда и окружающих клеток1. Только ̴0,45-1,0% кардиомиоцитов будет регенерировать каждый год после повреждения миокардапроисходит 2. Несмотря на растущий спрос и присущий акцент на разработке методов лечения, терапии помощи в регенерации поврежденных тканей было трудно установить и по-прежнемутребуют дальнейшей оптимизации 3,4,5. Терапия стволовыми клетками была введена в качестве альтернативного пути для омоложения поврежденных тканей после ишемического события; однако, выдвижение этих терапий было оспорено лимитированная выживаемость и хранение клеток к поврежденной зоне6.
Микрооквидение сердца после ишемического события можно охарактеризовать как гипоксическое, прооксидантное и провоспалительные, представляя враждебные условия для терапевтических стволовых клеток, чтобы приспособиться квыживанию 7,8. Как иммунный ответ срабатывает после травмы, наивные лимфоциты, макрофаги, нейтрофилов и тучных клеток пытаются восстановить повреждения путем удаления умирающих клеток и модуляции процессадля ткани ремоделирования 9,10,11. В течение первых 3 дней после ишемии, воспаление находится на пике с выпуском провоспалительных цитокинов с большим количеством нейтрофилов и моноцитовв области 10,12. После 7 дней, большая часть воспаления утихла, и переход к репаративным клеткам начинается, продолжая до тех пор, пока ремоделирование каскад завершен, примерно 14 дней умышей 13. Наш хирургический метод является потенциальным альтернативным подходом к внедрению биопрепаратов в миокард, чтобы обойти пик врожденного иммунного ответа после травмы ишемии реперфузии. В то же время, это позволит для изучения любых методов лечения в состоянии подострый / хронической ишемии, где могут быть различные переменные для рассмотрения по сравнению с острым инфарктом миокарда.
Более 85 миллионов человек во всем мире страдают от сердечно-сосудистыхзаболеваний 3. Высокая распространенность этих ишемических явлений требует дальнейшего развития и расширения альтернативных методов лечения для содействия регенерации поврежденных тканей. Традицион?…
The authors have nothing to disclose.
Ни один.
0.9% NaCl Irrigation, USP | Baxter | 0338-0048-04 | |
11×12" Press n' Seal surgical drape, autoclavable | SAI Infusion Technologies | PSS-SD | |
24G 3/4" IV catheter tube | Jelco | 4053 | |
28G x 1/2" 1mL allergy syringe | BD | 305500 | Injection of analgesic |
30G x 1/2" 3/10cc insulin syringe | Ulticare | 08222.0933.56 | Injection of stem cells |
6-0 S-29, 12" Vicryl suture | Ethicon | J556G | Intercostal, superficial muscle and skin layer incision closure |
9-0 BV100-4, 5" Ethilon suture | Ethicon | 2829G | Ligation of the LAD artery |
Absorbent underpad | Thermo Fischer Scientific | 14-206-64 | For underneath the animal |
Alcohol prep pads, 2 ply, medium | Coviden | 6818 | |
Anti-fog face mask | Halyard | 49235 | |
Bonn Strabismus scissors, curved, blunt | Fine Science Tools | 14085-09 | |
Buprenorphine HCL SR LAB 1mg/ml, 5 ml | ZooPharm Pharmacy | Buprenorphine narcotic analgesic formulated in a polymer that slows absorption extending duration of action (72 hours duration of activity). | |
Castroviejo needle holders, curved | Fine Science Tools | 12061-01 | |
Curity sterile gauze sponges | Coviden | 397310 | |
Delicate suture tying forceps, 45 angle bent | Fine Science Tools | 11063-07 | |
Electric Razor | Wahl | Fur removal | |
Isoflurane 100 ml | Cardinal Health | PI23238 | Anesthetic |
Lab coat | |||
Monoject 1 mL hypodermic syringe | Coviden | 8881501400 | |
Moria iris forceps, curved, serrated (x2) | Fine Science Tools | 11370-31 | |
Moria speculum retractor | Fine Science Tools | 17370-53 | |
Mouse endotracheal intubation kit | Kent Scientific | ||
Nair depilatory cream | Johnson & Johnson | Fur removal | |
Optixcare eye lube plus | Aventix | Sterile ocular lubricant | |
Physiosuite ventilator | Kent Scientific | ||
PolyE Polyethylene tubing | Harvard Apparatus | 72-0191 | Temporary compression of LAD artery |
Povidone-iodine swabs | PDI | S41125 | |
Scalpel, 10-blade | Bard-Parker | 371610 | |
Sterile 3" cotton tipped applicators | Cardinal Health | C15055-003 | |
Sterile 6" tapered cotton tip applicators | Puritan | 25-826-5WC | |
Sterile gloves | Cardinal Health | N8830 | |
Sterilization pouches | Medline | MPP100525GS | |
Surgery cap | |||
Surgical Microscope | Leica | M125 | |
Suture tying forceps, straight (x2) | Fine Science Tools | 10825-10 | |
Transpore surgical tape | 3M | 1527-1 | |
Triple antibiotic ointment | G&W Laboratories | 11-2683ILNC2 | Topical application to prevent infection |
Vannas-Tübingen Spring Scissors, curved | Fine Science Tools | 15004-08 | |
Vetflo vaporizer | Kent Scientific |