Enregistrements d’électrocardiogramme chez des souris anesthésiées à l’aide de plomb II
Summary
Nous présentons un protocole ECG qui est techniquement facile, peu coûteux, rapide et abordable chez les petites souris, et peut être exécuté avec une sensibilité accrue. Nous suggérons cette méthode comme approche de dépistage pour l’étude des agents pharmacologiques, des modifications génétiques, et des modèles de maladie chez les souris.
Abstract
L’électrocardiogramme est un outil précieux pour évaluer le système de conduction cardiaque. La recherche animale a contribué à générer de nouvelles informations génétiques et pharmacologiques concernant l’électrocardiogramme. Cependant, faire des mesures d’électrocardiogramme chez de petits animaux in vivo, comme les souris, a été difficile. À cette fin, nous avons utilisé une méthode d’enregistrement d’électrocardiogramme chez des souris anesthésiées avec de nombreux avantages : il s’agit d’une procédure techniquement simple, peu coûteuse, a un court temps de mesure et est abordable, même chez les jeunes souris. Malgré les limitations avec l’utilisation de l’anesthésie, les comparaisons entre le contrôle et les groupes expérimentaux peuvent être effectuées avec une sensibilité accrue. Nous avons traité des souris avec des agonistes et des antagonistes du système nerveux autonome pour déterminer la validité de ce protocole et avons comparé nos résultats avec des rapports précédents. Notre protocole d’ECG a détecté des fréquences cardiaques accrues et des intervalles de QTc sur le traitement avec l’atropine, les fréquences cardiaques diminuées et les intervalles de QTc après traitement de carbachol, et des fréquences cardiaques plus élevées et des intervalles de QTc avec l’isoprenaline mais n’ont noté aucun changement dans les paramètres d’ECG sur l’administration du propranolol. Ces résultats sont étayés par des rapports précédents, confirmant la fiabilité de ce protocole ECG. Ainsi, cette méthode peut être utilisée comme une approche de dépistage pour effectuer des mesures ECG qui autrement ne seraient pas tentées en raison de coûts élevés et de difficultés techniques.
Introduction
L’électrocardiogramme (ECG), un test qui mesure l’activité électrique de son rythme cardiaque, est un outil précieux pour évaluer le système de conduction cardiaque. Les paramètres qui sont mesurés par un ECG incluent la fréquence cardiaque, l’intervalle de PR, la durée de QRS, et l’intervalle de QT. En bref, l’intervalle de PR correspond au temps qui est nécessaire pour une impulsion électrique de voyager du nœud atrial de sinus par le noeud atrioventriculaire aux fibres de Purkinje ; La durée de QRS est le temps pour la dépolarisation ventriculaire de se produire par le système de Purkinje et le myocardium ventriculaire ; et l’intervalle QT est la durée de la repolarisation ventriculaire.
Les enregistrements d’ECG chez la souris ont aidé les chercheurs à examiner la fonction cardiaque et à déterminer les mécanismes physiologiques et pathophysiologiques des phénotypes cardiaques, tels que l’arythmie, la fibrillation auriculaire et l’insuffisance cardiaque. La plupart des recherches cardiovasculaires ont impliqué des études sur des modèles de souris génétiquement modifiés. Il est souvent difficile d’obtenir des données significatives sur les enregistrements ECG de petites souris qui ont été génétiquement manipulées.
Il existe plusieurs méthodes pour effectuer des ECG chez les souris1. Des études suggèrent que les enregistrements d’ECG chez les animaux conscients sont préférés aux animaux anesthésiés lorsque c’est possible puisque les effets de l’anesthésie sur la fonction cardiaque ont été bien établis2. Deux protocoles qui enregistrent ECG chez les souris conscientes sont de la note1. Le système de radiotélémétrie ECG est l’étalon-or pour la surveillance continue à long terme de l’ECG chez les souris conscientes1,3. Malgré leur force à être enregistrées dans un état conscient, les mesures ECG couplées à la radiotélémétrie ont plusieurs limites, y compris les dépenses élevées pour la configuration et pour l’implant, son exigence d’un opérateur très expérimenté, une période de stabilisation de plus d’une semaine, son besoin de grandes souris (> 20 g), et l’acquisition d’une seule avance de l’enregistrement ECG1. Un autre système qui utilise des électrodes conductrices de la taille d’une patte intégrées dans une plate-forme permet aux enregistrements ECG chez des souris conscientes sans anesthésie ou implants1,4. Ce système non invasif est une méthode alternative dans les situations où les systèmes de radiotélémétrie ne sont pas disponibles car il a de nombreux avantages: pas besoin de traitement chirurgical, pas besoin d’anesthésie, faible coût par souris (seule la configuration initiale est coûteuse), peu de temps pour la mesure, et l’abordabilité des nouveau-nés1,4. Le principal inconvénient de ce système est qu’il n’est pas adapté à une surveillance continue à long terme1.
Ici, nous introduisons une autre méthode d’enregistrement ECG peu coûteuse, simple et rapide chez les souris anesthésiées et démontrons sa validité et sa sensibilité en effectuant un ECG après le blocus autonome/stimulation du système de conduction cardiaque. Nous suggérons cette méthode ECG pour le dépistage des effets des agents pharmacologiques, des modifications génétiques, et des modèles de maladie chez les souris.
Protocol
Representative Results
Discussion
Il y a plusieurs étapes critiques dans le protocole. L’environnement environnant doit être exempt de bruit et de vibrations. Les électrodes ECG doivent être insérées sous la peau de façon stable et cohérente dont l’étape d’insertion nécessite des expériences préliminaires jusqu’à ce que le chercheur soit techniquement expérimenté. En outre, l’anesthésique doit être préparé et stocké de façon appropriée et utilisé à la dose appropriée. Enfin, les ondes PQRS doivent être situées de faç…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ces travaux ont été soutenus par les Programmes de recherche en sciences fondamentales gérés par la National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 et 2018R1D1A1B07042484).
Materials
| 2,2,2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anesthetics, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c mice, male, aged 7-9 weeks | |
| Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | parasympathetic antagonist |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australia | ML132 | bio amplifier |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | parasympathetic agonist |
| Electrodes with acupuncture needles | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0.20 x 15 mm |
| Isoprenaline | Sigma-Aldrich | I2760 | sympathetic agonist |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data analysis software | |
| Mouse food | LabDiet, St. Louis, MO, USA | 5L79 | Mouse diet |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data acquisition system | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | sympathetic antagonist |
| SPSS Statistics program | SPSS | SPSS 25.0 | statistics program |
Referências
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