लीड II का उपयोग करके एनेस्थेटाइज्ड चूहों में इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम रिकॉर्डिंग
Summary
हम एक ईसीजी प्रोटोकॉल पेश करते हैं जो तकनीकी रूप से आसान, सस्ती, तेज और छोटे चूहों में सस्ती है, और बढ़ी हुई संवेदनशीलता के साथ किया जा सकता है। हम इस विधि को चूहों में औषधीय एजेंटों, आनुवंशिक संशोधनों और रोग मॉडलों का अध्ययन करने के लिए स्क्रीनिंग दृष्टिकोण के रूप में सुझाते हैं।
Abstract
इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम कार्डियक कंडक्शन सिस्टम के मूल्यांकन के लिए एक मूल्यवान उपकरण है। पशु अनुसंधान ने इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम के बारे में उपन्यास आनुवंशिक और औषधीय जानकारी उत्पन्न करने में मदद की है। हालांकि, वीवो में छोटे जानवरों में इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम माप बनाना, जैसे चूहों, चुनौतीपूर्ण रहा है। इस उद्देश्य के लिए, हमने कई फायदों के साथ एनेस्थेटाइज्ड चूहों में इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम रिकॉर्डिंग विधि का उपयोग किया: यह तकनीकी रूप से सरल प्रक्रिया है, सस्ती है, कम मापने का समय है, और यहां तक कि युवा चूहों में भी सस्ती है। संज्ञाहरण का उपयोग करने के साथ सीमाओं के बावजूद, नियंत्रण और प्रयोगात्मक समूहों के बीच तुलना बढ़ी हुई संवेदनशीलता के साथ किया जा सकता है। हमने इस प्रोटोकॉल की वैधता निर्धारित करने के लिए स्वायत्त तंत्रिका तंत्र के बहुत सारे और विरोधी के साथ चूहों का इलाज किया और पिछली रिपोर्टों के साथ हमारे परिणामों की तुलना की। हमारे ईसीजी प्रोटोकॉल ने एट्रोपाइन के साथ उपचार पर बढ़ी हुई हृदय दरों और क्यूटीसी अंतरालों का पता लगाया, कार्बाचोल उपचार के बाद हृदय दरों और QTc अंतरालों में कमी आई, और आइसोप्रेनलाइन के साथ उच्च हृदय दर और क्यूटीसी अंतराल लेकिन प्रोप्रोनॉल के प्रशासन पर ईसीजी मापदंडों में किसी भी परिवर्तन पर ध्यान नहीं दिया। इन परिणामों को पिछली रिपोर्टों द्वारा समर्थित किया जाता है, जो इस ईसीजी प्रोटोकॉल की विश्वसनीयता की पुष्टि करते हैं। इस प्रकार, इस विधि का उपयोग ईसीजी माप बनाने के लिए स्क्रीनिंग दृष्टिकोण के रूप में किया जा सकता है जो अन्यथा उच्च लागत और तकनीकी कठिनाइयों के कारण प्रयास नहीं किया जाएगा।
Introduction
इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी), एक परीक्षण है कि एक दिल की धड़कन की बिजली की गतिविधि के उपाय, हृदय चालन प्रणाली के मूल्यांकन के लिए एक मूल्यवान उपकरण है । ईसीजी द्वारा मापे जाने वाले मापदंडों में हृदय गति, पीआर अंतराल, क्यूआरएस अवधि और क्यूटी अंतराल शामिल हैं। संक्षेप में, पीआर अंतराल उस समय से मेल खाता है जो एट्रियल साइनस नोड से एट्रिओवेंट्रिकुलर नोड से पुरकिंजे फाइबर तक यात्रा करने के लिए आवश्यक है; क्यूआरएस अवधि पुरकिंजे प्रणाली और वेंट्रिकुलर मायोकार्डियम के माध्यम से होने के लिए वेंट्रिकुलर डीपोलराइजेशन का समय है; और क्यूटी अंतराल वेंट्रिकुलर पुनर्ध्रुवीकरण की अवधि है।
चूहों में ईसीजी रिकॉर्डिंग ने शोधकर्ताओं को हृदय कार्य की जांच करने और हृदय फेनोटाइप के शारीरिक और रोगविज्ञानी तंत्रों का निर्धारण करने में मदद की है, जैसे अतालता, अलिंद फिब्रिलेशन, और दिल की विफलता। अधिकांश हृदय अनुसंधान आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल में अध्ययन शामिल किया गया है । यह अक्सर छोटे चूहों कि आनुवंशिक रूप से हेरफेर किया गया है से ईसीजी रिकॉर्डिंग पर सार्थक डेटा प्राप्त करने के लिए चुनौतीपूर्ण है ।
चूहों में ईसीजी प्रदर्शन के लिए कई तरीके हैं1. अध्ययनों से पता चलता है कि जब संभव हो तो अनुचेतन जानवरों में ईसीजी रिकॉर्डिंग को एनेस्थेटाइज्ड जानवरों पर पसंद किया जाता है क्योंकि कार्डियक फंक्शन पर संज्ञाहरण का प्रभाव अच्छी तरह सेस्थापितकिया गया है । दो प्रोटोकॉल जो चेतन चूहों में ईसीजी रिकॉर्ड करते हैं , वे नोट1के हैं । ईसीजी रेडियोटेलीमेट्री प्रणाली होश में चूहों में ईसीजी की सतत दीर्घकालिक निगरानी के लिए सोने का मानक है1,3. एक सचेत राज्य में दर्ज किया जा रहा में उनकी ताकत के बावजूद, रेडियोटेलीमेट्री युग्मित ईसीजी माप सेटअप के लिए उच्च खर्च और प्रत्यारोपण के लिए, एक उच्च अनुभवी ऑपरेटर की अपनी आवश्यकता, 1 सप्ताह से अधिक की स्थिरीकरण अवधि, बड़े चूहों के लिए अपनी आवश्यकता (> 20 ग्राम), और ईसीजी1के केवल एक ही नेतृत्व के अधिग्रहण सहित कई सीमाएं हैं । एक अन्य प्रणाली जो एक मंच में एम्बेडेड पंजा आकार के प्रवाहकीय इलेक्ट्रोड का उपयोग करती है, बिना संज्ञाहरण या प्रत्यारोपण के सचेत चूहों में ईसीजी रिकॉर्डिंग की अनुमति देती है1,,4। यह गैर-इनवेसिव प्रणाली उन स्थितियों में एक वैकल्पिक विधि है जिसमें रेडियोटेलीमेट्री सिस्टम अनुपलब्ध हैं क्योंकि इसके कई फायदे हैं: सर्जिकल उपचार की कोई आवश्यकता नहीं, संज्ञाहरण की कोई आवश्यकता नहीं, प्रति माउस कम लागत (केवल प्रारंभिक सेटअप महंगा है), माप के लिए कम समय, और नवजात शिशुओं की सामर्थ्य1,,4। इस प्रणाली का मुख्य नुकसान यह है कि यह सतत दीर्घकालिक निगरानी के लिए अनुकूल नहीं है1.
यहां हम एनेस्थेटाइज्ड चूहों में एक और सस्ती, सरल और तेजी से ईसीजी रिकॉर्डिंग विधि पेश करते हैं और स्वायत्त नाकाबंदी/हृदय चालन प्रणाली की उत्तेजना के बाद ईसीजी करके इसकी वैधता और संवेदनशीलता प्रदर्शित करते हैं। हम चूहों में औषधीय एजेंटों, आनुवंशिक संशोधनों और रोग मॉडलों के प्रभावों की स्क्रीनिंग के लिए इस ईसीजी विधि का सुझाव देते हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रोटोकॉल में कई महत्वपूर्ण कदम हैं। आसपास का वातावरण शोर और कंपन से मुक्त होना चाहिए। ईसीजी इलेक्ट्रोड त्वचा के नीचे स्थिर और लगातार जिनमें से प्रविष्टि कदम प्रारंभिक प्रयोगों की आवश्यकता है जब तक ?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को बेसिक साइंस रिसर्च प्रोग्राम्स द्वारा समर्थित किया गया था जो नेशनल रिसर्च फाउंडेशन ऑफ कोरिया (एनआरएफ) (2015R1C1A2A01052419 और 2018R1D1A1B07042484) द्वारा प्रबंधित किए जाते हैं ।
Materials
| 2,2,2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anesthetics, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c mice, male, aged 7-9 weeks | |
| Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | parasympathetic antagonist |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australia | ML132 | bio amplifier |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | parasympathetic agonist |
| Electrodes with acupuncture needles | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0.20 x 15 mm |
| Isoprenaline | Sigma-Aldrich | I2760 | sympathetic agonist |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data analysis software | |
| Mouse food | LabDiet, St. Louis, MO, USA | 5L79 | Mouse diet |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data acquisition system | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | sympathetic antagonist |
| SPSS Statistics program | SPSS | SPSS 25.0 | statistics program |
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