Gravações de eletrocardiograma em camundongos anestesiados usando chumbo II

Summary

Apresentamos um protocolo ECG que é tecnicamente fácil, barato, rápido e acessível em ratos pequenos, e pode ser realizado com maior sensibilidade. Sugerimos este método como uma abordagem de triagem para estudar agentes farmacológicos, modificações genéticas e modelos de doenças em camundongos.

Abstract

O eletrocardiograma é uma ferramenta valiosa para avaliar o sistema de condução cardíaca. A pesquisa em animais ajudou a gerar novas informações genéticas e farmacológicas sobre o eletrocardiograma. No entanto, fazer medições de eletrocardiograma em pequenos animais in vivo, como ratos, tem sido um desafio. Para isso, utilizamos um método de gravação de eletrocardiograma em camundongos anestesiados com muitas vantagens: é um procedimento tecnicamente simples, é barato, tem pouco tempo de medição, e é acessível, mesmo em camundongos jovens. Apesar das limitações com o uso da anestesia, comparações entre controle e grupos experimentais podem ser realizadas com maior sensibilidade. Tratamos camundongos com agonistas e antagonistas do sistema nervoso autônomo para determinar a validade deste protocolo e comparamos nossos resultados com relatórios anteriores. Nosso protocolo ECG detectou aumento das frequências cardíacas e intervalos QTc no tratamento com atropina, diminuição das frequências cardíacas e intervalos QTc após o tratamento de carbachol, e maiores frequências cardíacas e intervalos QTc com isoprenalina, mas não notou qualquer alteração nos parâmetros do ECG na administração do propranolol. Esses resultados são suportados por relatórios anteriores, confirmando a confiabilidade deste protocolo ECG. Assim, este método pode ser utilizado como uma abordagem de triagem para fazer medições de ECG que de outra forma não seriam tentadas devido ao alto custo e dificuldades técnicas.

Introduction

O eletrocardiograma (ECG), um teste que mede a atividade elétrica dos batimentos cardíacos, é uma ferramenta valiosa para avaliar o sistema de condução cardíaca. Os parâmetros medidos por um ECG incluem frequência cardíaca, intervalo de RP, duração de QRS e intervalo QT. Em suma, o intervalo de RP corresponde ao tempo necessário para um impulso elétrico viajar do nó sinusino atrial através do nó atrioventricular às fibras purkinje; A duração do QRS é o tempo para que a despolarização ventricular ocorra através do sistema Purkinje e do miocárdio ventricular; e o intervalo QT é a duração da repolarização ventricular.

As gravações de ECG em ca....

Protocol

Todos os procedimentos animais foram aprovados pelo comitê local de Cuidados e Uso de Animais de Laboratório, Universidade Kyung Hee (número de licença: KHUASP(SE)-18-108) e conformes ao Guia Nacional de Saúde dos EUA para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório.

1. Animais experimentais

1. Mantenha todos os camundongos (39 camundongos, Balb/c, macho, 7\u20129 semanas de idade) em uma instalação livre de patógenos, conforme o guia para o cuidado e uso de animais de laboratório.
2. Mantenha os ratos em um ciclo claro/escuro de 12 horas em temperatura constante com livre acesso a alimentos e água.

Results

Experimentos farmacológicos

Para determinar se nossa medição não invasiva do ECG reflete a influência da modulação autônoma no sistema de condução cardíaca, os camundongos Balb/c normais foram desafiados com agonistas e antagonistas do sistema nervoso autônomo (ANS). Atropina e carbachol foram utilizados para efetuar bloqueio e estimulação autônoma parassimpáticos, respectivamente, enquanto propranolol e isoprenalina foram administrados para provocar bloqueio e estimulação aut.......

Discussion

Há várias etapas críticas no protocolo. O ambiente circundante deve estar livre de ruído e vibração. Os eletrodos ECG devem ser inseridos sob a pele de forma estável e consistente, dos quais a etapa de inserção requer experimentos preliminares até que o pesquisador seja tecnicamente experiente. Além disso, o anestésico deve ser preparado e armazenado adequadamente e usado na dose adequada. Finalmente, as ondas PQRS devem ser localizadas adequadamente em batidas individuais de ECG na janela Exibição média.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
2,2,2-tribromoetanol	Anestésicos	Sigma-Aldrich	T48402-25G
Animal	Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japão		Camundongos Balb/c, machos, com idade entre 7 e 9 semanas
Atropina	Sigma-Aldrich	A0123	antagonista parassimpático
BioAmp	AD Instruments, Bella Vista, Austrália	ML132	bio amplificador
Carbachol	Sigma-Aldrich	C4382	agonista parassimpático
Eletrodos com agulhas de acupuntura	DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Coréia	DB106	0,20 x 15 mm
Isoprenalina	Sigma-Aldrich	I2760	agonista simpático
LabChart 8	AD Instruments, Bella Vista, Austrália		software de análise de dados
Mouse food	LabDiet, St. Louis, MO, EUA	5L79	Dieta do rato
PowerLab 2/28	AD Instruments, Bella Vista, Austrália		sistema de aquisição de dados
Propranolol	Sigma-Aldrich	P0884	antagonista simpático
SPSS Programa de estatísticas SPSS