Summary

Effets écotoxicologiques des microplastiques sur le développement des embryons d’oiseaux par éclosion sans coquille d’œuf

Published: August 14, 2021
doi:

Summary

Cet article présente une méthode d’éclosion sans utiliser de coquille d’œuf pour les études toxicologiques des polluants particulaires tels que les microplastiques.

Abstract

Les microplastiques sont un type de polluant mondial émergent qui représente une grande menace pour la santé des animaux en raison de leur absorption et de leur translocation dans les tissus et organes animaux. Les effets écotoxicologiques des microplastiques sur le développement des embryons d’oiseaux ne sont pas connus. L’œuf d’oiseau est un système complet de développement et de nutrition, et tout le développement de l’embryon se produit dans la coquille de l’œuf. Par conséquent, un enregistrement direct du développement d’embryons d’oiseaux sous le stress de polluants tels que les microplastiques est fortement limité par la coquille d’œuf opaque dans l’éclosion traditionnelle. Dans cette étude, les effets des microplastiques sur le développement des embryons de caille ont été surveillés visuellement par éclosion sans coquille d’œuf. Les principales étapes comprennent le nettoyage et la désinfection des œufs fécondés, l’incubation avant l’exposition, l’incubation à court terme après l’exposition et l’extraction de l’échantillon. Les résultats montrent que par rapport au groupe témoin, le poids humide et la longueur du corps du groupe exposé aux microplastiques présentaient une différence statistique et la proportion hépatique de l’ensemble du groupe exposé augmentait considérablement. De plus, nous avons évalué les facteurs externes qui affectent l’incubation : température, humidité, angle de rotation des œufs et autres conditions. Cette méthode expérimentale fournit des informations précieuses sur l’écotoxicologie des microplastiques et une nouvelle façon d’étudier les effets nocifs des polluants sur le développement des embryons.

Introduction

La production de déchets plastiques était d’environ 6300 Mt en 2015, dont un dixième a été recyclé, et le reste a été brûlé ou enterré sous terre. On estime qu’environ 12 000 Mt de déchets plastiques seraient enfouis sous terre d’ici 20501. Avec l’attention de la communauté internationale sur les déchets plastiques, Thompson a proposé pour la première fois le concept de microplastiques en 20042. Les microplastiques (MPs) désignent les plastiques à petites particules d’un diamètre de particules inférieur à 5 mm. À l’heure actuelle, les chercheurs ont détecté la présence omniprésente de députés sur le littoral de divers continents, les îles de l’Atlantique, les lacs intérieurs, l’Arctique et les habitats des grands fonds3,4,5,6,7. Par conséquent, de plus en plus de chercheurs ont commencé à étudier les dangers environnementaux des députés.

Des organismes pourraient ingérer des députés dans l’environnement. Des MPs ont été trouvés dans le tube digestif de 233 organismes marins dans le monde entier (y compris 100% d’espèces de tortues, 36% d’espèces de phoques, 59% d’espèces de baleines, 59% d’espèces d’oiseaux de mer, 92 types de poissons de mer et 6 types d’invertébrés)8. De plus, les députés peuvent bloquer le système digestif des organismes, s’accumuler et migrer dans leurs bobies9. Il a été constaté que les députés peuvent être transférés via la chaîne alimentaire et que leur apport diffère en termes de changements dans l’habitat, le stade de croissance, les habitudes alimentaires et les sources de nourriture10. Certains chercheurs ont signalé l’existence de députés dans les excréments d’oiseaux de mer11, ce qui signifie que les oiseaux de mer agissent comme porteurs de députés. De plus, l’ingestion de MPs peut affecter la santé de certains organismes. Par exemple, les députés peuvent être empêtrés dans le tractus gastro-intestinal, augmentant ainsi la mortalité des cétacés12.

Les parlementaires à eux seuls ont des effets toxiques sur les organismes ainsi que des effets toxiques conjoints sur les organismes ayant d’autres polluants. L’ingestion de concentrations de débris plastiques dans l’environnement peut perturber le fonctionnement du système endocrinien des poissons adultes13. La taille des microplastiques est l’un des facteurs importants qui affectent leur absorption et leur accumulation par les organismes14,15. Les plastiques de petite taille, en particulier les plastiques de taille nanométrique, sont sujets à l’interaction avec des cellules et des organismes à haute toxicité16,17,18,19. Bien que les effets nocifs des microplastiques de taille nanoparticulale sur les organismes dépassent le niveau de recherche actuel, la détection et la quantification des microplastiques de taille inférieure à plusieurs micromètres, en particulier les submicron/nanoplastiques dans l’environnement, reste un grand défi. En outre, les nanoplastiques ont également des effets sur les embryons. Le polystyrène peut nuire au développement des embryons d’oursins en régulant les profils protéiques etgénétiques 20.

Afin d’explorer l’impact potentiel des députés sur les organismes, nous avons mené cette étude. En raison de la similitude entre les embryons d’oiseaux et les embryons humains, ils sont généralement utilisés dans la recherche en biologie du développement21, y compris l’angiogenèse et l’antiangiogenèse, l’ingénierie tissulaire, l’implant de biomatériaux et les tumeurs cérébrales22,23,24. Les embryons d’oiseaux ont les avantages d’un faible coût, d’un cycle de culture court et d’une utilisation facile25,26. Par conséquent, nous avons choisi des embryons de caille avec un cycle de croissance court comme animal expérimental dans cette étude. Simultanément, nous pouvons observer directement les changements morphologiques des embryons de cailles exposés aux députés au cours de la phase de développement embryonnaire à l’aide d’une technologie d’éclosion sans coquille d’œuf. Les matériaux expérimentaux utilisés étaient le polypropylène (PP) et le polystyrène (PS). Étant donné que le PP et le PS27 représentent la plus grande proportion des types de polymères obtenus dans les sédiments et les plans d’eau dans le monde entier, les types de polymères les plus courants extraits des organismes marins capturés sont l’éthylène et le propylène28. Ce protocole expérimental décrit l’ensemble du processus d’évaluation visuelle des effets toxicologiques des MPs sur les embryons de caille exposés aux MPs. Nous pouvons facilement étendre cette méthode pour examiner la toxicité d’autres polluants pour le développement embryonnaire d’autres animaux ovipares.

Protocol

1. Préparation avant l’exposition Sélectionnez des œufs de caille fécondés nés le même jour pour l’essai d’exposition. Sélectionnez des œufs de caille avec des poids similaires. Chaque œuf de caille fécondé est d’environ 10-12 g. Nettoyez complètement tous les œufs de caille fertilisés des matières fécales externes et d’autres débris. Stérilisez chaque œuf de caille fécondé pré-éclos et les œufs à utiliser (Choisissez des œufs de forme de coquil…

Representative Results

Pour l’analyse des données expérimentales, nous avons comparé le poids humide, la longueur du corps, la longueur du sternum et le changement de l’indice hépatosomatique entre le groupe témoin et les 6 groupes expérimentaux, mesurant et reflétant la croissance et le développement des embryons de caille d’un point de vue macro. Nous avons détecté six embryons normaux de caille dans chaque groupe. Chaque embryon a atteint le stade requis de Hamburger et Hamilton (HH). Dans <strong…

Discussion

Cet article fournit un schéma expérimental efficace pour évaluer le développement de l’embryon de caille en détectant les indices de développement de base. Cependant, il y a encore quelques limites à cette expérience.

Tout d’abord, la mortalité des embryons de cailles au stade avancé de l’éclosion est plus élevée en raison de l’éclosion sans coquille. Il existe des facteurs artificiellement incontrôlables tels que la destruction du rapport protéique normal dans le proc…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ce travail a été soutenu par des projets clés de recherche et développement dans la région autonome ouïgour du Xinjiang (2017B03014, 2017B03014-1, 2017B03014-2, 2017B03014-3).

Materials

 Multi sample tissue grinder Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd. Tissuelyser-24 Grind large-sized plastics into small-sized ones at low temperature
Electronic balance OHAUS corporation PR Series Precision Used for weighing
Fertilized quail eggs Guangzhou Cangmu Agricultural Development Co., Ltd. Quail eggs for hatching without shell
Fluorescent polypropylene particles Foshan Juliang Optical Material Co., Ltd. Types of plastics selected for the experiment
Incubator Shandong, Bangda Incubation Equipment Co., Ltd. 264 pc Provide a place for embryo growth and development
Nanometer-scale polystyrene microspheres Xi’an Ruixi Biological Technology Co., Ltd. 100 nm, 200 nm, 500 nm Types of plastics selected for the experiment
Steel ruler Deli Group 20 cm Used to measure  length
Vertical heating pressure steam sterilizer Shanghai Shenan Medical Instrument Factory LDZM-80KCS-II Sterilize the experimental articles

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Wang, L., Xue, N., Li, W., Wufuer, R., Zhang, D. Ecotoxicological Effects of Microplastics on Bird Embryo Development by Hatching without Eggshell. J. Vis. Exp. (174), e61696, doi:10.3791/61696 (2021).

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