Acupuntura em um modelo de rato de asma

Summary

Uma plataforma alta pode corrigir ratos sem restrições e expor completamente os pontos de acupoint na parte de trás durante a manipulação da acupuntura. Este artigo descreve métodos para a fabricação da alta plataforma, estabelece um modelo de asma de ratos e mede mudanças na função respiratória usando um sistema de plethysmografia não invasiva e em tempo real do corpo inteiro (WBP).

Abstract

Uma plataforma alta pode corrigir ratos sem restrições e expor completamente os pontos de acupoint na parte de trás durante a manipulação da acupuntura. Este artigo descreve métodos para a fabricação da alta plataforma, estabelece um modelo de asma de ratos e mede mudanças na função respiratória usando um sistema de plethysmografia não invasiva e em tempo real do corpo inteiro (WBP).

Introduction

A asma é uma doença crônica caracterizada pela broncoconstrição e hiper-responsividade das vias aéreas¹. Aproximadamente 339,4 milhões de pessoas em todo o mundo são diagnosticadas com asma². A prevalência de asma está aumentando globalmente, com 100 milhões de novos casos esperados para a próxima década³. Corticosteroides inalados e β₂-agonistas de longa duração não controlam efetivamente os sintomas de todos os pacientes⁴. Portanto, o uso de terapias alternativas como a acupuntura para tratar a asma vem recebendo maior atenção⁵. Um método eficaz para o tratamento da asma é agulha GV14 (Dazhui), BL12 bilateral (Fengmen) e bilateral BL13 (Feishu)⁶. A acupuntura reduz significativamente os níveis de imunoglobulina secreta A (SIgA) na saliva e secreções nasais de pacientes com asma alérgica e reduz a contagem de eosinófilos sanguíneos periféricos com uma taxa efetiva total de 85%⁶. A acupuntura em BL13 e ST36 (Zusanli) em camundongos com asma crônica diminui o nível de IL-17 em 40% e diminui a espessura muscular lisa em 33% em comparação com a do grupo ovalbumina (OVA) e, assim, alivia os sintomas de inflamação^7,8. No entanto, o mecanismo do tratamento da acupuntura para asma não é completamente claro.

Os modelos animais são uma importante ferramenta para a pesquisa da asma⁹ porque o modelo animal pode ser utilizado para a medição contínua da função respiratória para avaliar a eficácia do tratamento da asma¹⁰. Enquanto isso, estudos da fisiopatologia da asma requerem amostras de teste, incluindo amostras da traqueia, pulmão e lavagem broncoalveolar para verificar alterações nos níveis dos fatores-chave¹¹. Modelos de asma de ratos são comumente usados para avaliar a fisiopatologia da asma porque produzem respostas de longo prazo das vias aéreas e mostram respostas imediatas e tardias das vias aéreas¹². No entanto, devido à estimulação experimental repetida, os ratos muitas vezes se tornam irritáveis. Portanto, é necessário um método adequado para fixar ratos. Os métodos comumente utilizados para fixação de ratos incluem anestesia e vinculação¹³. Embora o método de anestesia proporcione melhor exposição dos acupoints, pode afetar a condução nervosa e, em última instância, afetar os resultados experimentais¹⁴. O método de ligação não induz os mesmos efeitos fisiológicos que a anestesia, mas ratos contidos experimentarão tensão muscular esquelética. Além disso, a agulha não pode alcançar facilmente a posição designada¹⁵. Aqui, introduzimos uma plataforma alta que pode ser usada para corrigir ratos sem restringi-los e expor totalmente os acupoints na parte de trás. Os ratos podem ser colocados na plataforma alta durante a administração da acupuntura. A plataforma alta é capaz de acomodar o rato apenas enquanto ele está de pé, e como ele é colocado a uma certa distância do chão, os ratos não se moverão por causa do medo das alturas¹⁶.

Este artigo descreve detalhadamente a fabricação da alta plataforma, o estabelecimento de um modelo de rato de asma, o funcionamento da necessidade de um rato na plataforma alta e a medição da função respiratória utilizando um sistema de plethysmografia do corpo inteiro (WBP).

Protocol

Todos os experimentos em animais foram revisados e aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentos Animais da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Xangai (Número de liberação ética PZSHUTCM190308020). 1. Fabricação da alta plataforma Defina o comprimento e a largura do dispositivo de suporte para 86 cm x 17 cm(Figura 1). Corrija o dispositivo de conexão verticalmente ao dispositivo de suport…

Representative Results

Com acupuntura no GV14, bl12 bilateral e pontos bl13 bilaterais, o rato mantém uma posição propensa. O rato pode torcer a cabeça apenas para o lado de fora e não para dentro porque uma direção está bloqueada com uma tábua de madeira(Figura 5). À medida que a concentração de metanfetamina aumenta, Penh mostra uma tendência crescente e a taxa de crescimento aumenta gradualmente. Nas concentrações de 3.125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL e 50 m…

Discussion

Os acupontos GV14, bilateral BL12 e bilateral BL13 utilizados neste estudo estão localizados na parte de trás, e, portanto, a plataforma alta é adequada para fixação de ratos. Em outros estudos, deve ser selecionado um método de fixação adequado de acordo com a posição dos acupoints¹⁵. Para acupoints no abdômen, o rato pode ser colocado para baixo em um cone preto (semelhante a um saco de massa usado pelos padeiros)¹⁷. Uma corrente é presa ao cone de contenção…

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle	China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3	American Thermo	77161
Compression nebulizer	Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd.	NB-212C
Fine Pointe V2.0	American Buxco
Laboratory gas drying unit	American Drierite	26800
Methacholine	American Sigma	MKCF6054
Ovalbumin	American Sigma	A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x)	Gelifesciences	SH30256.01
Seal box	IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system	American Buxco