마우스에서 전신 지질 처리 용량 평가
Summary
이 논문은 마우스의 지질 대사를 평가하기 위한 3가지 쉽고 접근 가능한 에세이를 제공합니다.
Abstract
지질 대사를 평가하는 것은 신진 대사 기능을 평가하는 초석이며 생체 대사 연구에 필수적인 것으로 간주됩니다. 지질은 그들의 합성 및 신진 대사에 관련 된 많은 경로와 많은 다른 분자의 클래스. 영양 및 비만 연구를 위한 지질 hemostasis를 평가하기 위한 출발점이 필요합니다. 이 논문은 마스터하기 위하여 작은 전문 지식 또는 사례를 필요로 하는 3개의 쉽고 접근가능한 방법을 설명하고, 마우스에 있는 지질 대사 이상을 위해 검열하기 위하여 대부분의 실험실에 의해 적응될 수 있습니다. 이들 방법은 (1) 구강 내립내성 검사를 통해 식이 지질 처리 기능을 위한 상용 키트(2)를 이용한 여러 금식 혈청 지질 분자를 측정하고, (3) 약제화합물인 CL 316,243, 마우스에 대한 반응을 평가한다. 함께, 이러한 방법은 마우스에서 지질 처리 기능의 높은 수준의 개요를 제공 할 것입니다.
Introduction
탄수화물과 지질은 에너지 대사를 위한 두 가지 주요 기판입니다. 비정상적인 지질 대사는 타입 II 당뇨병, 심혈관 질환, 지방 간 질환 및 암을 포함한 많은 인간 질환을 초래합니다. 식이 지질, 주로 트리 글리세라이드, 림프계로 내장을 통해 흡수 하 고 심장 근처 chylomicrons에서 정맥 순환을 입력1. 지질은 혈류량의 지단백 입자에 의해 운반되며, 지방산 모이드는 근육 및 지방 조직2와같은 말초 기관에서 지단류 의 작용에 의해 해방된다. 나머지 콜레스테롤이 풍부한 잔재 입자는 간3에의해 지워집니다. 마우스는 지질 대사를 연구하기 위한 연구 모델로 실험실에서 널리 사용되어 왔습니다. 포괄적인 유전 도구 세트를 사용할 수 있고 상대적으로 짧은 번식 주기를 통해 지질이 어떻게 흡수되고 합성되고 대사되는지 연구할 수 있는 강력한 모델입니다.
지질 대사의 복잡성으로 인해, 정교한 지질학 연구 또는 동위원소 추적기 연구는 일반적으로 지질 종 또는 지질 관련 대사 플럭스와운명4,5의수집을 정량화하는 데 사용된다. 이것은 전문 장비 나 전문 지식이없는 연구자에게 엄청난 도전을 만듭니다. 이 논문에서는 기술적으로 도전적인 기술이 사용되기 전에 초기 테스트역할을 할 수 있는 세 가지 논문을 제시합니다. 그(것)들은 마우스를 위한 비 단말 절차이고, 따라서 지질 취급 용량에 있는 잠재적인 다름을 확인하고 영향을 받은 프로세스를 좁히는 데 아주 유용합니다.
첫째, 금식 혈청 지질 분자를 측정하는 것은 마우스의 전반적인 지질 프로파일을 확인하는 데 도움이 될 수 있습니다. 마우스는 식사 후 많은 지질 종상승하기 때문에 금식해야하며, 증가 정도는 식단의 조성에 의해 강하게 영향을 받습니다. 총 콜레스테롤, 트리글리세라이드 및 비에스테르화 지방산(NEFA)을 포함한 많은 지질 분자는 흡광도를 읽을 수 있는 상용 키트 및 플레이트 판독기를 사용하여 측정할 수 있습니다.
둘째, 구강 내성 내성 검사는 흡수와 신진 대사의 순 효과로서 지질 처리 능력을 평가합니다. 구두로 투여된 내tralipid는 순환 트리글리세라이드 수준(1-2시간)에 스파이크를 일으키고, 그 후 혈청 트리글리세라이드 수준이 기저 수준(4-6시간)으로 돌아갑니다. 이 분석법은 마우스가 외인성 지질을 얼마나 잘 처리할 수 있는지에 대한 정보를 제공합니다. 심장, 간 및 갈색 지방 조직은 트리글리세라이드의 활성 소비자이며, 흰색 지방 조직은 이를 에너지 매장량으로 저장합니다. 이러한 함수의 변경은 테스트 결과의 차이로 이어질 것입니다.
마지막으로, 저장된 지질을 동원하기 위해 lipolysis를 촉진하는 것은 체중 감량을위한 가능한 전략으로 간주됩니다. β3-adrenergic 수용체 신호 경로는 지방 조직에서 지방 조직에 있는 백혈구 lipolysis에 있는 중요한 역할을 하고, 인간 유전학은 비만과 상관되는 β3-adrenergic 수용체에 있는 기능다형성 Trp64Arg의 기능 상실을 확인했습니다6. CL 316,243, 특이적이고 강력한 β3-아드레너기능 수용체 작용제, 지방 조직 lipolysis 및 글리세롤의 방출을 자극한다. CL 316,243에 대한 마우스의 반응평가는 화합물의 효능의 개발, 개선 및 이해에 대한 귀중한 정보를 제공할 수 있다.
전체적으로, 이 시험은 마우스의 지질 대사 상태에 있는 변경을 위한 초기 스크린으로 이용될 수 있습니다. 그들은 악기와 시약의 접근성을 위해 선택됩니다. 이 연구에서 파생 된 결과, 연구원은 그들의 동물의 신진 대사 적합성의 전반적인 그림을 형성 하 고 더 정교 하 고 대상된 접근 에 결정 할 수 있습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
세 가지 애서에서는 몇 가지 중요한 고려 사항과 함께 실험실에서 기능을 강력하게 설명했습니다. 야간 금식은 금식 혈청 지질 수준 과 경구 내측 내성 시험을 결정하기 위해 필요합니다. 경구 내립 성 내성 검사의 경우, 특히 1 시간 및 2 시간 지점에서 지방 층의 형성을 최소화하기 위해 실온에서 혈액을 회전하는 것이 중요합니다. 형성하는 경우이 지방 층을 버리지 않는 것이 중요합니다. 상체?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 국립 보건원 (NIH), 보조금 R00-DK114498, 미국 농무부 (USDA), 보조금 CRIS에 의해 지원됩니다 : 3092-51000-062 Y. Z. Z.
Materials
| 20% Intralipid | Sigma Aldrich | I141 | |
| BD Slip Tip Sterile Syringes 1ml | Shaotong | B07F1KRMYN | |
| CL 316,243 Hydrate | Sigma-Aldrich | C5976 | |
| Curved Feeding Needles (18 Gauge) | Kent Scientific | FNC-18-2-2 | |
| Free Glycerol Reagent | Sigma Aldrich | F6428 | |
| Glycerol Standard Solution | Sigma | G7793 | |
| HR SERIES NEFA-HR(2)COLOR REAGENT A | Fujifilm Wako Diagnostics | 999-34691 | |
| HR SERIES NEFA-HR(2)COLOR REAGENT B | Fujifilm Wako Diagnostics | 991-34891 | |
| HR SERIES NEFA-HR(2)SOLVENT A | Fujifilm Wako Diagnostics | 995-34791 | |
| HR SERIES NEFA-HR(2)SOLVENT B | Fujifilm Wako Diagnostics | 993-35191 | |
| Ketamine | Vedco | 50989-161-06 | |
| Matrix Plus Chemistry Reference Kit | Verichem | 9500 | |
| Micro Centrifuge Tubes | Fisher Scientific | 14-222-168 | |
| Microhematrocrit Capillary Tube, Not Heparanized | Fisher Scientific | 22-362-574 | |
| NEFA STANDARD SOLUTION | Fujifilm Wako Diagnostics | 276-76491 | |
| Phosphate Buffered Saline | Boston Bioproducts | BM-220 | |
| Thermo Scientific Triglycerides Reagent | Fisher Scientific | TR22421 | |
| Total Cholesterol Reagents | Thermo Scientifi | TR13421 | |
| Xylazine | Henry Schein | 11695-4022-1 |
Referências
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