यहां, हम एक विशिष्ट डिजाइन वार्मिंग/निरोधक डिवाइस का उपयोग कर कृंतक पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक प्रभावी और कुशल विधि पेश करते हैं । वासोडिलेशन और निरोधक प्रक्रियाओं की शुरुआत को व्यवस्थित करके, यह प्रोटोकॉल कम से कम संकट वाले जानवरों के बड़े समूहों के सटीक और समय पर नसों के इंजेक्शन की अनुमति देता है।
कृंतक मॉडल में, पूंछ नस इंजेक्शन प्रयोगात्मक एजेंटों के नसों में प्रशासन के लिए महत्वपूर्ण तरीके हैं। पूंछ नस इंजेक्शन आम तौर पर पशु के वार्मिंग शामिल करने के लिए vasodilation को बढ़ावा देने, जो रक्त वाहिकाओं की पहचान और पोत lumen में सुई की स्थिति दोनों में एड्स जबकि सुरक्षित रूप से जानवर निरोधक । हालांकि पूंछ नस इंजेक्शन कई प्रोटोकॉल में आम प्रक्रियाएं हैं और यदि सही ढंग से प्रदर्शन किया जाता है तो अत्यधिक तकनीकी नहीं माना जाता है, सटीक और लगातार इंजेक्शन प्रजनन योग्य परिणाम प्राप्त करने और परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। पूंछ नस इंजेक्शन से पहले वासोडिलेशन को प्रेरित करने के लिए पारंपरिक तरीके आम तौर पर गर्मी के स्रोत जैसे गर्मी दीपक, इलेक्ट्रिकल/रिचार्जेबल हीट पैड, या 37 डिग्री सेल्सियस पर पूर्व-गर्म पानी के उपयोग पर निर्भर करते हैं। एक मानक प्रयोगशाला की स्थापना में आसानी से सुलभ होने के बावजूद, इन उपकरणों जाहिर है गरीब/सीमित थर्मो नियामक क्षमता से पीड़ित हैं । इसी तरह, हालांकि निरोधक उपकरणों के विभिन्न रूपों व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं, वे ध्यान से इस्तेमाल किया जाना चाहिए जानवरों के लिए आघात से बचने के लिए । वर्तमान विधियों की ये सीमाएं प्रयोगों में अनावश्यक चर बनाती हैं या परिणामस्वरूप प्रयोगों और/या प्रयोगशालाओं के बीच अलग-अलग परिणाम होते हैं ।
इस लेख में, हम एक अभिनव डिवाइस का उपयोग करके एक बेहतर प्रोटोकॉल प्रदर्शित करते हैं जो कुशल सुव्यवस्थित पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक प्रणाली में समायोज्य निरोधक इकाई के साथ एक स्वतंत्र, थर्मलली विनियमित, वार्मिंग डिवाइस को जोड़ती है। उदाहरण हम उपयोग फंगल रक्तप्रवाह संक्रमण का एक नसों में मॉडल है कि सेप्सिस में परिणाम है । वार्मिंग उपकरण एक गर्मी चिंतनशील ऐक्रेलिक बॉक्स एक समायोज्य स्वचालित थर्मोस्टेट के साथ स्थापित करने के लिए एक पूर्व निर्धारित सीमा पर आंतरिक तापमान बनाए रखने के होते हैं । इसी तरह, शंकु निरोधक तंत्र की चौड़ाई और ऊंचाई को विभिन्न कृंतक आकारों को सुरक्षित रूप से समायोजित करने के लिए समायोजित किया जा सकता है। डिवाइस की उन्नत और बहुमुखी विशेषताओं के साथ, यहां दिखाई गई तकनीक कृंतक मॉडलों को शामिल करते हुए अनुसंधान क्षेत्रों की एक श्रृंखला में एक उपयोगी उपकरण बन सकती है जो पूंछ नस इंजेक्शन को नियोजित करती है।
कृंतक से जुड़े पशु मॉडल का उपयोग जैव चिकित्सा अनुसंधान का एक प्रधान रहा है। कई inbred और outbred उपभेदों, साथ ही आनुवंशिक रूप से संशोधित लाइनों, उपलब्ध है और नियमित रूप से दुनिया भर में प्रयोगशालाओं में इस्तेमाल कर रहे हैं । पूंछ नस इंजेक्शन कृंतक मॉडल में आवश्यक तरीकों में से एक है जिसमें प्रयोगात्मक एजेंटों के नसों (i.v.) प्रशासन की आवश्यकता होती है। आम तौर पर, जीवी इंजेक्शन के प्रशासन के अन्य मार्गों जैसे स्थानीय ऊतकों और पाचन तंत्र को दरकिनार करके उच्च अवशोषण दर और सांद्रता या गैर-शारीरिकपीएच1, 2,3,4के समाधानों के लिए उच्च सहिष्णुता जैसे प्रमुख फायदे होते हैं। अन्य व्यवहार्य इव मार्गों (उदाहरण के लिए, सैफेनस नसें, रेट्रो-ऑर्बिटल वेनस साइनस), पूंछ की नसें कृंतक2,3,5,6में सबसे सुरक्षित और सबसे आसानी से सुलभ रक्त वाहिका मानी जाती हैं। इसलिए, संक्रामक रोग मॉडल 7 , 8 ,9,जैविक सामग्री का प्रत्यारोपण10,11,प्रीक्लिनिकल चिकित्सा विज्ञान 12,13और विषविज्ञान विश्लेषण14,15सहित कृंतक मॉडलों की एक सरणी में पूंछ नस इंजेक्शन को व्यापक रूप सेनियोजितकिया गया है।
स्थिरता और डोजिंग की सटीकता सफल पूंछ नस इंजेक्शन में एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है। हैरानी की बात यह है कि साहित्य में पूंछ के नस के इंजेक्शन का मात्रात्मक और गुणात्मक मूल्यांकन अक्सर गलत इंजेक्शन16,17को फंसाता है । एक अध्ययन में बताया गया है कि प्रशिक्षित इंजेक्टरों द्वारा किए गए तीस इंजेक्शनों में से बारह ने18पूंछ के भीतर इंजेक्शन की 10% से अधिक मात्रा में छोड़ दिया । इसके अलावा, प्रक्रिया के दौरान पूंछ नस इंजेक्शन प्राप्त करने वाले जानवर की सुरक्षा और आराम एक प्राथमिक चिंता का विषय होना चाहिए। अनुचित संयम चोटों और तनाव से संबंधित विकृतियों (जैसे, वजन घटाने, बिगड़ा प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं) की एक श्रृंखला है कि नमूना गुणवत्ता19,20में पर्याप्त चर शुरू कर सकता है के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । इन त्रुटियों से डेटा में परिवर्तनशीलता और खराब प्रजनन क्षमता हो सकती है, इस प्रकार अध्ययन परिणामों को नकारात्मक रूप से प्रभावित किया जा सकता है।
पोत के छोटे व्यास के कारण पूंछ नस इंजेक्शन का प्रदर्शन करते समय जानवर में संवहनी फैलाव का प्रेरण अक्सर आवश्यक होता है, चूहों में 300 माइक्रोन होने का अनुमानहै 21। वासोडिलेशन वेनस ल्यूमेन के भीतर इष्टतम सुई-नस संरेखण प्राप्त करने में पूंछ की नसों और एड्स की दृश्यता को बढ़ाता है। प्रयोगशालाओं द्वारा विभिन्न प्रकार के तरीकों की सूचना दी गई है जैसे कि पूंछ को गर्म पानी में डुबोना22,गर्म कपड़े, दीपक, या हेयर ड्रायर23, 24का उपयोग करके पूंछ पर गर्मी लगाना, या जानवर को गर्म वातावरण में रखना, एक हीटिंग पैड, इनक्यूबेटर, या बॉक्स का उपयोग करके इन गर्मी स्रोतों में से एक के साथ संयुक्त25। उपकरणों को या तो विशिष्ट उद्देश्यों के लिए स्वयं बनाया जा सकता है या वाणिज्यिक आपूर्तिकर्ताओं से उपलब्ध हो सकता है। हालांकि, कई थर्मोरेगुलेटरी क्षमताओं की कमी है और यदि कोई हो, तो डिवाइस का तापमान खराब रखा जाता है और अक्सर कमरे के तापमान में भिन्नता के अधीन होता है। इसी प्रकार, पूंछ की नस के इंजेक्शन के लिए निरोधक उपकरण का उपयोग आवश्यक है क्योंकि संज्ञाहरण के उपयोग की सिफारिश नहीं की जाती है26,27. प्रयोगशाला-विशिष्ट या वाणिज्यिक निरोधक उपकरणों के कई प्रकार विकसित किए गए हैं। आमतौर पर, जानवर को डिस्पोजेबल 50 मिलीलीटर शंकु नली4,स्लॉटेड प्लेक्सीग्लास दीवारों, एक सुरंग, या शंकु28में रखा जाता है, जिनमें से सभी जानवर के आंदोलनों को प्रतिबंधित करते हुए पूंछ के पर्याप्त जोखिम की अनुमति देते हैं। हालांकि, अधिकांश निरोधक सामग्रियों की कठोरता के कारण आकार सीमाएं होती हैं। इसके अलावा, व्यावहारिक और परिष्कृत डिजाइनों के बावजूद आधुनिक उच्च जटिलता उपकरण, जानवरों के बड़े समूहों से जुड़े इंजेक्शन के लिए व्यवहार्य प्रतीत नहीं होतेहैं 22।
रक्तधारा संक्रमण और संबद्ध सेप्सिस के माउस मॉडल इस तकनीक के उपयोग की आवश्यकता स्थितियों का एक प्रमुख उदाहरण हैं। गंभीर नैदानिक सेप्सिस के सभी माइक्रोबियल एटियोलॉजी में, फंगल सेप्सिस अक्सर एंटीफंगल थेरेपी29के बावजूद >40% की मृत्यु दर के साथ एक घातक स्थिति होती है। वास्तव में, कैंडिडा एल्बिकान द्वारा संक्रमण को अस्पताल द्वारा अधिग्रहीत रक्तप्रवाह संक्रमण (कैंडिडेमिया)30, 31का चौथा प्रमुख कारण बताया गया है। इंट्रा-पेट कैंडिडियासिस में, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट में सूक्ष्मजीव रक्त के माध्यम से प्रसारित हो सकते हैं और पॉलीमाइक्रोबियल सेप्सिस का कारण बन सकते हैं और इससे भी अधिक मृत्यु दर32,33,34। चूंकि अधिकांश नोसोकोमियल कैंडिमिया के मामले दूषित केंद्रीय रेखा कैथेटर या इंडवेलिंग मेडिकल डिवाइस35,36से निकलते हैं , यानी पूंछ के नस के इंजेक्शन से सी एल्बिकान के साथ टीका लगाने से मानव सेप्सिस विकास को बारीकी से प्रतिबिंबित किया जा सकता है और हेमेटोजेनस द्वारा प्रसारित कैंडिडियासिस 37,38के माउस मॉडल में एक मुख्य विधि रही है। इस मॉडल में, दिनों में होने वाली मृत्यु दरको सी एल्बिकान यानी40,41को समायोजित करके बढ़ाया या छोटा किया जा सकता है।
हाल ही में, हमारी प्रयोगशाला ने एक सुविधाजनक प्रणाली में एक समायोज्य निरोधक इकाई के साथ जोड़ा गया थर्मोरेथुलेटेड वार्मिंग इकाई से लैस एक अभिनव उपकरण का उपयोग करके एक इष्टतम सुव्यवस्थित पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक अभिनव प्रोटोकॉल विकसित किया है। यह प्रोटोकॉल शोधकर्ताओं को सटीक और समय पर तरीके से पूंछ नस इंजेक्शन करने की अनुमति देता है, जबकि जानवरों को न्यूनतम संकट के साथ प्रक्रिया के लिए सुरक्षित रूप से वातानुकूलित और संयमित किया जा सकता है। उन्नत वार्मिंग और निरोधक उपकरण के उपयोग के साथ यहां प्रदर्शित तकनीकें, कृंतक मॉडलों को नियोजित करने वाले विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में एक उपयोगी उपकरण के रूप में काम कर सकती हैं।
पशु मॉडल में प्रयोगात्मक विश्वसनीयता के लिए सुसंगत और सटीक डोजिंग प्रमुख आवश्यकताएं हैं। यह विशेष रूप से वीएस प्रशासन के मामलों में महत्वपूर्ण है जहां इंजेक्शन एजेंटों की प्रणालीगत जैव उपलब्धता अन्य प्रशासनमार्गोंकी तुलना में काफी अधिक/तेज है । इस प्रकार, पूंछ नस इंजेक्शन में त्रुटियों का अध्ययन परिणामों पर हानिकारक प्रभाव पड़ सकता है। ऐतिहासिक रूप से, इंट्रापेरिटोनियल (आईपी) इंजेक्शन, बजाय i.v., तकनीकी सादगी और सुविधा के कारण कृंतक में प्रणालीगत पहुंच के लिए सबसे आम तरीका रहा है। हालांकि, जानवरों से प्रीक्लिनिकल रीडआउट का नैदानिक सेटिंग्स में अनुवाद करते समय प्रशासन मार्ग अधिक महत्वपूर्ण हो जाते हैं। इसलिए, कृंतक प्रोटोकॉल में निरंतर सुधार की आवश्यकता है जो सफल पूंछ नस इंजेक्शन की सुविधा प्रदान कर सकता है।
वर्तमान प्रोटोकॉल में प्रमुख उन्नति अभिनव थर्मोरैलेयडिंग वार्मिंग डिवाइस है जो कृंतक में वासोडिलेशन के प्रभावी प्रेरण को सक्षम बनाता है, जो नाटकीय रूप से पूंछ की नसों और सुई संरेखण की दृश्यता में सुधार करता है। खराब थर्मोरेथाइन (जैसे, लैंप), सामयिक वासोडिलेटर या त्वचा की परेशानी (जैसे, जाइलीन) हीटिंग विधियां न केवल अविश्वसनीय हैं, बल्कि जानवर के लिए असुरक्षित भी हैं और44से बचा जाना चाहिए। अन्य पारंपरिक तरीकों के विपरीत, जैसे कि पूंछ को गर्म पानी में विसर्जित करना, इस डिवाइस की ऑटोरेगुलेशन क्षमता एक साथ कई जानवरों को सुरक्षित रूप से हालत में कर सकती है। इसके अलावा, इस प्रोटोकॉल को इष्टतम रूप से डिजाइन किए गए निरोधक डिवाइस का उपयोग करके और जानवर के तेजी से और सुरक्षित स्थिरीकरण की स्थिति में अनुमति देकर और मजबूत किया जाता है जो पार्श्व पूंछ नस को सबसे अच्छा प्रदर्शित करता है।
कई वर्तमान निरोधकों में देखे गए पारदर्शी ट्यूबल प्रारूप, हालांकि व्यावहारिक रूप से अच्छी तरह से डिज़ाइन किए गए हैं, प्रत्येक जानवर के साथ अधिक हैंडलिंग समय की आवश्यकता होती है, इस प्रकार निरोधक प्रक्रिया45को लंबा करती है। यह आक्रामक लक्षणों के साथ कृंतक उपभेदों में अधिक समस्याग्रस्त हो सकता है जो सीमित सहयोग प्रदान करता है46,47. इसके विपरीत, निरोधक उपकरण की अर्ध-संलग्न शंकु संरचना पशु की त्वरित स्थिति की अनुमति देती है और संयम की अवधि को कम करने में सहायता करती है। एक साथ, अभिनव, अत्यधिक अनुकूलित वार्मिंग/निरोधक प्रणाली का उपयोग कर सुव्यवस्थित प्रोटोकॉल इंजेक्शन प्रक्रिया को तेज करता है, जिससे जानवरों के बड़े समूहों की त्वरित और प्रभावी डोजिंग की अनुमति मिलती है । हमारी प्रयोगशाला में, हम आम तौर पर इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके 1 घंटे के भीतर हीट उपचार से इंजेक्शन की निगरानी के लिए 30 चूहों की एक पूरी इंजेक्शन प्रक्रिया को पूरा करते हैं।
उन्नत सुविधाओं के बावजूद, इस डिवाइस के कुछ स्पष्ट नुकसान हैं: पहला वार्मिंग चैंबर में डिवाइस और नियमित प्रकाश बल्ब प्रतिस्थापन की लागत है। हालांकि, इंजेक्शन की दक्षता और गति के अलावा, डिवाइस बार-बार उपयोग के लिए टिकाऊ है और सबसे आम कीटाणुनाशकों के साथ संगत है, उपयोगों के बीच डिवाइस की पूरी तरह से सफाई की अनुमति देता है। साथ में, यह प्रारंभिक निवेश को ऑफसेट करताहै। एसecond, सीमित कार्यक्षेत्र के साथ स्थितियों में, इस प्रोटोकॉल के लिए एक दोष एक समर्पित बेंच क्षेत्र के लिए आवश्यकता हो सकती है जो इंजेक्शन का प्रदर्शन करते समय दो इकाइयों को साथ-साथ रखने के लिए पर्याप्त है। हालांकि, क्योंकि डिवाइस का उपयोग वी इंजेक्शन से जुड़े कई कृंतक प्रोटोकॉल में मोटे तौर पर किया जा सकता है, यह संभव है कि डिवाइस आइसोफ्लाणेन वाष्पीकरण जैसे अन्य सांप्रदायिक विवारियम उपकरणों के समान एक कोर उपकरण के रूप में काम कर सकता है। बावजूद, दो इकाइयों को आसानी से पोर्टेबल है और बंडल और जबकि उपयोग में नहीं चुराया जा सकता है ।
इस प्रोटोकॉल में वर्णित मुरीन फंगल सेप्सिस का घातक चुनौती मॉडल मनुष्यों में सी एल्बिकान रक्तप्रवाह संक्रमणों की बारीकी से नकल करता है और इसका उपयोग फंगल उग्रता, एंटीफंगल उपचारों की परीक्षण प्रभावकारिता का अध्ययन करने और संक्रमण37,39,48के लिए मेजबान प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं की विशेषता के लिए बड़े पैमाने पर किया गया है। एक प्रजनन संक्रमण को प्राप्त करने के लिए, पूंछ नस इंजेक्शन के माध्यम से i.v. टीका खून में जीवों की सटीक डिलीवरी सुनिश्चित करने के लिए प्रोटोकॉल का सबसे महत्वपूर्ण कदम है। वास्तव में, जानवर कैंडिडा यानी चुनौतियों के अलग-अलग स्तरों पर बहुत अलग ढंग से प्रतिक्रिया देते हैं; इनोकुलम की बहुत कम मात्रा के प्रशासन अवांछित सहज वसूली में परिणाम होगा, जबकि बहुत अधिक खुराक प्राप्त जानवरों समय से पहले शिकार होगा । सेप्सिस/मृत्यु दर के एक सुसंगत स्तर को प्रेरित करने के लिए किसी दिए गए जीव के लिए इनोकुलम आकारों की विशिष्ट खिड़की काफी हद तक फंगल उपभेदों और माउस उपभेदों दोनों पर निर्भर करती है ।
1 x 105 जंगली प्रकार सी एल्बिकान के इनोकुलम में स्विस वेबस्टर चूहों का उपयोग करके वर्तमान प्रोटोकॉल ने 1 दिन के भीतर सेप्सिस रुग्णता की शुरुआत को प्रेरित किया, जिसके परिणामस्वरूप प्रगतिशील मृत्यु दर 5-7 दिनों तक 100% घातक हो गई। इसके विपरीत, 1 x 105 से अधिक इनोकुला आमतौर पर त्वरित मौतों का कारण बनते हैं (यानी, 1-2 दिन 1 x 106,3-4 दिनों में 5 x 105पर), और 1 x 105 से कम वाले उप-घातक होते हैं। साहित्य में कई रिपोर्टों के अनुरूप, सी एल्बिकान के बदलेगैर-एल्बिकान कैंडिडा प्रजातियों के उपयोग के परिणामस्वरूप घातकता40, 49काफी कम हो जाती है। इसके अतिरिक्त, माउस उपभेदों, या यहां तक कि उपनिवेशों की उत्पत्ति का चुनाव, माउस उपभेदों के बीच अलग-अलग संवेदनशीलता के कारण संक्रमण परिणामों पर काफी प्रभाव डाल सकता है, जैसा कि अन्य39,40,41,50,51,52, 53,54,55द्वारा सूचित किया गया है। इसलिए, प्रयोगों को डिजाइन करते समय दोनों को ध्यान में रखा जाना चाहिए।
एक घातक i.v. चुनौती के बाद, कवक कोशिकाएं रक्त के माध्यम से तेजी से फैलती हैं और कई अंगों पर आक्रमण करना शुरू करती हैं, जिनमें से सबसे अधिक प्रभावित गुर्दे41हैं। प्रभावित अन्य अंग मस्तिष्क, तिल्ली और अस्थि मज्जा48,56हैं। बावजूद, तीव्र सेप्सिस प्रारंभिक समयअंक 37पर मौत का अंतिम कारण है। जैसा कि प्रतिनिधि परिणामों में दिखाया गया है, सेप्सिस गंभीरता का मात्रात्मक रूप से मूल्यांकन सेप्सिस के लिए माउस क्लीनिकल असेसमेंट स्कोर (एम-CASS) द्वारा चुनौती प्राप्त जानवरों में सेप्सिस स्थिति के प्रदर्शित संकेतों के आधार पर किया जा सकता है43,57। घातक सेप्सिस के कई सरोगेट मार्कर में, हाइपोथर्मिया को नैदानिक और प्रयोगात्मकसेप्सिस43,58,59दोनों में आसन्न मृत्यु के लिए एक महत्वपूर्ण कारक के रूप में सुझाया गया है।
यद्यपि इस मॉडल में सीधे इनस्ल बनाम आउटब्रीड चूहों की तुलना करने के लिए कोई औपचारिक अध्ययन नहीं किया गया है, लेकिन माना आनुवंशिक विषमता के बावजूद, आउटस्लरी स्विस वेबस्टर चूहों का उपयोग करके वर्तमान प्रोटोकॉल से प्राप्त डेटा विभिन्न सेप्सिस मापदंडों में असाधारण रूप से प्रजनन योग्य हैं। आम तौर पर, मृत्यु का एक पैटर्न जो 3-5 दिनों के भीतर पड़ता है, तीव्र सेप्सिस का एक दृढ़ मॉडल है, जैसा कि घातक चुनौती50, 51के बाद के घंटों के भीतर सेप्सिस रुग्णता और भड़काऊ मार्कर के स्तर में तेजी से ऊंचाई का सबूत है। लंबे समय तक जीवित रहने के समय (7-10 दिनों) के लिए, मृत्यु दर माइक्रोबियल बोझ का परिणाम है जिससे लक्षित अंगों और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र में घातक ऊतक क्षति होती है। सेप्सिस या माइक्रोबियल बोझ का चुनाव प्रतिरक्षा कार्यों या विरोधी भड़काऊ आहार या एंटीफंगल उपचार/टीकों के लिए प्रतिक्रियाओं का मूल्यांकन करने के लिए आवश्यक के रूप में लागू किया जा सकता है, जैसा कि इस्तेमाल किए गए इनोकुलम द्वारा निर्धारित किया जाता है ।
i.v. घातक चुनौती मॉडल के अलावा, एक आईपी चैलेंज के माध्यम से चूहों में सी एल्बिकन के साथ इंट्रा-पेट संक्रमण भी प्रसारित कैंडिडियासिस और बाद में सेप्सिस का कारण बन सकता है, हालांकि बैक्टीरियल रोगजनक, स्टेफिलोकोकस ऑरियस के साथ सह-टीका, सह-तरीके सी एल्बिकैन मोनो-संक्रमण 51,60,61की तुलना में मृत्यु दर को बढ़ाता है। आईपी घातक चुनौती मॉडल में, काफी अधिक माइक्रोबियल इनोकुला (1.75 x 107सी एल्बिकन/8 x 107एस ऑरियस प्रति माउस) को पॉलीमाइक्रोबियल पेरिटोनाइटिस और पेट की गुहा से रक्तधारा में जीवों के प्रसार का कारण बनने के लिए आवश्यक हैं। इसी प्रकार, चूहों में सी एल्बिकान के साथ गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल संक्रमण इम्यूनोसप्रेसिव और/या म्यूकोसल-हानिकारक एजेंटों के साथ इलाज करने से फंगल कोशिकाओं को खून में स्थानांतरित हो जाता है और इसके परिणामस्वरूप फंगल सेप्सिस६२, ६३होताहै । विशिष्ट टीका मार्गों के बावजूद, आगामी फंगल सेप्सिस का तंत्र तीन रोग मॉडलों के बीच काफी हद तक अनुरूप है, जिसमें कैंडिडा के लिए एक अनियंत्रित प्रणालीगत प्रोइनफ्लेमेटरी प्रतिक्रिया शामिल है जो अंग विफलता37,51,61की ओर जाता है। इसी प्रकार, मनुष्यों में, यह मेजबान प्रतिक्रिया की प्रक्रिया है, न कि केवल कैंडिडेमिया, जो स्वास्थ्य देखभाल सेटिंग्स64, 65में अधिग्रहीत हेमेटोनेकी रूप से प्रसारित कैंडिडिसिस से जुड़े उच्च रुग्णता/मृत्यु का कारणबनतीहै।
वर्तमान फंगल सेप्सिस मॉडल का उपयोग करते हुए, हम यहां प्रदर्शित करते हैं कि घातक सी एल्बिकन संक्रमण के खिलाफ सुरक्षा को सी डबलिनिएन्सिस (एवायरुलेंट) या तनु सी एल्बिकन म्यूटेंट के साथ टीकाकरण से प्राप्त किया जा सकता है, जो सेप्सिस रुग्णता में महत्वपूर्ण कमी के साथ सहवर्ती है । संरक्षण सहज जीआर-1+ माइलॉयड-व्युत्पन्न दमन कोशिकाओं द्वारा मध्यस्थता की जाती है जो बोन मैरो में प्रशिक्षित जन्मजात प्रतिरक्षा66,67के रूप में प्रेरित दिखाई देती हैं। सी एल्बिकान रक्तप्रवाह संक्रमण के खिलाफ जन्मजात प्रतिरक्षा-मध्यस्थता संरक्षण के इस उपन्यास रूप की समझ का विस्तार करने के प्रयास चल रहे हैं ।
अंत में, अभिनव कृंतक वार्मिंग/निरोधक उपकरण एक कुशल और प्रभावी तरीके से बड़े पैमाने पर बहु समूह पशु अध्ययन के i.v. इंजेक्शन प्रदर्शन करने की हमारी क्षमता को आगे बढ़ाने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है । जैसे, हम शब्द गढ़ा है, माउस एक मिनट, डिवाइस के लिए । डिवाइस विनिर्देशों एक समान डिवाइस की खरीद के लिए अनुरोध पर इसी लेखक से उपलब्ध हैं । यहां प्रदर्शित तकनीकों से अनुसंधान क्षेत्रों की एक विस्तृत श्रृंखला में पूंछ नस इंजेक्शन को नियोजित करने वाले कृंतक मॉडलों में एक उपयोगी उपकरण के रूप में काम किया जा सकता है।
The authors have nothing to disclose.
इस काम को एलएसयूएचएससी फाउंडेशन (पीएलएफ) द्वारा समर्थित किया गया था, और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थानों के राष्ट्रीय सामान्य चिकित्सा विज्ञान संस्थान से U54 GM104940 द्वारा भाग में, जो लुइसियाना नैदानिक और ट्रांसलेशनल साइंस सेंटर को धन देता है।
Candida albicans strain DAY185 | Carnegie Melon University | N/A | provided by the laboratory of Aaron Mitchell |
Candida albicans strain efg1Δ/Δ cph1Δ/Δ | University of Tennessee Health Sciences Center | N/A | provided by the laboratory of Glen Palmer |
Candida dubliniensis strain Wü284 | Trinity College, Dublin, Ireland | N/A | provided by the laboratory of Gary Moran |
Mice | Charles River Laboratories | 551NCICr:SW | Female Swiss Webster; 6-8 weeks old |
Mice | Charles River Laboratories | 556NCIC57BL/6 | Female C57BL/6; 6-8 weeks old |
Needles, 27G, ½-in | Becton Dickinson | 305109 | can be substituted from other vendors |
Phosphate buffered saline (PBS) | GE | SH30028.02 | can be substituted from other vendors |
Rodent warming and restraining device (Mouse a Minute) | LSU Health | custom order | Mouse a Minute is available for custom ordering from LSU Health |
Sabouraud dextrose agar (SDA) | Becton Dickinson | 211584 | can be substituted from other vendors |
Syringes, 1 mL | Becton Dickinson | 309659 | can be substituted from other vendors |
Trypan blue solution | Sigma | T8154 | |
Yeast peptone dextrose (YPD) broth | Fisher Scientific | BP2469 | can be substituted from other vendors |