निम्नलिखित कार्य में, हम कोलोरेक्टल और अग्नाशय के कैंसर के एक बड़े बायोबैंक की स्थापना के लिए आवश्यक लगातार कदमों का वर्णन करते हैं।
अंतर-व्यक्तिगत गुणों और कैंसर की विषमता के बारे में बढ़ते ज्ञान के प्रकाश में, व्यक्तिगत चिकित्सा के उभरते क्षेत्र को प्रीक्लिनिकल अनुसंधान के लिए एक मंच की आवश्यकता होती है। हाल के वर्षों में, हमने प्राथमिक ट्यूमर ऊतक, सामान्य ऊतक, सेरा, अलग परिधीय रक्त लिम्फोसाइट्स (पीबीएल), रोगी-व्युत्पन्न ज़ेनोग्राफ्ट (पीडीएक्स), साथ ही प्राथमिक और माध्यमिक कैंसर सेल लाइनों को शामिल करते हुए कोलोरेक्टल और अग्नाशय के कैंसर का एक बायोबैंक स्थापित किया है। चूंकि मूल ट्यूमर ऊतक सीमित है और प्राथमिक कैंसर सेल लाइनों की स्थापना दर अभी भी अपेक्षाकृत कम है, पीडीएक्स न केवल बायोबैंक के संरक्षण और विस्तार की अनुमति देता है बल्कि माध्यमिक कैंसर सेल लाइनों की पीढ़ी को भी अनुमति देता है। इसके अलावा, पीडीएक्स-मॉडल प्रीक्लिनिकल दवा परीक्षण के लिए वीवो मॉडल में आदर्श साबित हुए हैं। हालांकि, बायोबैंकिंग के लिए सावधानीपूर्वक तैयारी, सख्त दिशानिर्देश और एक अच्छी तरह से अभ्यस्त बुनियादी ढांचे की आवश्यकता होती है। कोलेक्टॉमी, डुओडेनोपेनक्रिएटेक्टोमी या पुनः प्राप्त मेटास्टेस नमूनों को रीसेक्शन के तुरंत बाद एकत्र किया जाता है और पैथोलॉजी विभाग में स्थानांतरित कर दिया जाता है। एक निष्पक्ष हिस्टोपैथोलॉजिकल रिपोर्ट की प्राथमिकता का सम्मान करते हुए, उपस्थित पैथोलॉजिस्ट के विवेक पर, जो विच्छेदन करता है, छोटे ट्यूमर के टुकड़े और गैर-ट्यूमर ऊतक काटे जाते हैं।
परिगलित भागों को त्याग दिया जाता है और शेष ट्यूमर ऊतक को छोटे, समान क्यूब्स में काट दिया जाता है और बाद में उपयोग के लिए क्रायोप्रेयर किया जाता है। इसके अतिरिक्त, ट्यूमर का एक छोटा सा हिस्सा प्राथमिक कैंसर सेल संस्कृति के लिए कीमा बनाया हुआ और तनावपूर्ण है। इसके अतिरिक्त, रोगी से पूर्व और पश्चात से तैयार किए गए रक्त नमूनों को सीरम और पीबीएल प्राप्त करने के लिए संसाधित किया जाता है। पीडीएक्स एनग्रेफ्टमेंट के लिए, क्रायोप्रीवित नमूनों को शौच की कमी वाले चूहों के पार्श्व में कम से कम प्रत्यारोपित किया जाता है। जिसके परिणामस्वरूप पीडीएक्स ने “दाता” ट्यूमर की हिस्टोलॉजी को बारीकी से पुनः बढ़ाया और बाद में उपयोग के लिए बाद में ज़ेनोबेड़ाइंग या क्रायोप्रेयरेक्ट के लिए उपयोग किया जा सकता है। निम्नलिखित कार्य में, हम कोलोरेक्टल और अग्नाशय के कैंसर के एक बड़े बायोबैंक के निर्माण, रखरखाव और प्रशासन के व्यक्तिगत चरणों का वर्णन करते हैं। इसके अलावा, हम बायोबैंकिंग से जुड़े महत्वपूर्ण विवरणों और चेतावनी को उजागर करते हैं।
हाल के वर्षों में, कैंसर के रूप में आकृति, नैदानिक और आनुवंशिक गुणों के संचित ज्ञान के कारण कैंसर की अवधारणा को विषम, व्यक्तिगत रोग के रूप में जन्म दिया । नतीजतन, नैदानिक और रोग सुविधाओं के अलावा नियोप्लाज्म्स के उत्परिवर्तनीय लक्षण वर्णन ने नैदानिक निर्णय लेने के लिए महत्व प्राप्त किया है और विभिन्न आणविक परिवर्तनों के लिए कई लक्षित उपचार विकसित किए गए थे। उदाहरण के लिए, कोलोरेक्टल कैंसर के इलाज में सेटुक्सीमैब की प्रभावकारिता केआरएएस और PIK3CA उत्परिवर्तनीय स्थिति1के विश्लेषण से भविष्यवाणी की जा सकती है। सटीक दवा का उद्देश्य प्रत्येक रोगी में उच्चतम उपचार प्रतिक्रिया प्रदान करने और अप्रभावी उपचारों की विषाक्तता से बचने के लिए एक सिलवाया दृष्टिकोण का लक्ष्य है2. बायोबैंकों में कैंसर रोगियों के ऊतक, रक्त और अन्य जैविक सामग्री होती हैं, जो नैदानिक डेटा से जुड़ी होती हैं, और इस प्रकार ट्रांसलेशनल कैंसर अनुसंधान के लिए एक उत्कृष्ट उपकरण हैं। नैदानिक नमूनों की बड़ी संख्या के कारण, बायोबैंक दुर्लभ, लेकिन संभावित नशा म्यूटेशन का पता लगाने में सक्षम होते हैं, जो व्यक्तिगत रोगी3के लिए नए उपचार के अवसर प्रदान करता है।
एक ऑन्कोलॉजिक अनुसंधान स्पेक्ट्रम के रूप में व्यापक रूप से कवर करने के लिए, हमने अकेले नमूना कटाई पर अपनी गतिविधि को नियंत्रित नहीं किया, बल्कि रोगी-व्युत्पन्न कैंसर सेल लाइनों और ज़ेनोग्राफ्ट्स (पीडीएक्स) की स्थापना पर ध्यान केंद्रित किया। पारंपरिक 2डी सेल लाइनें इन विट्रो अनुसंधान का कोना पत्थर बनी हुई हैं और बड़े पैमाने पर दवा स्क्रीनिंग4,5के लिए प्रमुख विकल्प हैं । इसके अलावा, सेल लाइन विश्लेषण अक्सर आसान, सस्ता और अधिक आसानी से उपलब्ध है। इसके अतिरिक्त, चूंकि रोगी-व्युत्पन्न परिधीय रक्त लिम्फोसाइट्स (पीबीएल) उपलब्ध हैं, इसलिए विट्रो6में ट्यूमर इम्यूनोलॉजी का भी अध्ययन किया जा सकता है। हालांकि, विट्रो में या वीवो प्रयोगों में आधारित कोशिका में आशाजनक प्रीक्लिनिकल प्रभावता के साथ नव विकसित दवाओं के बहुमत ने नैदानिक परीक्षणों में निराशाजनक परिणाम दिखाए हैं7। इसके विपरीत, वीवो अध्ययनों में पीडीएक्स पर आधारित प्रीक्लिनिकल अध्ययनों ने एंटीनोप्लास्टी एजेंटों की नैदानिक गतिविधि को अधिक ईमानदारी से8रूप से परिलक्षित किया है। चूंकि पीडीएक्स ऊतक दाता ट्यूमर के हिस्टोलॉजिकल और आणविक गुणों को बारीकी से दर्शाता है, इसलिए पीडीएक्स मॉडल बायोबैंक की अखंडता को बनाए रखने और अनुसंधान समूहों और संस्थानों के बीच नमूनों के आदान-प्रदान की अनुमति देने के लिए अक्सर बहुत सीमित ट्यूमर ऊतकों का प्रचार करने का एक अच्छा तरीका है। इसके अलावा, पीडीएक्स ऊतक से प्राप्त कैंसर सेल लाइनों को प्राथमिक कैंसर सेल लाइनों 9 की तुलना में काफी आसानस्थापितकिया जा सकता है। हाल के वर्षों में, हमारे कार्य समूह ने प्रश्न में सभी जैविक नमूनों के लिए कार्य प्रवाह को मापने और अनुकूलन करके एक व्यापक एकीकृत कोलोरेक्टल और अग्नाशय के कैंसर बायोबैंक की स्थापनाकी है (चित्र 1)।
चित्रा 1:कार्यप्रवाह और बायोबैंक के संगठन कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
एक जीवित बायोबैंक की पीढ़ी, गोपनीयता, चिकित्सा कानून और पशु कल्याण, एक अच्छा बुनियादी ढांचा और एक अच्छी तरह से समन्वित टीम के कानूनी नियमों का पालन करने के अलावा, पूर्वमान । यह सीधे अनुसंधान प्रक्रियाओं में शल्य चिकित्सा कर्मचारियों का एक हिस्सा शामिल करने के लिए लाभप्रद साबित कर दिया है, क्योंकि वे बहुत अच्छी तरह से ऊतक दान के लिए व्यक्तिगत रोगी की उपयुक्तता का आकलन कर सकते हैं । इसके अलावा, रोगियों को अधिक बार बायोबैंकिंग के साथ सहमति है, जब उनके लिखित अनुमोदन शल्य चिकित्सा सूचित सहमति चर्चा के दौरान प्राप्त किया जाता है करते हैं । समय और संसाधनों को बचाने के लिए, मामलों है कि संभवतः ट्यूमर ऊतक की अपर्याप्त मात्रा में उपज होगा बायोबैंकिंग के लिए नहीं चुना जाना चाहिए । जब नमूना अधिग्रहण की बात आती है, तो कहावत “संचार कुंजी है” एक सरल है, लेकिन अक्सर सत्य की अनदेखी करता है। यह केवल हमेशा की तरह आगे बढ़ने और resection नमूने के लिए फॉर्मलडिहाइड जोड़ने के द्वारा शुरू में नमूना सही बर्बाद करने के लिए एक भी बेख़त थिएटर नर्स या शल्य चिकित्सा सहयोगी लेता है । इसलिए, यह अत्यंत महत्वपूर्ण है कि इसमें शामिल कर्मचारियों का हर एक सदस्य बायोबैंकिंग के लिए एसओपी से परिचित हो जाए । सर्जन अनुसूचित ऊतक संग्रह के बारे में प्रक्रिया के शुरू में दिन पहले और सही देखा जाना चाहिए । इसके अलावा, बायोबैंकिंग के लिए चयनित मामलों को इलेक्ट्रॉनिक या योजना में हाइलाइट किया जाना चाहिए। सर्जिकल नमूने से ऊतक संचयन एक रोगविज्ञानी द्वारा किया जाना चाहिए। सबसे पहले, यह सुनिश्चित करेगा कि ऊतक संचयन अंतिम रोग रिपोर्ट में हस्तक्षेप नहीं करता है। दूसरा, यह व्यवहार्य कैंसर ऊतक की पर्याप्त मात्रा के साथ ऊतक प्राप्त करने की संभावना बढ़ जाती है । विशेष रूप से एक स्पष्ट डेस्मोप्लास्टिक प्रतिक्रिया और लगातार परिगलित क्षेत्रों के साथ अग्नाशय के कैंसर में, व्यवहार्य भागों को अप्रशिक्षित आंखों के लिए स्थूल की पहचान करना मुश्किल है। इस नियम के अपवाद के रूप में, बड़े हेपेटिक या पल्मोनल मेटास्टेस से ऊतक ब्लॉक, कभी-कभी सर्जन द्वारा “बैक-टेबल” उत्पादित किया जा सकता है, अगर सर्जिकल मार्जिन को मैक्रोस्कोपिक रूप से परिभाषित किया जा सकता है। कुल मेसोरेक्टल उत्तेजना (टीएमई) द्वारा पुनः प्राप्त होने वाला गुदा कैंसर, बायोबैंकिंग के लिए उपयुक्त नहीं हो सकता है, क्योंकि पैराफिन एम्बेडिंग से पहले पुनः प्राप्त नमूने से ऊतक संचयन टीएमई गुणवत्ता मूल्यांकन में हस्तक्षेप कर सकता है। वैकल्पिक रूप से, बायोबैंकिंग के लिए ऊतक गुदा कैंसर के ट्रांसनल बायोप्सी द्वारा प्राप्त किया जा सकता है।
मूल ट्यूमर से प्राप्त प्राथमिक सेल संस्कृतियों के लिए स्थापना दर आम तौर पर कम होती है। पीडीएक्स-व्युत्पन्न, माध्यमिक सेल संस्कृतियों को सफलतापूर्वक स्थापित किए जाने की संभावना है। हम प्रत्येक मामले के लिए विभिन्न मीडिया के परीक्षण और पहले मार्ग के लिए एंटीबायोटिक की खुराक के उपयोग के लिए एक ंयूनतम करने के लिए संदूषण को कम करने के बाद से काटा ऊतक शायद ही कभी बाँझ है की सलाह देते हैं । सफल प्रचार के बाद, प्रत्येक व्यक्ति सेल लाइन को FACS विश्लेषण द्वारा कैंसर सेल लाइन के रूप में पुष्टि की जानी चाहिए और नियमित रूप से माइकोप्लाज्मा संदूषण के लिए परीक्षण किया जाना चाहिए। क्रॉस-संदूषण को बाहर करने के लिए, नियमित एसटीआर विश्लेषण की सलाह दी जाती है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए, कि प्राथमिक और माध्यमिक सेल लाइनों के लिए स्थापना प्रोटोकॉल लगातार अनुकूलन के अधीन है। एकल मीडिया की संरचना और सफलता दरों से संबंधित विवरण स्पष्ट रूप से इस काम के दायरे से बाहर हैं और अलग से प्रकाशित किए जाएंगे ।
पीडीएक्स एनग्रेफ्टमेंट के लिए, ट्यूमर ऊतक को या तो रिसेक्शन के बाद सीधे प्रत्यारोपित किया जा सकता है या भ्रूण बछड़े सीरम में 10% DMSO या देरी प्रत्यारोपण के लिए इसी तरह की ठंड मीडिया के साथ क्रायोप्रेयर्ड किया जा सकता है। ट्यूमर ऊतक कटाई पर तुरंत प्रत्यारोपण रसद और प्रयोगशाला के कर्मचारियों पर एक तनाव डालता है, और क्रायोप्रिजर्वेशन के बाद xenografting परिणाम सभी 10में अवर नहीं हैं । इसके अलावा, ट्यूमर प्रत्यारोपण से पहले मैट्रिक्सेल में ऊतक के इनक्यूबेशन, काफी वृद्धि की दर12। हम निश्चित रोग खोज और गलती से एकत्र ऊतक नमूनों के तत्काल निपटान के बाद देरी engraftment की सलाह देते हैं । चूंकि प्राप्तकर्ता माउस की इम्यूनोडेफिशिएंसी के साथ प्राथमिक एनग्रेफ्टमेंट की सफलता दर बढ़ जाती है, इसलिए हम पहले पीडीएक्स मार्ग के लिए एनएसजी चूहों का उपयोग करते हैं। पहले सफल PDX engraftment के बाद, NMRInu/nu चूहों कर सकते है और बाद के मार्ग और ऊतक विस्तार के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए । यह तनाव एनएसजी या इसी तरह की इम्यूनोडिफिशिएंसी उपभेदों की तुलना में नस्ल के लिए अधिक मजबूत, सस्ता और आसान है, लेकिन अभी भी उचित एनग्रेफ्टमेंट दरों को दर्शाता है । इसके अलावा, इसकी नग्नता प्रत्यारोपण और ट्यूमर विकास की निगरानी की सुविधा प्रदान करती है। बाद के मार्गों में एनग्रफ्टमेंट दरों को बढ़ाने के लिए, हम जब भी संभव हो चूहों की मेजबानी के लिए ताजा काटे गए पीडीएक्स ऊतकों के सीधे हस्तांतरण की सलाह देते हैं, विशेष रूप से धीमी गति से बढ़ते पीडीएक्स और कम प्राथमिक एनग्रेफ्टमेंट सफलता दर वाले मामलों के लिए। कोलिंस और लैंग ने हाल ही में कोलोरेक्टल पीडीएक्स स्थापना के 14 अध्ययनों की समीक्षा की और 68% की औसत पीडीएक्स स्थापना दर के साथ 14 से 100% तक भिन्न एनग्रफ्टमेंट दरों की सूचना दी, बाद में हमारे निष्कर्षों के अनुरूप13। साहित्य के अनुरूप, हमने कोलोरेक्टल कैंसर पीडीएक्स14की तुलना में अग्नाशय की कम स्थापना दरों का अवलोकन किया। मेजबान माउस तनाव और ट्यूमर इकाई के बावजूद, मानव, एपस्टीन-बर्र वायरस (ईबीवी) से जुड़े बी-सेल लिंफोमा और प्रत्यारोपण पक्ष में मुरीन लिंफोमास की वृद्धि एक महत्वपूर्ण नुकसान15,16बन गया है । यदि अपरिचित, इस तरह के ट्यूमर “दूषित” बाद के मार्ग कर सकते है और इस तरह लगातार परिणाम चकित । असामान्य तेजी से पीडीएक्स वृद्धि और गर्भाशय ग्रीवा, एक्सिलर और इंजिनियल लिम्फ नोड्स की सूजन मुरीन लिंफोमा वृद्धि के मजबूत संकेतक हैं, लेकिन पीडीएक्स की नियमित हिस्टोलॉजिकल परीक्षा फिर भी उचित है। इसके अलावा, पीडीएक्स और संबंधित दाता रोगी के बीच आनुवंशिक सामंजस्य एसटीआर-विश्लेषण द्वारा नियमित रूप से परीक्षण किया जाना चाहिए। आदर्श रूप से, बायोबैंक को एक नैदानिक डेटाबेस से जोड़ा जाना चाहिए जिसमें रोगियों की विशेषताएं (सामान्य जानकारी, अस्तित्व, रिलेप्स मुक्त अस्तित्व, चिकित्सा, माध्यमिक नियोप्लासिया आदि) शामिल हैं। गोपनीयता संरक्षण के कानूनी नियमों और इस तरह के एक अनाम डेटा आधार की कमी के कारण, हमारे नैदानिक डेटा सेट नियमित रूप से प्रशासनीकृत और सहयोग चिकित्सकों द्वारा मैन्युअल रूप से अद्यतन किया जाता है ।
जबकि पारंपरिक बायोबैंक वेधशाला अनुसंधान तक सीमित हैं, एक जीवित बायोबैंक इन विट्रो और वीवो हस्तक्षेपों के लिए अवसर प्रदान करता है। रोगी-व्युत्पन्न सेल लाइनें मौलिक अनुसंधान, उच्च-थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग और नए दवा एजेंटों के मूल्यांकन के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण हैं4। इसी PDX मॉडल, हालांकि, बढ़ते महत्व के हैं, क्योंकि वे मूल ट्यूमर17, 18के हिस्टोलॉजी को बारीकी से पुन: रीकैपिटल करते हैं और कई मार्ग19, 20से अधिक उच्च आनुवंशिकस्थिरतादिखाते हैं। हमारे पीडीएक्स बायोबैंक ने खुद को प्रीक्लिनिकल और मौलिक अनुसंधान6,21के लिए एक उत्कृष्ट मंच के रूप में साबित किया है । इसके अलावा, चूंकि बड़े पीडीएक्स संग्रह रोगी आबादी की अंतर-व्यक्तिगत विषमता को पर्याप्त रूप से प्रतिबिंबित करते हैं, इसलिए पीडीएक्स नैदानिक परीक्षण (पीसीटी) दृष्टिकोण (प्रति मॉडल प्रति मॉडल एक जानवर) ने दवा विकास के लिए महत्व प्राप्त किया है क्योंकि यह नई दवाओं और संयोजन आहार8के लिए नैदानिक प्रतिक्रिया की वफादार भविष्यवाणी की अनुमति देता है। हम भी वर्तमान में छोटे पीसीटी परीक्षणों में नई प्रयोगात्मक दवाओं का मूल्यांकन कर रहे हैं ।
इन आशाजनक परिणामों के बावजूद, 12.2 महीने की औसत स्थापना अवधि, एंटीकैंसर उपचार विकल्पों के परीक्षण के लिए “अवतार चूहों” के रूप में पीडीएक्स मॉडल की नैदानिक प्रयोज्यता में बाधा डालती है, कम से कम उन रोगियों के लिए तत्काल न्यायवंत या यहां तक कि नियोडजूवेंट उपचार22की आवश्यकता होती है। मानक पीडीएक्स मॉडल का एक अतिरिक्त नुकसान मेजबान चूहों की इम्यूनोडेफिशिएंसी के कारण इम्यूनोथेरेपी परीक्षण के लिए उपयोगिता की कमी है। इन सीमाओं को दूर करने के लिए, कई “मानवीकृत” माउस उपभेदों को विकसित किया गया है। इन चूहों को भारी इम्यूनोसमझौता है, लेकिन विभिन्न प्रकार के मानव अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न कोशिकाओं या सीडी 34+ हेमेटोपोइटिक स्टेम कोशिकाओं के साथ पीडीएक्स आउटग्रोथ23के बाद पुनर्गठित किया जा सकता है, जिससे लिम्फोसिट-मध्यस्थता साइटोक्सिसिटी के मूल्यांकन और प्रतिरक्षा चेकपॉइंट अवरोधक उपचार24,25के लिए चिकित्सा प्रतिक्रिया की अनुमति दी गई।
हाल के वर्षों में, रोगी-व्युत्पन्न ऑर्गेनॉइड (पीडीओ) पीडीएक्स के साथ प्रतिस्पर्धा करने वाले महत्वपूर्ण कैंसर मॉडल के रूप में उभरा। बरकरार ट्यूमर टुकड़ों से व्युत्पन्न और एक बाह्रात्म मैट्रिक्स पाड़ में सुसंस्कृत, इन तीन आयामी संरचनाओं बारीकी से मूल ट्यूमर के हिस्टोलॉजिक और आनुवंशिक गुणों को प्रतिबिंबित । दीर्घकालिक विस्तार और क्रायोप्रिजर्वेशन की संभावना पीडो को एक जीवित बायोबैंक26, 27का एक आदर्श पूरक प्रदान करती है। अपेक्षाकृत उच्च स्थापना दर के अलावा, कई ट्यूमर संस्थाओं के पीडो के लिए विश्वसनीय दवा प्रतिक्रिया भविष्यवाणी की सूचना दी गई है28। इसके अलावा, पीडीओ भी ट्यूमर कोशिकाओं परिसंचारी से उत्पन्न किया गया है और इसी स्वस्थ ऊतक से ऑर्गेनॉइड की एक साथ स्थापना भी संभव है, एक रोगी-व्यक्तिगत आधार29,30पर चिकित्सा से संबंधित विषाक्तता के आकलन की अनुमति। हालांकि, पारंपरिक 2D सेल संस्कृतियों की तुलना में, ऑर्गेनॉइड संस्कृति समय और संसाधन लेने वाली है और कृत्रिम बाह्राश मैट्रिक्स यौगिक कुछ विश्लेषणात्मक प्रक्रियाओं31में हस्तक्षेप कर सकते हैं। इसके अलावा, कैंसर ऑर्गेनॉइड स्वस्थ एपिथेलियम30से प्राप्त तेजी से बढ़ते, गैर-घातक ऑर्गेनॉइड द्वारा अधिक वृद्धि के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं। स्ट्रोमा, रक्त वाहिकाओं और प्रतिरक्षा कोशिकाओं की कमी के कारण, पीडीओ ज्यादातर एंटींगियोजेनिक इम्यूनोथेरपी एजेंटों के परीक्षण के लिए लागू नहीं होते हैं। फिर भी, नई खेती के तरीके विट्रो मेंट्यूमर माइक्रोएनवायरमेंट के मॉडलिंग की अनुमति देते हैं, जो पीडीओ को पीडीएक्स मॉडल32के लिए एक सच्चे दावेदार प्रदान करते हैं। निकट भविष्य में, रोगी-व्यक्तिगत ट्यूमर मॉडल, अगली पीढ़ी के अनुक्रमण जैसे शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरणों के साथ संयुक्त, उम्मीद है कि सच्ची सटीक दवा और अनुरूप उपचार दृष्टिकोण के लिए मार्ग प्रशस्त होगा।
The authors have nothing to disclose.
हम कृपया जेनी बर्मीस्टर, हमारे चित्रमय सहायक, रिकॉर्डिंग और वीडियो के संपादन के लिए स्वीकार करते हैं । इसके अलावा, हम शल्य चिकित्सा और रोग विभाग के अपने सहयोगियों को पुराने सहयोग के लिए धन्यवाद देते हैं । हम ऑडियो रिकॉर्डिंग उपकरण की आपूर्ति और ध्वनि की गुणवत्ता को परिष्कृत करने के लिए आईटी और मीडिया सेंटर, रोस्टॉक विश्वविद्यालय के उत्पादन प्रबंधक मार्कस मुलर को भी धन्यवाद देना चाहते हैं।
फंडिंग: जर्मन कैंसर सहायता फाउंडेशन (DKH e.V.), अनुदान संख्या १०८४४६, और अनुदान संख्या टीबीआई-V-1-241-VBW-084 राज्य Mecklenburg-Vorpommern से आंशिक रूप से इस शोध वित्त पोषित ।
Bacillol® AF; 1L | Bode, Hartmann | REF 973380 | desinfection |
PP centrifuge tube, 15ml; sterile | Greiner Bio One | GBO Cat. No.:188271 | centrifuge tube |
PP centrifuge tube, 50ml, sterile | Sarstedt | Order number: 62.547.254 | centrifuge tube |
BD DiscarditTM II Syringe 20ml | BD | REF 300296 | blood collection |
Serum 7,5ml Sarstedt Monovette | Sarstedt | Item number: 01.1601 | blood collection |
serological Pipette 10ml | Sarstedt | REF 86.1254.001 | liquid transfer |
Pipetboy ratiolab® accupetta | Ratiolab | Item number: RL3200300 | liquid transfer |
PIPETBOY acu 2 | Integra Biosciences | VWR Cat.No: 613-4438 | liquid transfer |
DPBS; w/o Ca & Mg | Pan Biotech | Cat. No.: P04-36500 | washing |
Pancoll human | Pan Biotech | Cat. No.: P04-60500 | density gradient centrifugation |
DMEM/F12 (Dulbecco’s Modified Eagle Medium) | PAN Biotech | Cat. No.: P04-41500 | cell cultivation |
FBS Good Forte (Filtrated Bovine Serum) | PAN Biotech | Cat. No.: P40-47500 | cell cultivation |
L-Glutamine 200mM | PAN Biotech | Cat. No.: P04-80100 | cell cultivation |
Trypsin / EDTA | PAN Biotech | Cat. No.: P10-023100 | cell cultivation |
DMSO (Dimethyl Sulfoxid for cell culture) | PanReac AppliChem | VWR Cat.No: A3672.0250 | cell freezing |
Freezer Medium (FCS with 10% DMSO) | selfmade | — | cell freezing |
cryotube- CryoPure 2ml | Sarstedt | 72380 | cell freezing |
6-Well cell culture plate; steril; with lid | Greiner bio-one | Cat.-No.: 657 160 | cell cultivation |
Petri dish 92 x 16 mm, PS, without cams | Sarstedt | Cat. No.: 82.1472.001 | tissue preparation |
sterile surgical blades | B.Braun (Aesculap) | REF BB510 | tissue preparation |
BD DiscarditTM II Syringe 10ml | BD | REF 309110 | tissue preparation |
cell strainer; yellow; 100µm | Falcon | REF 352360 | tissue preparation |
CoolCell | biocision | Item number: 210004 | cooling container with -1°C/min |
Dewar transport vessel type 27 B, 2 l, 138 mm | KGW | Cat. No.: HT39.1 | transport system |
Pipette tip 200µl | Sarstedt | REF 70.760.002 | liquid transfer |
Filter tip 1000µl | Sarstedt | REF 70.762.411 | liquid transfer |
Pipette 200µl, yellow | Eppendorf | Cat. No.: 3121 000.082 | liquid transfer |
Pipette 1000µl, blue | Eppendorf | Cat. No.: 3121 000.120 | liquid transfer |
incubator BB 6220 CU | Heraeus | Cat.-No.: 51012839 | cell cultivation |
heating plate PRÄZITHERM | Harry Gestigkeit GmbH | — | heating |
Microscope Zeiss Primo Vert | Carl Zeiss MicroImaging GmbH | Serial number. 3842000839 | imaging cell cultures |
Sterile bench Safe flow 1.8 nunc | nunc GmbH & Co. KG | — | sterile working bench |
freezer -80°C | Kryotec-Kryosafe GmbH | — | sample storage |
Electronic balance MP-300 | Chyo | — | Scale |
BD Micro-fine, U100 insulin syringe | BD | REF 324826 | injection anesthetic |
Rompun 2%; 25ml | Bayer | approval number: 6293841.00.00 | anesthesia |
Ketamin 100 mg/ml, 25ml | CP-Pharma GmbH | approval number: 401650.00.00 | anesthesia |
GES3S Reader | Datamars | not available | RFID reader |
ISO-Transponder FDX-B (1,4x8mm) | Peddymark | — | RFID chip |
Cotrim-ratiopharm® Ampullen SF 480 mg/5 ml | Ratiopharm | PZN-03928197 | antibiotic drinking water |
Heating plate #FM-20 42x28cm | Dragon | — | heating |
Heating lamp | Electric Petra, Burgau | — | heating |
Ointment for the eyes and nose (5% Dexpanthenol) Bepanthen | Bayer | PZN-01578675 | Eye protection |
anatomical tweezer | B.Braun Aesculap | BD21 OR | surgical instruments |
surgical tweezer | B.Braun Aesculap | BD50 1 R | surgical instruments |
scissors | B.Braun Aesculap | BC05 6R | surgical instruments |
needle holder | B.Braun Aesculap | BH1 1 OR | surgical instruments |
Prolene 5-0 | Ethicon | XN8870.P32 | surgical suture material |
Opsite moisture vapour permable spray dressing | Smith&Nephew | REF 66004978, PZN- 02063507 | surgical suture material |
Adhesive aperture drape | Barrier | REF 904622 | sterile OP tissue |
gauze swap Gazin®; steril; 10×10 cm | Lohmann&Rauscher | REF 18506 | sterile OP tissue |
Raucotupf cotton tipped applicators | Lohmann&Rauscher | REF 11969 | applicator |
Corning® Matrigel Basement Membrane Matrix | Corning | Cat.-No.: 354234 | Basement Membrane Matrix |
iodine solution Braunol (7,5g povidone iodine) | B.Braun Melsungen AG | Item number: 18839 | desinfection |
MACS® Tissue Storage Solution | Miltenyi Biotec GmbH | Order No.:130-100-008 | storage solution |
Formafix 4% | Grimm med. Logistik GmbH | Item number: F10010G | fixation solution |
Software FreezerworksBasic | Dataworks Development, Inc | — | sample organization |
Zebra TLP 2844 printer | Zebra | — | label printer |