Summary

Istituzione di un modello di ratto di occlusione sagittale-seno superiore tramite un metodo thread-embolismo

Published: July 04, 2021
doi:

Summary

Qui, stabiliamo un nuovo modello di ratto Sprague-Dawley (SD) di trombosi sagittale superiore (SSS) tramite un metodo di embolizzazione del filo e la stabilità e l’affidabilità del modello sono state verificate.

Abstract

I meccanismi che contribuiscono all’insorgenza naturale della trombosi venosa cerebrale del seno (CVST) sono per lo più sconosciuti e una varietà di fattori incontrollabili sono coinvolti nel decorso della malattia, con conseguenti grandi limitazioni nella ricerca clinica. Pertanto, la creazione di modelli animali CVST stabili in grado di standardizzare una varietà di fattori confondenti incontrollabili ha contribuito ad aggirare le carenze nella ricerca clinica. Negli ultimi decenni sono stati costruiti diversi modelli animali CVST, ma i risultati basati su questi modelli sono stati incoerenti e incompleti. Pertanto, al fine di esplorare ulteriormente i meccanismi fisiopatologici della CVST, è necessario stabilire un modello animale nuovo e altamente compatibile, che abbia un importante valore pratico e significato scientifico per la diagnosi e il trattamento del CVST. Nel presente studio, è stato stabilito un nuovo modello di ratto Sprague-Dawley (SD) di trombosi superiore del seno sagittale (SSS) attraverso un metodo di embolizzazione del filo e la stabilità e l’affidabilità del modello sono state verificate. Inoltre, abbiamo valutato i cambiamenti nel flusso sanguigno venoso cerebrale nei ratti dopo la formazione di CVST. Collettivamente, il modello SSS-trombosi del ratto SD rappresenta un nuovo modello animale CVST che è facilmente stabilibile, riduce al minimo i traumi, produce una buona stabilità e consente di controllare con precisione la tempistica e la posizione ischemica.

Introduction

La trombosi venosa cerebrale (CVST) è una malattia rara del sistema venoso cerebrale che rappresenta solo lo 0,5-1,0% di tutte le cause di ictus ma ha un tasso di occorrenza relativamente elevato nei bambini e nei giovaniadulti 1. Durante l’autopsia, la CVST è stata trovata come la causa del 10% dei decessi per malattia cerebrovascolare2. La trombosi può verificarsi in qualsiasi parte del sistema venoso intracraniale. Il seno sagittale superiore (SSS) è una delle aree più comunemente colpite in CVST e può coinvolgere più vasi sanguigni. A causa della stenosi o dell’occlusione dei seni venosi, il ritorno venoso intracraniciale è bloccato, che è spesso accompagnato da un aumento della pressione intracranale3. Le manifestazioni cliniche del CVST sono complesse e variano nel tempo; sebbene vi sia una mancanza di specificità dei sintomi, i sintomi più comuni includono mal di testa (77,2%), convulsioni (42,7%) e deficit neurologici (39,9%). Nei casi più gravi, il coma e persino la morte possonoverificarsi 4,5. Negli ultimi anni, a causa del miglioramento generale degli standard medici e sanitari e della consapevolezza della salute pubblica, la proporzione di fattori di rischio correlati è cambiata, la percentuale di traumi e infezioni è diminuita e la percentuale di CVST causata da gravidanza, puerperium, contraccettivi orali e altri motivi è gradualmenteaumentata di 5.

Al momento, la patogenesi del CVST non è ancora ben compresa. Per esplorare in profondità il CVST, è necessaria un’ulteriore ricerca fisiopatica. Tuttavia, la maggior parte di questi metodi di ricerca sono invasivi e quindi difficili da implementare clinicamente. A causa di molti limiti della ricerca clinica, i modelli animali hanno vantaggi insostituibili in termini di ricerca di base e traslazione.

La causa della CVST è complessa, in quanto il suo esordio iniziale è spesso non riconosciuto e la posizione della formazione di trombo è altamente variabile. Fortunatamente, i modelli animali possono ottenere un migliore controllo di questi fattori. Negli ultimi decenni, è stata stabilita una varietà di modelli animali CVST e ogni modello ha i suoi svantaggi. Secondo diversi metodi di produzione, possono essere approssimativamente suddivisi nelle seguenti categorie: il semplice modello di legatura SSS6,7; l’acceleratore di iniezione interna SSS modello8; la trombosi SSS indotta dal cloruro ferrico modello9; la trombosi SSS indotta fotochimica modello10; e l’embolia-occlusione autoprodista modello SSS11. Tuttavia, la maggior parte di questi modelli non è in grado di aggirare i danni invasivi alla corteccia cerebrale dell’animale e non è in grado di controllare con precisione il tempo e la posizione ischemica. In alcuni modelli, il trombo si ricanalizzerà spontaneamente; in altri modelli, l’SSS diventa permanentemente occluso. Inoltre, operazioni complicate e/o lesioni gravi possono influire sui successivi risultati fisiopatologici in questi modelli.

Nel presente studio, una spina di filettatura è stata inserita nel SSS dei ratti Sprague-Dawley (SD) per stabilire con successo un modello CVST che riduceva al minimo i danni, permetteva una controllabilità precisa e produceva una buona stabilità. Inoltre, la risonanza magnetica (MRI) di piccoli animali e l’imaging del flusso sanguigno con macchie laser sono state combinate per verificare l’efficacia del modello. Abbiamo valutato i cambiamenti nel flusso sanguigno cerebrale prima e dopo la definizione del nostro modello, nonché valutato la stabilità del nostro modello, gettando le basi per ulteriori studi che esplorano l’occorrenza, lo sviluppo e i relativi meccanismi fisiopatologici del CVST.

Protocol

Le procedure che coinvolgono soggetti animali sono state approvate dal Comitato per le norme mediche e l’etica dell’Università medica di Wenzhou e sono in conformità con la legislazione cinese sull’uso e la cura degli animali da laboratorio. 1. Preparazione della spina del filo, ratti SD e attrezzature sperimentali Utilizzare un filo di nylon con un diametro di 0,28 mm come corpo principale della spina del filo.NOTA: La morbidezza e la durezza del filo di nylon dovrebbero esser…

Representative Results

Per stabilire il modello SSS-trombosi del ratto SD tramite il metodo di sutura, la sutura deve essere preparata in anticipo(figura 1A)e devono essere preparate le attrezzature necessarie per l’esperimento(figura 1B). A causa della delicatezza dell’operazione, la preparazione del modello deve essere completata al microscopio di sezionamento. I passaggi principali sono riportati nella figura 2. Per facilitare la descrizione dei dettag…

Discussion

In questo studio, è stato stabilito con successo un nuovo tipo di modello CVST inserendo una spina di filettatura autoprodurata nelle SSS dei ratti SD. Inoltre, l’imaging del flusso sanguigno con macchie laser e la risonanza magnetica di piccoli animali sono stati combinati per monitorare i cambiamenti nel flusso sanguigno sulla superficie cerebrale dei ratti SD prima e dopo l’embolizzazione al fine di standardizzare la tempistica e la posizione ischemica.

Nel 1989, Longa et al.<sup class="xr…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo studio è stato supportato dalla Fondazione per la ricerca scientifica per i talenti di alto livello, Fujian University of Traditional Chinese Medicine (talenti X2019002).

Materials

2 mL syringe Becton,Dickinson and Company 301940
brain stereotaxic instrument Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 68025
dissecting microscope Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
high-speed skull drill Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd 78046
laser-speckle blood-flow imaging system Wuhan SIM Opto-technology Co. SIM BFI-HR PRO
needle holder Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F31022-12
needle thread Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F33303-08
scissors Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd S13029-14
silica gel Heraeus Kulzer 302785
small animal anesthesia machine Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd R540
small-animal MRI Bruker Medical GmbH Biospec 94/30 USR
tweezers Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F11029-11
vascular forceps Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd F22003-09

Referências

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Citar este artigo
Jiang, W., Jin, C., Xu, W., Li, Y., Lin, Y., Liang, S., Wang, W. Establishment of a Rat Model of Superior Sagittal-Sinus Occlusion via a Thread-Embolism Method. J. Vis. Exp. (173), e62118, doi:10.3791/62118 (2021).

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