Summary

דגימת רקמת שומן תת-עורית אנושית באמצעות טכניקת שאיבת שומן קטנה

Published: September 27, 2021
doi:

Summary

כתב היד והסרטון הנלווה אליו מדגימים טכניקת ביופסיה מלעורית לקבלת דגימות של רקמת שומן תת עורית מאזורים המקיפים את הטבור. שיטה זו היא דרך זולה ויעילה לחקור מגוון פרמטרים (למשל, ביטוי גנים או חלבונים, פעילות אנזימים, תכולת שומנים) בתוך רקמת השומן.

Abstract

מחקרים על רקמת שומן מועילים בהבנת מצבים מטבוליים ואחרים. רקמת שומן תת עורית אנושית נגישה. עם הכשרה מתאימה והקפדה על טכניקה אספטית, דגימות שומן תת עוריות ניתן להשיג בבטחה וביעילות בסביבה לא קלינית על ידי חוקרים. לאחר מתן הרדמה מקומית צידית לטבור, מחט 14 גרם המחוברת למזרק 5 או 10 מ”ל מוחדרת דרך העור לרקמה התת עורית. תחת יניקה, המזרק מועבר בתנועה הדדית, חיתוך כדי לבודד שברי רקמת שומן. משיכת הבוכנה מספיקה כדי להבטיח כי שברי רקמת השומן שואפים דרך המחט לתוך המזרק. ביופסיה בודדת יכולה לאסוף כ-200 מ”ג רקמה. טכניקת ביופסיה זו בטוחה מאוד הן למשתתפים והן לצוות המחקר. בעקבות הביופסיה, המשתתפים יכולים לחדש את רוב הפעילויות היומיומיות, אם כי הם צריכים להימנע משחייה ופעילויות מאומצות מדי במשך 48 שעות כדי למנוע דימום מוגזם. המשתתפים יכולים לעבור בבטחה 2 ביופסיות תוך יום אחד, כלומר ניתן ליישם את הטכניקה במחקרי התערבות חריפה לפני-אחרי.

Introduction

רקמת השומן יכולה לספק מידע שימושי על תפקוד חילוף החומרים של בני אדם. רקמת השומן התת עורית האנושית נגישה בקלות. טכניקה למיצוי רקמת שומן תת עורית תוארה לראשונה באמצע שנות ה -801; מאז, הפרוטוקול הראשוני שופר כדי להגדיל את התשואה ולשפר את הסבילות של משתתפי המחקר. רקמת שומן תת עורית ניתן לקבל מאתרים רבים, בדרך כלל מן glutei1 ואזור הבטן2. דגימות מהאחרונים עשויות להיות רצויות יותר מכיוון שהן מספקות מידע בעל ערך רב יותר בהקשרים הקשורים למחלות מטבוליות3.

ביופסיית רקמת שומן תת עורית בשיטת מיני-שאיבת שומן יכולה להתבצע בבטחה וביעילות במסגרת לא קלינית. לאחר הכשרה מתאימה על ידי רופא מוסמך ושימוש בטכניקה אספטית קפדנית, חוקרים יכולים לבצע ביופסיות אלה באופן שגרתי עם סיכון מינימלי הן למשתתפים והן לחוקרים. צוות הביופסיה חייב להיות מורכב משני אנשים לפחות: האדם שיבצע את הביופסיה ועוזר.

על האחראי על הביופסיה מוטלת המשימה לאשר את זהות המשתתף, לבדוק שהמשתתף יכול לעבור את ההליך בבטחה (ראה שלבי פרוטוקול 2.1-2.4 להלן), לוודא שהמשתתף מרגיש בנוח לאורך כל ההליך, להבטיח שמירה על טכניקה סטרילית לאורך כל ההליך, לבצע את ההליך ולספק למשתתף נהלים בעל פה ובכתב לאחר הטיפול. תפקידו של העוזר הוא לטפל ולעבד במהירות את רקמת השומן המתקבלת לצורך ניתוח ו/או אחסון מאוחרים יותר. העוזר גם עוזר בכך שהוא “הידיים הלא סטריליות” ומבטיח שהמשתתף יהיה רגוע לאורך כל ההליך. מטרת הסרטון והמאמר הזה היא לתאר את הליך הביופסיה שלב אחר שלב כדי להשיג בבטחה רקמת שומן תת עורית מאזור הבטן.

Protocol

הערה: ועדת המחקר הפולשני או הקליני של אוניברסיטת סטירלינג NHS אישרה את הליך הביופסיה המתואר להלן. כל המחקרים בהליך זה חייבים להיות מאושרים על ידי ועדת האתיקה העצמאית המתאימה. על לוקח הביופסיה להשלים הכשרה פורמלית בטכניקה המתוארת בהתאם לדרישות המוסד שלו. בדרך כלל, זה כרוך בהתבוננות בהדגמה ש?…

Representative Results

הליך הביופסיה המתואר של רקמת השומן הוא טכניקה יעילה ובעלת סיכון נמוך עבור חוקרים להשיג דגימות רקמת שומן תת עורית ממתנדבים אנושיים. ביצענו 39 ביופסיות רקמת שומן תת עורית באמצעות ההליך המתואר ב-11 נשים בריאות במשקל תקין (גיל, 27.4 ± 3.3 שנים; מדד מסת גוף (BMI), 22.6 ± 1.5 ק”ג2). כל המשתתפים הגיעו למעב?…

Discussion

הפרוטוקול המתואר והווידאו המשויך אליו מספקים סקירה שלב אחר שלב של טכניקת שאיבת שומן זעירה לקבלת דגימות רקמת שומן תת עורית מאזור הבטן. קבוצת מחקר זו ביצעה בסך הכל 124 ביופסיות במשך 19 חודשים ללא תופעות לוואי בקרב המשתתפים. ההליך בטוח וקשור לסיכון מינימלי למשתתפים או לצוות הביופסיה, בתנאי שאמ?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

למחברים אין מימון להצהיר.

Materials

Item: 14 G needle
14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm
B Braun 4665473 Per biopsy: 1
Item: 21 G needle
21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm
Terumo AN*2138R1 Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle
26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm
BD 303800 Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe
5 mL luer
DB plastipak 302187 Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing
Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5
Smith & Nephew 6600709 Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel
Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10
Swann Morton /0501 Per biopsy: 1
Item: Icepack
BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm
NuCare F711 Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic
Videne antiseptic solution
Ecolab Videne 3030440 Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine
Lidocaine 2% injection 5 mL
B Braun 3558553 Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves
Starguard sensitive powder free nitrile gloves
Starguard SG-N-S Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9%
Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP
BBraun S8004-5384 Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution*
RNAlater Stabilization Solution
ThermoFisher Scientific AM7020 Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps
Sterile forceps
Rocialle RML109-006 Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs
Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm
Prestige 1860 Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves
Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves
Prestige S: P4301
M:P3302
L:P3301
Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes
1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes
StarLab I1415-5510 Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet
Paper plain white 90 x 90 cm
Rocialle RML 126-216 Per biopsy: 1
Item: Weighing boat
Diamond shape weigh boats
Heathrow Scientific HS1427C Per biopsy: 1
* denotes optional materials

Referências

  1. Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. American Journal of Clinical Nutrition. 42 (2), 317-322 (1985).
  2. Moran, C. N., et al. Effects of diabetes family history and exercise training on the expression of adiponectin and leptin and their receptors. Metabolism. 60 (2), 206-214 (2011).
  3. Jialal, I., Devaraj, S. Subcutaneous adipose tissue biology in metabolic syndrome. Hormone Molecular Biology and Clinical Investigation. 33 (1), (2018).
  4. WHO Guidelines on hand hygiene in health care: a summary. World Health Organization Available from: https://www.who.int/gpsc/5may/tools/who_guidelines-handhygiene_summary.pdf (2009)
  5. Kettwich, L. G., et al. New device technologies for subcutaneous fat biopsy. Amyloid. 19 (2), 66-73 (2012).
  6. Preston, R. M. Aseptic technique: evidence-based approach for patient safety. British Journal of Nursing. 14 (10), 540-546 (2005).
  7. Handiyani, H., Meily Kurniawidjaja, L., Irawaty, D., Damayanti, R. The effective needle stick injury prevention strategies for nursing students in the clinical settings: a literature review. Enfermeria Clinica. 28, 167-171 (2018).
  8. Raggio, B. S., Barton, B. M., Kandil, E., Friedlander, P. L. Association of continued preoperative aspirin use and bleeding complications in patients undergoing thyroid surgery. JAMA Otolaryngology-Head & Neck Surgery. 144, 335 (2018).
  9. Cartwright, I. J., Pockley, A. G., Galloway, J. H., Greaves, M., Preston, F. E. The effects of dietary omega-3 polyunsaturated fatty acids on erythrocyte membrane phospholipids, erythrocyte deformability and blood viscosity in healthy volunteers. Atherosclerosis. 55 (3), 267-281 (1985).
  10. Hemmrich, K., Denecke, B., Paul, N. E., Hoffmeister, D., Pallua, N. RNA isolation from adipose tissue: an optimized procedure for high RNA yield and integrity. Laboratory Medicine. 41 (2), 104-106 (2010).
  11. Chachopoulos, V., et al. A technique for subcutaneous abdominal adipose tissue biopsy via a non-diathermy method. Journal of Visual Experiments: JoVE. (127), e55593 (2017).
  12. Civelek, M., et al. Genetic regulation of human adipose microRNA expression and its consequences for metabolic traits. Human Molecular Genetics. 22 (15), 3023-3037 (2013).
  13. Chen, Y. C., et al. Feeding influences adipose tissue responses to exercise in overweight men. American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 313 (1), 84-93 (2017).
  14. Mendham, A. E., et al. Exercise training results in depot-specific adaptations to adipose tissue mitochondrial function. Scientific Reports. 10 (1), 3785 (2020).
  15. Carswell, K. A., Lee, M. J., Fried, S. K. Culture of isolated human adipocytes and isolated adipose tissue. Methods in Molecular Biology. 806, 203-214 (2012).
  16. Arner, P., Andersson, D. P., Backdahl, J., Dahlman, I., Ryden, M. Weight gain and impaired glucose metabolism in women are predicted by inefficient subcutaneous fat cell lipolysis. Cell Metabolism. 28 (1), 45-54 (2018).
  17. Mutter, G., et al. Comparison of frozen and RNALater solid tissue storage methods for use in RNA expression microarrays. BMC genomics. 5, 88 (2004).
  18. Coleman, S. Structural fat grafting: more than a permanent filler. Plastic and Reconstructive Surgery. 118, 108-120 (2018).
check_url/pt/62635?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
MacGregor, K. A., Rodriguez-Sanchez, N., Barwell, N. D., Gallagher, I. J., Moran, C. N., Di Virgilio, T. G. Human Subcutaneous Adipose Tissue Sampling Using a Mini-Liposuction Technique. J. Vis. Exp. (175), e62635, doi:10.3791/62635 (2021).

View Video