एक मिनी-लिपोसक्शन तकनीक का उपयोग करके मानव चमड़े के नीचे वसा ऊतक नमूनाकरण

Summary

पांडुलिपि और संबंधित वीडियो नाभि के आसपास के क्षेत्रों से चमड़े के नीचे के वसा ऊतक के नमूने प्राप्त करने के लिए एक पर्क्यूटेनियस बायोप्सी तकनीक का प्रदर्शन करते हैं। यह विधि वसा ऊतक के भीतर मापदंडों (जैसे, जीन या प्रोटीन अभिव्यक्ति, एंजाइम गतिविधि, लिपिड सामग्री) की एक श्रृंखला की जांच करने का एक कम जोखिम और कुशल तरीका है।

Abstract

वसा ऊतक पर अध्ययन चयापचय और अन्य स्थितियों को समझने में उपयोगी हैं। मानव चमड़े के नीचे वसा ऊतक सुलभ है। उचित प्रशिक्षण और सड़न रोकनेवाला तकनीक के सख्त पालन के साथ, चमड़े के नीचे वसा नमूने सुरक्षित रूप से और कुशलता से शोधकर्ताओं द्वारा एक गैर-नैदानिक सेटिंग में प्राप्त किए जा सकते हैं। नाभि के लिए स्थानीय संवेदनाहारी पार्श्व के प्रशासन के बाद, 5 या 10 मिलीलीटर सिरिंज से जुड़ी 14 जी सुई चमड़े के नीचे के ऊतकों में त्वचा के माध्यम से डाली जाती है। चूषण के तहत, सिरिंज को वसा ऊतक के टुकड़ों को अलग करने के लिए एक पारस्परिक, टुकड़ा करने की क्रिया गति में ले जाया जाता है। सवार को वापस लेना यह सुनिश्चित करने के लिए पर्याप्त है कि वसा ऊतक के टुकड़े सुई के माध्यम से सिरिंज में आकांक्षा रखते हैं। एक बायोप्सी लगभग 200 मिलीग्राम ऊतक एकत्र कर सकती है। यह बायोप्सी तकनीक प्रतिभागियों और अनुसंधान कर्मचारियों दोनों के लिए बहुत सुरक्षित है। बायोप्सी के बाद, प्रतिभागी अधिकांश रोजमर्रा की गतिविधियों को फिर से शुरू कर सकते हैं, हालांकि उन्हें अत्यधिक रक्तस्राव से बचने के लिए 48 घंटे के लिए तैराकी और अत्यधिक ज़ोरदार गतिविधियों से बचना चाहिए। प्रतिभागी सुरक्षित रूप से एक दिन के भीतर 2 बायोप्सी से गुजर सकते हैं, जिसका अर्थ है कि तकनीक को तीव्र हस्तक्षेप अध्ययनों से पहले लागू किया जा सकता है।

Introduction

वसा ऊतक मनुष्यों के चयापचय समारोह पर उपयोगी जानकारी प्रदान कर सकता है। मानव चमड़े के नीचे वसा ऊतक आसानी से सुलभ है। चमड़े के नीचे वसा ऊतक निष्कर्षण के लिए एक तकनीक पहली बार 80 के दशक के मध्य में वर्णित की^{गई थी 1}; तब से, प्रारंभिक प्रोटोकॉल उपज बढ़ाने और अध्ययन प्रतिभागी सहनशीलता में सुधार करने के लिए सुधार किया गया है। चमड़े के नीचे वसा ऊतक कई साइटों से प्राप्त किया जा सकता है, आमतौर पर ग्लूटी¹ और पेट क्षेत्र² से। उत्तरार्द्ध के नमूने अधिक वांछनीय हो सकते हैं क्योंकि वे चयापचय रोग से संबंधित^{संदर्भों} में अधिक मूल्यवान जानकारी प्रदान करते हैं 3.

मिनी-लिपोसक्शन विधि का उपयोग करके चमड़े के नीचे वसा ऊतक बायोप्सी को गैर-नैदानिक सेटिंग में सुरक्षित और कुशलता से किया जा सकता है। बोर्ड-प्रमाणित चिकित्सक द्वारा उचित प्रशिक्षण के बाद और सख्त सड़न रोकनेवाला तकनीक का उपयोग करके, शोधकर्ता नियमित रूप से प्रतिभागी और जांचकर्ताओं दोनों के लिए न्यूनतम जोखिम के साथ इन बायोप्सी का प्रदर्शन कर सकते हैं। बायोप्सी टीम में कम से कम 2 व्यक्ति शामिल होने चाहिए: वह व्यक्ति जो बायोप्सी करेगा और एक सहायक।

बायोप्सी के लिए जिम्मेदार व्यक्ति को प्रतिभागी की पहचान की पुष्टि करने का काम सौंपा जाता है, प्रतिभागी की जांच सुरक्षित रूप से प्रक्रिया से गुजर सकती है (नीचे प्रोटोकॉल चरण 2.1-2.4 देखें), यह सुनिश्चित करना कि प्रतिभागी पूरी प्रक्रिया में आरामदायक है, यह सुनिश्चित करना कि बाँझ तकनीक पूरी प्रक्रिया में बनाए रखी जाती है, प्रक्रिया को पूरा करती है, और प्रतिभागी को मौखिक और लिखित देखभाल प्रक्रियाओं के साथ प्रदान करती है। सहायक की भूमिका बाद के विश्लेषण और / या भंडारण के लिए प्राप्त वसा ऊतक को संभालना और तेजी से संसाधित करना है। सहायक “गैर-बाँझ हाथ” होने और यह सुनिश्चित करने में भी मदद करता है कि प्रतिभागी पूरी प्रक्रिया में आसानी से है। इस वीडियो और पेपर का उद्देश्य पेट क्षेत्र से चमड़े के नीचे वसा ऊतक को सुरक्षित रूप से प्राप्त करने के लिए चरण-दर-चरण बायोप्सी प्रक्रिया का वर्णन करना है।

Protocol

नोट: स्टर्लिंग एनएचएस विश्वविद्यालय, आक्रामक, या नैदानिक अनुसंधान समिति ने नीचे वर्णित बायोप्सी प्रक्रिया को मंजूरी दे दी। इस प्रक्रिया का उपयोग करने वाले सभी शोध अध्ययनों को उपयुक्त स्वतंत्र नैतिक?…

Representative Results

वर्णित वसा ऊतक बायोप्सी प्रक्रिया शोधकर्ताओं के लिए मानव स्वयंसेवकों से चमड़े के नीचे वसा ऊतक के नमूने प्राप्त करने के लिए एक कुशल और कम जोखिम वाली तकनीक है। हमने 11 स्वस्थ, सामान्य वजन वाली महिलाओं (आय?…

Discussion

वर्णित प्रोटोकॉल और संबद्ध वीडियो पेट क्षेत्र से चमड़े के नीचे वसा ऊतक के नमूने प्राप्त करने के लिए एक मिनी-लिपोसक्शन तकनीक का चरण-दर-चरण अवलोकन प्रदान करते हैं। इस शोध समूह ने 19 महीनों के दौरान कुल 124 बा…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials