Amostragem de tecido adiposo subcutâneo humano usando uma técnica de mini-lipoaspiração

Summary

O manuscrito e o vídeo associado demonstram uma técnica de biópsia percutânea para obter amostras de tecido adiposo subcutâneo de áreas ao redor do umbigo. Este método é uma maneira de baixo risco e eficiente para investigar uma série de parâmetros (por exemplo, expressão genética ou proteica, atividade enzimática, conteúdo lipídico) dentro do tecido adiposo.

Abstract

Estudos sobre tecido adiposo são úteis na compreensão metabólica e outras condições. O tecido adiposo subcutâneo humano é acessível. Com treinamento adequado e rigorosa adesão à técnica asséptica, amostras de adiposos subcutâneos podem ser obtidas de forma segura e eficiente em um ambiente não clínico pelos pesquisadores. Após a administração do lado anestésico local ao umbigo, uma agulha de 14 G presa a uma seringa de 5 ou 10 mL é inserida através da pele no tecido subcutâneo. Sob sucção, a seringa é movida em um movimento recíproco e fatiado para isolar fragmentos de tecido adiposo. Retirar o êmbolo é suficiente para garantir que fragmentos de tecido adiposo sejam aspirados através da agulha na seringa. Uma única biópsia pode coletar cerca de 200 mg de tecido. Esta técnica de biópsia é muito segura tanto para os participantes quanto para a equipe de pesquisa. Após a biópsia, os participantes podem retomar a maioria das atividades cotidianas, embora evitem natação e atividades excessivamente extenuantes por 48h para evitar sangramento excessivo. Os participantes podem realizar duas biópsias com segurança em um único dia, o que significa que a técnica pode ser aplicada em estudos de intervenção aguda antes do pós-adoeça.

Introduction

O tecido adiposo pode fornecer informações úteis sobre a função metabólica dos seres humanos. O tecido adiposo subcutâneo humano é facilmente acessível. Uma técnica para extração subcutânea de tecido adiposo foi descrita pela primeira vez em meados dos anos 80¹; desde então, o protocolo inicial foi aprimorado para aumentar o rendimento e melhorar a tolerabilidade dos participantes do estudo. O tecido adiposo subcutâneo pode ser obtido de inúmeros locais, mais comumente a partir da glutei¹ e área abdominal². As amostras deste último podem ser mais desejáveis, pois fornecem informações mais valiosas em contextos relacionados à doença metabólica³.

A biópsia subcutânea do tecido adiposo usando o método de mini-lipoaspiração pode ser realizada de forma segura e eficiente em um ambiente não clínico. Após o treinamento adequado por um médico certificado pelo conselho e usando uma técnica asséptica rigorosa, os pesquisadores podem realizar rotineiramente essas biópsias com risco mínimo tanto para o participante quanto para os pesquisadores. A equipe de biópsia deve ser composta por pelo menos 2 indivíduos: a pessoa que fará a biópsia e um assistente.

O responsável pela biópsia é incumbido de confirmar a identidade do participante, verificar se pode submeter com segurança ao procedimento (veja as etapas do protocolo 2.1-2.4 abaixo), garantindo que o participante esteja confortável durante todo o procedimento, garantindo a manutenção da técnica estéril durante todo o procedimento, realizando o procedimento e fornecendo ao participante procedimentos verbais e escritos após o atendimento. O papel do assistente é manusear e processar rapidamente o tecido adiposo obtido para análise e/ou armazenamento posteriores. O assistente também ajuda por ser as “mãos não estéreis” e garantir que o participante esteja à vontade durante todo o procedimento. O objetivo deste vídeo e papel é descrever o procedimento de biópsia passo a passo para obter com segurança tecido adiposo subcutâneo da área abdominal.

Protocol

NOTA: O Comitê de Pesquisa Clínica da Universidade de Stirling, Invasivo ou Clínico aprovou o procedimento de biópsia descrito abaixo. Todos os estudos de pesquisa que utilizam esse procedimento devem ser aprovados pelo comitê de ética independente apropriado. O fazsocedor de biópsia deve ter concluído o treinamento formal na técnica descrita de acordo com as exigências de sua instituição. Normalmente, isso envolve observar uma demonstração da técnica de biópsia de tecido adiposo descrita por um médico c…

Representative Results

O procedimento descrito de biópsia de tecido adiposo é uma técnica eficiente e de baixo risco para os pesquisadores obterem amostras de tecido adiposo subcutâneo de voluntários humanos. Foram realizadas 39 biópsias subcutâneas de tecido adiposo utilizando o procedimento descrito em 11 mulheres saudáveis e de peso normal (idade, 27,4 ± 3,3 anos; índice de massa corporal (IMC), 22,6 ± 1,5 kg.m2). Todos os participantes compareceram ao laboratório entre 7h e 10h, após um período de jejum de 8 a 12 h…

Discussion

O protocolo descrito e o vídeo associado fornecem uma visão geral passo a passo de uma técnica de mini-lipoaspiração para obter amostras de tecido adiposo subcutâneo da área abdominal. Este grupo de pesquisa realizou um total de 124 biópsias ao longo de 19 meses sem efeitos adversos nos participantes. O procedimento é seguro e associado ao risco mínimo aos participantes ou à equipe de biópsia, desde que sejam seguidas as medidas de segurança descritas. A técnica asséptica (incluindo abertura e dispensaçã…

Materials

Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm	B Braun	4665473	Per biopsy: 1
Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm	Terumo	AN*2138R1	Per biopsy: 2
Item: 26 G  needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm	BD	303800	Per biopsy: 2
Item: 5 mL syringe 5 mL luer	DB plastipak	302187	Per biopsy: 2
Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5	Smith & Nephew	6600709	Per biopsy: 1
Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10	Swann Morton	/0501	Per biopsy: 1
Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm	NuCare	F711	Per biopsy: 1
Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution	Ecolab Videne	3030440	Per biopsy: q.s
Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL	B Braun	3558553	Per biopsy: 5 mL
Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves	Starguard	SG-N-S	Per biopsy: pair
Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP	BBraun	S8004-5384	Per biopsy: q.s.
Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution	ThermoFisher Scientific	AM7020	Per biopsy: q.s
Item: Sterile forceps Sterile forceps	Rocialle	RML109-006	Per biopsy: 1
Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm	Prestige	1860	Per biopsy: 5
Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves	Prestige	S: P4301 M:P3302 L:P3301	Per biopsy: pair
Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes	StarLab	I1415-5510	Per biopsy: q.s
Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm	Rocialle	RML 126-216	Per biopsy: 1
Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats	Heathrow Scientific	HS1427C	Per biopsy: 1
* denotes optional materials