Summary

चूहे के घुटने के चक्रीय लोडिंग-प्रेरित इंट्रा-आर्टिकुलर कार्टिलेज लेशन मॉडल उत्पन्न करने के लिए एक गैर-इनवेसिव विधि

Published: July 05, 2021
doi:

Summary

यहां, हम चूहे के घुटने के चक्रीय लोडिंग-प्रेरित इंट्रा-आर्टिकुलर कार्टिलेज घाव मॉडल को प्रस्तुत करते हैं, जो 20 एन से अधिक 60 चक्रीय संपीड़न द्वारा उत्पन्न होता है, जिसके परिणामस्वरूप चूहों में ऊरु कोंडिलर उपास्थि को नुकसान होता है।

Abstract

प्राथमिक ऑस्टियोआर्थराइटिस (ओए) के पैथोफिज़ियोलॉजी स्पष्ट नहीं है। हालांकि, अपेक्षाकृत कम आयु समूहों में ओए का एक विशिष्ट उपवर्गीकरण संभवतः आर्टिकुलर कार्टिलेज क्षति और लिगामेंट ऐंठन के इतिहास के साथ सहसंबद्ध है। घुटने के ओए के सर्जिकल पशु मॉडल पोस्ट-ट्रॉमेटिक ओए की शुरुआत और प्रगति को समझने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं और इस बीमारी के लिए नए उपचारों के विकास में सहायता करते हैं। हालांकि, गैर-सर्जिकल मॉडल को हाल ही में दर्दनाक सूजन से बचने के लिए माना गया है जो हस्तक्षेप के मूल्यांकन को प्रभावित कर सकता है।

इस अध्ययन में, विवो चक्रीय संपीड़ित लोडिंग द्वारा प्रेरित एक इंट्रा-आर्टिकुलर कार्टिलेज घाव चूहा मॉडल विकसित किया गया था, जिसने शोधकर्ताओं को (1) भार की इष्टतम परिमाण, गति और अवधि निर्धारित करने की अनुमति दी जो फोकल उपास्थि क्षति का कारण बन सकती है; (2) चोंड्रोसाइट्स जीवन शक्ति में पोस्ट-ट्रॉमेटिक स्पैटियोटेम्पोरल पैथोलॉजिकल परिवर्तनों का आकलन करें; और (3) विनाशकारी या सुरक्षात्मक अणुओं की हिस्टोलॉजिकल अभिव्यक्ति का मूल्यांकन करें जो संयुक्त संपीड़ित भार के खिलाफ अनुकूलन और मरम्मत तंत्र में शामिल हैं। यह रिपोर्ट एक चूहे के मॉडल में इस उपन्यास उपास्थि घाव के लिए प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का वर्णन करती है।

Introduction

परंपरागत रूप से, छोटे जानवरों में पोस्ट-ट्रॉमेटिक ऑस्टियोआर्थराइटिस (पीटीओए) की जांच के लिए एंटीरियर क्रूसिएट लिगामेंट (एसीएल) ट्रांससेक्शन या मेडियल मेनिस्कस की अस्थिरता को इष्टतम माना जाता है। हाल के वर्षों में, पीटीओए का अध्ययन करने के लिए गैर-इनवेसिव चक्रीय संपीड़न मॉडल का उपयोग किया गया है। यह मॉडल मूल रूप से यांत्रिक लोडिंग1 के लिए कैंसेलस हड्डी प्रतिक्रिया की जांच करने के लिए डिज़ाइन किया गया था और फिर पीटीओए अध्ययन 2,3,4,5,6 के लिए एक गैर-सर्जिकल पशु मॉडल के रूप में संशोधित किया गया था। तर्क एक आवधिक बाहरी बल लागू करके आर्टिकुलर कार्टिलेज को टक्कर देना है, जो भड़काऊ प्रतिक्रियाओं की एक श्रृंखला को ट्रिगर करता है। हालांकि, यह मॉडल केवल चूहों पर लागू किया गया है, और बड़े जानवरों पर लोड करने के उचित परिमाण पर चर्चा नहीं की गई है।

पिछले मॉडल के साथ एक और समस्या यह है कि उच्च-मात्रा प्रोटोकॉल में बहुत सारे चक्र शामिल थे, जिसके कारण कई नमूनों में सबकॉन्ड्रल हड्डी का अत्यधिक मोटा होना, एक अवांछित दुष्प्रभावथा। इसलिए, बड़े जानवरों के लिए उपयुक्त परिमाण और कम लोडिंग साइड इफेक्ट के साथ चक्रीय संपीड़न की एक नई विधि विकसितकी गई थी। वर्तमान लेख का समग्र लक्ष्य चूहों में गैर-इनवेसिव चक्रीय संपीड़न मॉडल के प्रोटोकॉल का वर्णन करना और उपास्थि अध: पतन के प्रतिनिधि परिणामों का निरीक्षण करना है। वर्तमान प्रोटोकॉल चूहों पर गैर-इनवेसिव चक्रीय संपीड़न मॉडल के आवेदन में रुचि रखने वाले पाठकों की मदद करेगा।

Protocol

प्रोटोकॉल को क्योटो विश्वविद्यालय की पशु अनुसंधान समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था (अनुमोदन संख्या: मेड क्यो 17616)। 1. चूहे के घुटने पर विवो चक्रीय संपीड़न में प्रदर्शन करें प्रयोगात्?…

Representative Results

20 एन चक्रीय लोडिंग के अधीन नमूनों में चोंड्रोसाइट्स व्यवहार्यता में अल्पकालिक परिवर्तन (1 घंटे और 12 घंटे) का एक प्रतिनिधि परिणाम प्राप्त किया गया था। जैसा कि चित्रा 3 में दिखाया गया है, मृत चो?…

Discussion

पहली बार, वर्तमान प्रोटोकॉल दिखाता है कि चूहों में पार्श्व ऊरु कोंडिल पर लोडिंग-प्रेरित उपास्थि घाव का एक मॉडल कैसे स्थापित किया जाए, जो माउस2 जैसे छोटे कृन्तकों में इंट्रा-आर्टिकुलर क्षति मॉ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस अध्ययन को जेएसपीएस काकेन्ही अनुदान (संख्या जेपी 18 एच 03129 और जेपी 18 के 19739) द्वारा समर्थित किया गया था।
इस शोध को एलायंस फॉर रीजनरेटिव रिहैबिलिटेशन रिसर्च एंड ट्रेनिंग (एआर 3 टी) से भी धन प्राप्त हुआ, जिसे यूनिस कैनेडी श्राइवर नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ चाइल्ड हेल्थ एंड ह्यूमन डेवलपमेंट (एनआईसीएचडी), नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ न्यूरोलॉजिकल डिसऑर्डर एंड स्ट्रोक (एनआईएनडीएस), और नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ बायोमेडिकल इमेजिंग एंड बायोइंजीनियरिंग (एनआईबीआईबी) द्वारा पुरस्कार संख्या पी 2 सीएचडी086843 के तहत राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान द्वारा समर्थित किया गया है। सामग्री पूरी तरह से लेखकों की जिम्मेदारी है और जरूरी नहीं कि राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थानों के आधिकारिक विचारों का प्रतिनिधित्व करती है।

Materials

Anesthetic Apparatus for Small Animals SHINANO MFG CO.,LTD. SN-487-0T
Autograph AG-X Shimadzu Corp N.A. Precision Universal / Tensile Tester
Fluoview FV10i microscope Olympus Corp N.A. A fully automated confocal laser-scanning microscope
ISOFLURANE Inhalation Solution Pfizer Japan Inc. (01)14987114133400
LIVE/DEA Viability/Cytotoxicity Kit Thermo Fisher Scientific Japan Inc L3224 A quick and easy two-color assay to determine viability of cells
TRAPEZIUM X Software Shimadzu Corp N.A. Data processing software for Autograph AG-X

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Cite This Article
Ji, X., Nakahata, A., Zhao, Z., Kuroki, H., Aoyama, T., Ito, A. A Non-Invasive Method for Generating the Cyclic Loading-Induced Intra-Articular Cartilage Lesion Model of the Rat Knee. J. Vis. Exp. (173), e62660, doi:10.3791/62660 (2021).

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