O presente estudo mostra o estabelecimento de três diferentes modelos de doação pulmonar (doação pós-morte encefálica, doação pós-morte circulatória e doação pós-choque hemorrágico). Compara os processos inflamatórios e distúrbios patológicos associados a esses eventos.
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Artigo de método
Estudo de modelos experimentais de doação de órgãos para transplante pulmonar
Neste artigo
Resumo
Resumo
Modelos experimentais são ferramentas importantes para a compreensão dos fenômenos etiológicos envolvidos em diversos eventos fisiopatológicos. Nesse contexto, diferentes modelos animais são utilizados para estudar os elementos desencadeantes da fisiopatologia da disfunção primária do enxerto após o transplante, a fim de avaliar possíveis tratamentos. Atualmente, podemos dividir os modelos experimentais de doação em dois grandes grupos: doação após morte encefálica e doação após parada circulatória. Além disso, os efeitos deletérios associados ao choque hemorrágico devem ser considerados quando se consideram modelos animais de doação de órgãos. Descrevemos o estabelecimento de três diferentes modelos de doação pulmonar (doação pós-morte encefálica, doação pós-morte circulatória e pós-doação de choque hemorrágico) e comparamos os processos inflamatórios e distúrbios patológicos associados a esses eventos. O objetivo é fornecer à comunidade científica modelos animais confiáveis de doação pulmonar para o estudo dos mecanismos patológicos associados e busca de novos alvos terapêuticos para otimizar o número de enxertos viáveis para transplante.
Introdução
Relevância clínica
O transplante de órgãos é uma opção terapêutica bem estabelecida para diversas patologias graves. Nos últimos anos, muitos avanços foram alcançados no campo clínico e experimental dos transplantes de órgãos, como maior conhecimento da fisiopatologia da disfunção primária do enxerto (PGD) e avanços nas áreas de terapia intensiva, imunologia e farmacologia 1,2,3. Apesar das conquistas e melhorias na qualidade dos procedimentos cirúrgicos e farmacológicos relacionados, a relação entre o número de órgãos disponíveis e o número de re....
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Protocolo
Os experimentos com animais foram submetidos ao Comitê de Ética para Uso e Cuidados com Animais de Experimentação da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (protocolo número 112/16).
1. Agrupamento de animais
- Atribuir aleatoriamente doze ratos machos Sprague Dawley (250-300 g) a um dos três grupos experimentais (n=4) para analisar e comparar os efeitos associados aos modelos animais.
- Atribuir animais ao grupo choque hemorrágico (SH, n=4): animais submetidos a cateterismo vascular com indução de choque hemorrágico + manutenção por 360 min + extração de bloqueio cardiopulmonar + prepar....
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Resultados
Pressão arterial média (PAM)
Para determinar as repercussões hemodinâmicas do TAB e da EH, a PAM foi avaliada ao longo dos 360 minutos do protocolo. A medida basal foi coletada após a remoção da pele e perfuração do crânio e antes da coleta de alíquotas de sangue para os animais submetidos a ME ou EH, respectivamente. Antes da indução com ME e EH, a PAM basal dos dois grupos foi semelhante (BD: 110,5 ± 6,1 vs. CC: 105,8 ± 2,3 mmHg; p=0,5; ANOVA de duas vias). Após a insuflação do cateter, o grupo BD a.......
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Discussão
Nos últimos anos, o crescente número de diagnósticos de morte encefálica fez com que se tornasse o maior provedor de órgãos e tecidos destinados a transplante. Esse crescimento, no entanto, tem sido acompanhado por um aumento incrível de doações após a morte circulatória. Apesar de sua natureza multifatorial, a maioria dos mecanismos desencadeantes das causas de morte inicia-se após ou acompanha o trauma com extensa perda de conteúdosanguíneo4,18.
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Divulgações
Gostaríamos de confirmar que não há conflitos de interesse conhecidos associados a esta publicação e que não houve apoio financeiro significativo para este trabalho que pudesse ter influenciado seu resultado.
Agradecimentos
Agradecemos à FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) pelo apoio financeiro.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Angiocath de calibre 14 | DB | 38186714 | Intubação orotraqueal |
| Brasuture | de seda 2.0 | AA553 | Fixação do tubo traqueal |
| Angiocath de calibre 24 | DB | 38181214 | Acesso arterial e venoso |
| Brasuture | AA551 | de seda 4.0 | Fixação de cânulas arteriais e venosas |
| Solução alcoólica de digluconato de clorexidina (2%). | Aparelho de | Pharma Y/N | Asepsis |
| Oster | Y/N | Dispositivo de recorte | |
| Balança de precisão | Shimadzu | D314800051 | Análise da relação peso úmido/seco |
| Barbitúrico (Tiopental) | Cristá lia | 18080003 | indução DC |
| (Fogarty-4F) | Edwards Life Since | 120804 | Extensor neonatal de indução BD |
| Embramed | 497267 | Utilizado como cateter com o auxílio do angiocath 24 G | |
| FlexiVent | Scireq | 1142254 | Análise dos parâmetros ventilatórios |
| Heparina | Blau Farmaceutica SA | 7000982-06 | Anticoagulante |
| Isoflurane | Cristá lia | 10,29,80,130 | Micropipeta de anestesia inalatória |
| (1000 µ L) | Eppendorf | 347765Z | Manuseio de líquidos de pequeno volume |
| Micropipeta (20 µ L) | Eppendorf | H19385F | Manuseio de líquidos de pequeno volume |
| Microscópio | Zeiss | 1601004545 | Assistência na visualização de estruturas para o procedimento cirúrgico |
| Monitor multiparamétrico | Dixtal | 101503775 | Registro MAP |
| Broca motorizada | Midetronic | MCA0439 | Utilizado para perfurar um furo de calibre 1 mm |
| Neubauer | Kasvi | D15-BL | Contagem de células |
| Laringoscópio pediátrico | Oxygel | Y/N | Assistência durante a intubação traqueal |
| Seringa (3 mL) | SR | 3330N4 | Hidratação e exsanguinação durante o protocolo HS |
| Transdutor de pressão | Edwards Life Since | P23XL | Registo MAP |
| Tubo traqueal metálico | Biomedical 006316/12 | Cânula rígida para análise com o ventilador FlexiVent | |
| Vaporizador de isoflurano | Harvard Bioscience | 1,02,698 | Sistema de anestesia |
| Ventilador mecânico para pequenos animais (683) | Harvard Apparatus | MA1 55-0000 | Ventilação mecânica |
| metodologia xMap | Millipore | RECYTMAG-65K-04 | Análise de marcadores inflamatórios |
Referências
- Paterno, F., et al. Clinical implications of donor warm and cold ischemia time in donor after circulatory death liver transplantation. Liver Transplantation. 25 (9), 1342-1352 (2019).
- Yusen, R. D., et al.
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Reimpressões e permissões
