Summary

Les gerbilles de Mongolie comme modèle animal de cicatrisation des plaies

Published: January 06, 2023
doi:

Summary

Cet article décrit un nouveau modèle animal développé pour étudier l’anatomie et l’histologie de la cornée et ses processus de guérison. Ce nouveau modèle animal utilise la gerbille de Mongolie, qui a une cornée présentant de nombreuses similitudes avec la cornée humaine.

Abstract

Les études sur la cicatrisation des plaies cornéennes sont menées depuis longtemps et ont permis de réduire la souffrance et de développer des traitements qui contribuent à améliorer la santé oculaire des patients. Historiquement, la guérison cornéenne a été étudiée chez des rongeurs tels que les souris et les rats, mais ces modèles pourraient ne pas imiter complètement les troubles humains. Cependant, les informations sur d’autres rongeurs tels que les gerbilles de Mongolie (Meriones unguiculatus) sont rares dans la recherche cornéenne.

Ici, nous décrivons une technique pour développer un nouveau modèle animal pour étudier la cicatrisation cornéenne après une kératectomie photoréfractive. En raison de la littérature limitée disponible sur la cornée de M. unguiculatus, nous décrivons également une analyse histologique de la cornée normale. Ces techniques de recherche peuvent également être utilisées dans l’étude des maladies oculaires en raison de la similitude entre les cornées des gerbilles mongoles et les humains en termes de génétique, d’anatomie et de physiologie.

Introduction

Certains des aspects les plus importants de la cicatrisation des plaies cornéennes, qui sont des préoccupations clés pour la chirurgie du segment antérieur, sont l’intégrité de l’architecture épithéliale, le maintien de la transparence du stroma cornéen et, enfin, le résultat en termes de propriétés réfractives de la cornée1.

La cornée est le tissu clair le plus externe à l’avant du globe oculaire et est donc sensible aux traumatismes, aux infections et aux brûlures; L’altération de la cicatrisation de ces plaies peut compromettre la santé visuelle2.

À l’heure actuelle, plusieurs modèles animaux sont disponibles pour étudier la cicatrisation cornéenne, et certains d’entre eux sont meilleurs que d’autres, selon les espèces et le type de mécanisme à étudier1. Il existe quelques enregistrements d’investigations antérieures sur la rétine des gerbilles2. Cependant, jusqu’à présent, il n’existe aucune littérature publiée sur les processus de cicatrisation dans la cornée de ces rongeurs.

Ici, nous présentons Meriones unguiculatus (gerbille de Mongolie) comme un modèle animal de cicatrisation des plaies dans la cornée. Les procédures pour provoquer la cicatrisation cornéenne après la kératectomie photoréfractive sont décrites, ce qui nous permet d’étudier les différents types de processus de cicatrisation cornéenne, de comprendre la cicatrisation des plaies en termes de phases dynamiques des tissus vivants et, enfin, de planifier les traitements futurs appropriés3. La kératectomie photothérapeutique est une technique hautement reproductible avec la possibilité de contrôler avec précision des paramètres tels que la profondeur et le diamètre de la lésion cornéenne4. De plus, cette technique ne nécessite pas de procédures avec des instruments chirurgicaux ou des solutions chimiques (par exemple, solution saline, formol, alcool, etc.) qui peuvent ajouter des variables spécifiques aux instruments ou à l’opérateur effectuant l’intervention5.

Trois gerbilles mâles de 6 mois de tailles et de poids similaires (environ 90 g) ont été utilisées pour l’expérience présentée dans cet article. Les procédures n’ont été effectuées que dans les yeux droits. Une gerbille (appelée gerbille 1 ou témoin) n’a pas subi de kératectomie photothérapeutique et a été énucléée pour évaluer toutes les structures oculaires normales. La kératectomie photothérapeutique implique l’administration contrôlée de la lumière ultraviolette excimère générée par laser à la cornée et a été développée afin d’effectuer une chirurgie réfractive6. Il a été utilisé chez d’autres rongeurs, tels que les souris7. Les deux autres gerbilles ont subi une kératectomie photothérapeutique. L’un d’eux a été énucléé à 24 h (appelé gerbille 2) et l’autre à 96 h après la chirurgie (appelé gerbille 3).

Pour réaliser cette expérience, une gerbille sélectionnée au hasard a été filmée pour chaque condition à étudier, mais cette expérience a déjà été réalisée avec 16 gerbilles au total pour chaque condition. Pour des raisons d’édition, il a été décidé d’utiliser une gerbille choisie au hasard pour chaque condition (trois gerbilles au total) comme exemple.

L’objectif principal de cette recherche est d’explorer le meilleur modèle animal disponible. Cependant, il est important de noter que toutes les espèces n’ont pas des caractéristiques oculaires similaires à celles de l’œil humain8. Cet article décrit la méthodologie utilisée pour étudier la cornée de Meriones unguiculatus et la procédure effectuée pour générer la lésion cornéenne, ce qui nous permet d’étudier le processus de guérison.

Protocol

Toutes les procédures de recherche ont été approuvées par la « Commission institutionnelle pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire » de l’Universidad Católica de Córdoba et ont suivi le Guide du Conseil national de recherches pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Ces procédures ont également été approuvées par les autorités de la « Facultad de Ciencias de la Salud » de l’Universidad Católica de Córdoba et de l'”Instituto de la Visión Cerro ». <p cl…

Representative Results

Dans la présente étude, toute la structure cornéenne a été analysée en profondeur à l’aide de techniques histologiques et d’études complémentaires du segment antérieur, telles que la tomographie par cohérence optique. L’analyse d’images par tomographie par cohérence optique des structures du segment antérieur montre un épithélium et un stroma normaux (Figure 1), avec des épaisseurs cornéennes centrale et périphérique de 160 μm et 106 μm ± 2 μm, respectivement. …

Discussion

La physiologie de la cicatrisation des plaies cornéennes est un équilibre entre la régénération tissulaire et le maintien de l’homéostasie. Une cicatrisation excessive des plaies peut entraîner une fibrose et des cicatrices, ce qui peut finalement entraîner la perte de la fonction des organes. Avec l’évolution rapide des interventions chirurgicales cornéennes, l’importance de comprendre la cicatrisation des plaies cornéennes et les événements physiologiques et pathologiques impliqués ne peut être sur…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Nous tenons à remercier l’ingénieur Rodrigo de la Fuente pour son aide précieuse et son soutien technique. Nous remercions également María Eugenia Corbela pour la narration et Priscilla Hazrún pour l’édition des figures. Hugo Luján nous a permis d’utiliser les installations du Centre de recherche et de développement en immunologie et maladies infectieuses (CIDIE).

Materials

Anesthesia Tododrogas
Eppendorf tubes Tododrogas
Excimer Laser Technolas 2022445
Fluorescein Poen
Forceps Ofcor 3339
Formaldehyde Tododrogas
Gloves Tododrogas
Ketamine  Sigma-Aldrich
Optical coherence tomography Optovue 659007
Proparacaine Poen
Scisors Ofcor 3336
Sterile drapes Soporte hospitalario
Sterile gauzes Soporte hospitalario
Syringes and needles Tododrogas
Xylazine  Sigma-Aldrich 

Referências

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Citar este artigo
Osaba, M., Gonzalez Castellanos, J. C., Sambuelli, G. M., Reviglio, V. E. Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing. J. Vis. Exp. (191), e63323, doi:10.3791/63323 (2023).

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