循環器疾患大型動物モデルにおける心臓の解剖技術と組織学的サンプリング
Summary
複雑な解剖学的構造のため、心臓サンプルの一貫して再現可能な解剖および採取プロトコルを実装するのは難しい場合があります。この原稿は、いくつかの標準的な心臓解剖プロトコルの重要な要素を提示し、肉眼検査アプローチと組織病理学的検査に一般的に使用されるサンプリング部位の両方を強調しています。
Abstract
標準的な肉眼検査とサンプリングは、大型動物で実施された心血管疾患の実験的研究の再現性と成功における重要な要素です。心臓の複雑な解剖学的構造、種間の違い、代償的および病理学的反応の種類を考慮すると、一貫したプロトコルを実装することは困難です。複数の解剖プロトコルの利用は通常、プロセクターの経験に合わせて調整されており、個人的な好みは引き続き実験的および観察者間の変動の原因となっています。ここでの目的は、心血管疾患のモデルとして、いくつかの一般的に使用される種(犬、豚、反芻動物、猫を含む)における心臓の主な解剖学的特徴とランドマーク、解剖プロトコル、および組織学的サンプリング標準を提示することです。
ここでは、2つの標準的な総検査プロトコルを示します。第一に、心臓と大血管を通る生理的な血流方向に従う流入流出法(犬、反芻動物、豚で頻繁に使用される)、第二に、4室解剖法(猫に例示)である。どちらの技術も、特定の実験状況においてあらゆる種に適応することができる。サンプリングプロトコルには、関心のあるすべての領域(洞房結節、心室、心室中隔、心房、弁、大動脈)が含まれ、適切に実施されれば、実験研究の再現性と信頼性の両方が向上します。
Introduction
複雑な解剖学的構造と初期の厳密さのために、心臓壁の厚さの評価を妨げる可能性があるため、心臓の肉眼検査は困難であり、いくつかの技術関連または解釈エラーが発生しやすくなります。これは、種間形態学的変異と、多くの臨床的、主要な心臓病(冠状動脈性心臓病、線維症、動脈炎、およびアミロイドーシスの初期症例を含む)が、本質的に組織学的病理である全体的な変化と関連していないという事実によって増幅されます。標準化された解剖および組織学的サンプル採取プロトコルは、観察者間の一貫性をもたらすと同時に、心血管疾患の実験的研究の比較可能性と再現性をもたらすことができます。
サンプルは、2匹の犬(Canis lupus familiaris)(3歳のオスのフレンチブルドッグと8歳のメスの雑種)、ネコ(Felis catus)(6歳、オスのヨーロッパショートヘア)、飼いならされたブタ(Sus scrofa domestic us)(1歳、オスのラージホワイト)、および牛(Bos taurus)(生後2か月のメスのホルスタイン)から収集されました。選択された種のそれぞれは、異なる疾患の心血管モデルとして特に使用されています。たとえば、犬は不整脈モデリングに適したモデルです。猫は肥大型心筋症(HCM)に好まれます、なぜならそれはHCMの有病率が最も高い種だからです。ブタは急性心筋梗塞のモデルとして使用されます。そして反芻動物は牧草地11で容易に見つけることができる毒素への彼らの暴露のために中毒のモデルとして使用されます。
この原稿では、実験的心血管疾患における心臓の肉眼的および組織学的検査を改善するように設計された、心臓の1つの剖検プロトコルと2つの解剖プロトコルが提示されています。記載されているプロトコルは、獣医学の教科書1,2,4,5,6,7,8,9,10,11,12、ジャーナル文献3,13,14、公式文書15、およびウェビナー16からの情報に基づいて開発されました。、17。この研究で使用されたサンプルは、定期的な剖検診断のためにUSAMVクルージュナポカの病理学部に提出された死体から採取されました。
Protocol
Representative Results
Discussion
現在のプロトコルを実行するときは、一貫した結果を得るために、いくつかの重要な手順を慎重に検討する必要があります。若い動物では、心臓の測定値は成人の測定値とは異なり(心室壁の厚さを含む)、一般的に、心臓は体重のより大きな割合を占めています11,12。心室肥大の程度は、一般的な体重式を適用して定量化でき、左心室と中隔の比率?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
何一つ。
Materials
| 0.9% saline solution | B. BRAUN MELSUNGEN AG | W04479004 | For washing all the blood, and blood clots from the heart. |
| 10% neutral buffered formalin (NBF) | Q Path | 11699404 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Bone cutting forceps | HELEN SRL | LS109HV | Sturdy instrument for cutting bone. |
| Cutting board | Ambition | 86304 | For an easier manipulation, and cutting the organs. |
| Decalcifying solution | Thermo Scientific TBD-2 | 6764004 | 1:1 mixture of 8% formic acid and hydrochloric acid. |
| Digital camera | Canon Inc. | PowerShot SX540 HS | For photographic, and videographic documentation. |
| Forceps | MKD-Medicale | 15-430 | Dissection instruments. |
| Histological cassettes | Q Path | 720-2215 | Materials for collecting histopathology samples. Dimensions: 3 × 2.5 × 0.4 cm |
| Knife | TEHNO FOOD COM SERV SRL | D2006/15 | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Latex gloves | MKD-Medicale | SANTEX-S | Protection equipment. |
| Mask | MKD-Medicale | 21221 | Protection equipment. |
| Petri dishes | MKD-Medicale | 0598-1V | Materials for collecting ancillary testing samples. |
| Plastic recipients | Corning Gosselin | TP200-02 | Materials for collecting histopathology samples. |
| Scale | ESPERANZA | MEEKS008 | For weighing the organs. |
| Scale | White Deals | 72 | For weighing the subjects. |
| Scalpel | MKD-Medicale | 10322E | Sharp blade for cutting soft tissue. |
| Scissors | MKD-Medicale | 13-260 | Dissection instruments. |
| Scrub | MKD-Medicale | 410100-52 | Protection equipment. |
| Syringes | MKD-Medicale | 10573EU | Materials for collecting ancillary testing samples. |
Referências
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