זילוח מכונת Normothermic ex vivo (NEVP) כמעט ולא נחקר לשימור אלושתלי לבלב. אנו מציגים טכניקת שימור חדשנית לאלושתלי לבלב לפני ההשתלה.
השתלת לבלב (PTx) היא טיפול מרפא לאנשים החיים עם הנטל של אבחנה של סוכרת (DM). עם זאת, בשל מחסור באיברים ומספר גדל והולך של חולים הרשומים עבור PTx, יש צורך באסטרטגיות חדשות כדי להגדיל את מספר השתלים הזמינים להשתלה.
אחסון קר סטטי (SCS) נחשב לתקן הזהב עבור איברים סטנדרטיים קריטריונים. עם זאת, תורמי קריטריונים סטנדרטיים (SCD) הופכים נדירים ויש צורך דחוף באסטרטגיות חדשות שיכולות להגדיל את שיעור קבלת האיברים מתורמי קריטריונים מורחבים (ECD).
זילוח Normothermic ex vivo (NEVP) היא אחת האסטרטגיות שהפכו פופולריות יותר ויותר במהלך שני העשורים האחרונים. שיטת שימור זו כבר שימשה בהצלחה באיברים אחרים (כבד, כליות וריאות) אך נחקרה באופן מינימלי בהשתלת לבלב. המאמרים המעטים המתארים את השיטה ללבלב מראים הצלחה מועטה, בצקת היא אחת הבעיות העיקריות. כתב היד הבא מתאר את שיטת NEVP המוצלחת ואת ההתקנה שפותחה על ידי הקבוצה שלנו כדי לנקב לבלב חזירים.
על פי הדו”ח הלאומי לסטטיסטיקה של סוכרת, סך של 28.7 מיליון אנשים בארצות הברית חיו עם אבחנה של סוכרת בשנת 2019. כ-1.8 מיליון מתוכם אובחנו עם סוכרת מסוג1. PTx הוא כיום הטיפול המרפא היעיל ביותר והיחיד לסוכרת מסובכת מסוג 1 מליטוס2, והוא הליך שגם מעלה את תוחלת החיים וגם את איכות החיים של חולים אלה3.
הלבלב הוא האיבר המושלך לרוב לאחר שליפה מתורמים שנפטרו4. עם מחסור מתמשך באיברים וזמני רשימת ההמתנה המתארכים, מרכזי השתלות משתמשים ביותר שתלי לבלב מ- ECD, כולל תרומה לאחר מוות במחזור הדם (DCD)5. יש צורך באסטרטגיות לשימור, ניקוב, הערכה ותיקון בטוחים של אלושתלים המגיעים מתורמים בעלי קריטריונים מורחבים.
NEVP הוכיח הצלחה בשימור ריאות6, כבד 7,8, והשתלות כליה 9,10. עם זאת, מספר הקבוצות העובדות על זילוח מכונה ללבלב, הן היפותרמית והן נורמותרמית, ומספר הפרסומים, הם מעטים ומוגבלים עקב בצקת השתל ופציעה11,12,13,14.
מטרת מחקר זה היא להציג פרוטוקול לזילוח לבלב נורמותרמי ex vivo (NEVPP), תוך שימוש במודל חזירי במטרה לספק בסופו של דבר פלטפורמה לשימור ממושך, הערכת איברים ותיקון לפני השתלה. זה יאפשר לקבוצות מחקר אחרות להקים מודל זילוח לחקר allografts הלבלב.
מחקר זה מדגים כי ניתן להשיג NEVPP יציב עבור אלושתלי לבלב עם נזק היסטולוגי מינימלי לאחר 3 שעות של זילוח עם ההתקנה שהוצגה קודם לכן. פרמטרים של זילוח כמו זרימת עורקים, לחץ, pH, HCO3 ו-Na נשארים יציבים במהלך הזילוח, וראינו ירידה וייצוב של K ולקטט.
יש חשיבות קריטית לתפעל את השתל כמה שפחות במהלך הרכש, הכנת השולחן האחורי והזילוח. כמו כן, חשוב מאוד לשמור על שליטה הדוקה של לחץ העורק. מכיוון שהלבלב הוא איבר בלחץ נמוך, עלייה בלחץ עלולה לגרום נזק בלתי הפיך לאיבר.
הכנת שולחן אחורי למחקר זה שונה מהכנת שתלים אנושיים (איור 2A). מכיוון שהלבלב היה האיבר היחיד שנרכש מהחזירים, יכולנו לקחת את החלק של אבי העורקים הכולל את גזע הצליאק ואת העורק המזנטרי העליון. באשר לווריד הפורטל, בוצעה הרחבה באמצעות וריד iliac. במקרה של שתלים אנושיים, הכנת השולחן האחורי תצטרך להיעשות באותו אופן שבו היא נעשית להשתלה, באמצעות שתלים איליאקים לשחזור עורקים והארכת שער19.
שיטה זו עשויה להיות מוגבלת על-ידי מורכבות ההתקנה. החלטנו להוסיף קלטת דיאליזה לאחר ששמנו לב לבצקת קשה של השתל כאשר נעשה בלעדיו. עבור ניסויים אלה נבנה גם תא עוגב בהתאמה אישית, שהכיל מקור חימום חיצוני שהוכח כחיוני לזילוח אופטימלי של השתלים.
ישנם מעט מחקרים המתארים זילוח לבלב נורמותרמי ex vivo . ברוב המחקרים הללו, בצקת נראית כגורם המגביל העיקרי. למיטב ידיעתנו, שיטה זו היא הדיווח היחיד על שימוש בקלטת דיאליזה להדברת בצקת.
זילוח Normothermic ex vivo ללבלב עדיין בחיתוליו בהשוואה לאיברים אחרים. הפרוטוקולים הנוכחיים מתמקדים בתורמי קריטריונים מורחבים (DCD), שיפור פרפוזטים, זמני זילוח ארוכים יותר וסמנים ביולוגיים להערכת נזק לשתל במהלך זילוח. רמות עמילאז וליפאז אינן נראות כסמנים אמינים, שכן אנו משתמשים במערכת סגורה, ולא נראה שהן מתואמות להיסטופתולוגיה20. עד כה, הקבוצה שלנו הצליחה גם להשתיל allografts לבלב לאחר זילוח עם תוצאות טובות18.
עם שיפורים מתמשכים בטכנולוגיה זו, אנו מקווים שטכנולוגיה זו תהיה ישימה להשתלות קליניות ותאפשר הערכה ותיקון של אלושתלי לבלב. יש לקוות שהתוצאה תהיה בסופו של דבר ניצול רב יותר של השתלים, קיצור זמן ההמתנה לחולים ותוצאות טובות יותר למטופלים
The authors have nothing to disclose.
ללא.
Alburex 5 | CSL Behring AG | 187337 | 25 g of Albumin (human) in 500 mL of buffered diluent |
Aprotinin from bovine lung | Sigma-Aldrich | A1153 | |
Belzer UW Cold storage solution | Bridge to life Ltd | 4055 | |
Calcium gluconate (10%) | Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON) | C360019 | |
Composelect (blood collection bags) | Fresenius Kabi Canada Ltd | PQ31555 | |
Epoprostenol | GlaxoSmithKline Inc. | 218761 | |
Heart lung machine, Stöckert S3 | Sorin Group Canada Inc. | Custom made | Centrifugal pump, roller pump, control panel (sensors for pressure, flow, temperature, bubbles, and level), oxygen blender, heater unit |
Hemoflow, Fresenius Polysulfone | Fresenius Medical Care North America | 0520165A | |
Heparin (10000 IU/10 mL) | Fresenius Kabi Canada Ltd | C504710 | |
Lactated Ringer's solution | Baxter | JB2324 | |
Neonatal cardiopulmonary bypass techonolgy | Sorin Group Canada Inc | Custom made | Dideco perfusion tubing systems, centrifugal blood pump (Revolution), arterial blood filter, microporous hollow fibre memebrane oxygenator), cannulas |
Pancreas chamber | Custom made | With external heater | |
Percutaneous Sheath Introducer Set with Integral Hemostasis Valve/side Port for use with 7-7.5 Fr Catheters | Arrow International LLC | SI-09880 | |
Sodium bicarbonate (8.4%) | Fresenius Kabi Canada Ltd | C908950 | |
Solu-Medrol | Pfizer Canada Inc. | 52246-14-2 | |
Steen | XVIVO | 19004 | |
Urethral catheter | Bard Inc | 86020 | 20 Fr, malecot model drain |
Verapamil | Sandoz Canada Inc. | 8960 |