Summary

एमिग्डाला के इलेक्ट्रिकल किंडलिंग द्वारा टेम्पोरल लोब एपिलेप्सी माउस मॉडल बनाने के लिए बाइपोलर इलेक्ट्रोड का उपयोग करना

Published: June 29, 2022
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Summary

एमिग्डाला टेम्पोरल लोब मिर्गी में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जो इस संरचना से उत्पन्न होता है और फैलता है। यह लेख रिकॉर्डिंग और उत्तेजक कार्यों दोनों के साथ गहरे मस्तिष्क इलेक्ट्रोड के निर्माण का विस्तृत विवरण प्रदान करता है। यह एमिग्डाला से उत्पन्न होने वाले मेडियल टेम्पोरल लोब मिर्गी के एक मॉडल का परिचय देता है।

Abstract

एमिग्डाला दौरे की सबसे आम उत्पत्ति में से एक है, और मिर्गी के चित्रण के लिए एमिग्डाला माउस मॉडल आवश्यक है। हालांकि, कुछ अध्ययनों ने प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का विस्तार से वर्णन किया है। यह पेपर द्विध्रुवी इलेक्ट्रोड निर्माण की एक विधि की शुरूआत के साथ, एमिग्डाला इलेक्ट्रिकल किंडलिंग मिर्गी मॉडल बनाने की पूरी प्रक्रिया को दर्शाता है। यह इलेक्ट्रोड उत्तेजना और रिकॉर्डिंग के लिए अलग-अलग इलेक्ट्रोड प्रत्यारोपित करने के कारण मस्तिष्क की चोट को कम करते हुए उत्तेजित और रिकॉर्ड दोनों कर सकता है। दीर्घकालिक इलेक्ट्रोएन्सेफलोग्राम (ईईजी) रिकॉर्डिंग उद्देश्यों के लिए, केबल टैंगल्स और गिरने के कारण रिकॉर्ड रुकावट को खत्म करने के लिए स्लिप रिंग्स का उपयोग किया गया था।

19.83 ± 5.742 बार के लिए बेसोलेटरल एमिग्डाला (एपी: 1.67 मिमी, एल: 2.7 मिमी, वी: 4.9 मिमी) के आवधिक उत्तेजना (60 हर्ट्ज, 1 एस हर 15 मिनट) के बाद, छह चूहों में पूर्ण किंडलिंग देखी गई (रेसीन के पैमाने द्वारा वर्गीकृत तीन निरंतर ग्रेड वी एपिसोड के प्रेरण के रूप में परिभाषित)। पूरी किंडलिंग प्रक्रिया के दौरान एक इंट्राक्रैनियल ईईजी दर्ज किया गया था, और 20-70 सेकंड तक चलने वाले एमिग्डाला में मिर्गी का निर्वहन देखा गया था। इसलिए, यह एमिग्डाला से उत्पन्न मिर्गी के मॉडलिंग के लिए एक मजबूत प्रोटोकॉल है, और विधि टेम्पोरल लोब मिर्गी में एमिग्डाला की भूमिका को प्रकट करने के लिए उपयुक्त है। यह शोध मेसिअल टेम्पोरल लोब मिर्गी और उपन्यास एंटीपीलेप्टोजेनिक दवाओं के तंत्र पर भविष्य के अध्ययन में योगदान देता है।

Introduction

टेम्पोरल लोब मिर्गी (टीईएल) मिर्गी का सबसे प्रचलित प्रकार है और इसमें दवा प्रतिरोधी मिर्गी में रूपांतरण का उच्च जोखिम है। सर्जरी, जैसे कि चयनात्मक एमिग्डालोहिप्पोकैम्पेक्टोमी, टीएलई के लिए एक प्रभावी उपचार है, और रोग के एपिलेप्टोजेनेसिस और आईसीटीजेनेसिस अभी भी जांच के अधीन हैं 1,2. टीईएल के रोगजनन को न केवल हिप्पोकैम्पस में बल्कि एमिग्डाला 3,4 में भी बड़े पैमाने पर दिखाया गया है। उदाहरण के लिए, एमिग्डाला स्केलेरोसिस और एमिग्डाला वृद्धि दोनों को अक्सर टीईएल दौरे 5,6 की उत्पत्ति के रूप में रिपोर्ट किया गया है। एमिग्डाला के महत्व को कम करके नहीं आंका जा सकता है; एपिलेप्टोजेनेसिस के अध्ययन के लिए एक एमिग्डाला मॉडल आवश्यक है, और इस मॉडल का एक स्पष्ट चित्रण तत्काल आवश्यक है।

पशु मॉडल में बरामदगी को प्रेरित करने के लिए कई दृष्टिकोण प्रस्तावित किए गए हैं। अतीत में, कॉन्वल्सेंट दवाओं को प्रारंभिक चरण 7 में इंट्रापरिटोनियल रूप से इंजेक्ट कियागया था। यद्यपि यह विधि सुविधाजनक थी, मिर्गी फॉसी का स्थान अनिश्चित था। स्टीरियोटैक्टिक तकनीक और एक विस्तृत पशु मस्तिष्क एटलस के विकास के साथ, स्थानीयकरणकी समस्या को हल करने के लिए इंट्राक्रैनील दवा इंजेक्शन लागू किया गया था। हालांकि, तीव्र चरण के दौरान गंभीर दौरे के लिए हस्तक्षेप की कमी के परिणामस्वरूप उच्च मृत्यु दर हुई, और पुरानी सहज दौरे अस्थिर अंतःस्रावी और जब्ती आवृत्ति 9,10 की समस्या के साथ थे। अंत में, विद्युत किंडलिंग विधि विकसित की गई थी; यह विधि समय-समय पर विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों को कई बार उत्तेजित करती है, जिससे स्थान और शुरुआतके समय 11 दोनों के निश्चित नियंत्रण के साथ दौरे को प्रेरित किया जा सकता है।

इस विधि का एक लाभ यह है कि इलेक्ट्रोड का इंट्राक्रैनील आरोपण न्यूनतम इनवेसिव12 है। इसके अलावा, दौरे की गंभीरता उत्तेजनाओं की समाप्ति से नियंत्रित होती है, जिससे दौरे के कारण होने वाली मृत्यु दर कम हो जाती है। इन परिवर्तनों ने पिछले दृष्टिकोणों की कमियों को हल किया। विशेष रूप से, यह मॉडल पर्याप्त रूप से मानव दौरे की नकल कर सकता है और एसईको जल्दी से प्रेरित करने की क्षमता के कारण स्थिति मिर्गी (एसई) के अध्ययन के लिए विशेष रूप से उपयुक्त है। इसका उपयोग मिर्गी विरोधी दवा स्क्रीनिंग14 और मिर्गी के तंत्र पर अध्ययन में भी किया जा सकता है। अंत में, यह अच्छी तरह से ज्ञात है कि एमिग्डाला मेमोरी मॉड्यूलेशन, इनाम प्रसंस्करण और भावना15 के साथ निकटता से जुड़ा हुआ है। मिर्गी के रोगियों में इन मानसिक कार्यों के विकार अक्सर सामने आते हैं और इस प्रकार, मिर्गी16 में भावनात्मक समस्याओं का अध्ययन करने के लिए एमिग्डाला मिर्गी मॉडल एक बेहतर विकल्प हो सकता है।

Protocol

इस प्रयोग को जुआनवु अस्पताल, कैपिटल मेडिकल यूनिवर्सिटी की प्रायोगिक पशु नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। सभी चूहों को जुआनवु अस्पताल, कैपिटल मेडिकल यूनिवर्सिटी की पशु प्रयोगशाला में रखा ग?…

Representative Results

इलेक्ट्रोड और सर्किट ईईजी को दर्ज करने और उत्तेजना के रूप में कार्य करने में सक्षम बनाते हैं (चित्रा 1); यह सेटअप रिकॉर्डिंग और उत्तेजक इलेक्ट्रोड को अलग-अलग प्रत्यारोपित करने की जटिलता से ब?…

Discussion

मिर्गी कई अभिव्यक्तियों और विविध कारणों के साथ बीमारियों का एक समूहहै; यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि सभी प्रकार के मिर्गी के लिए किसी भी एकल मॉडल का उपयोग नहीं किया जा सकता है, और शोधकर्ताओं को अप…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

अनुसंधान को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (नंबर 82030037, 81871009) और बीजिंग नगर स्वास्थ्य आयोग (11000022टी000004444685) द्वारा समर्थित किया गया था। हम इस पांडुलिपि की तैयारी के दौरान अपनी भाषाई सहायता के लिए TopEdit (www.topeditsci.com) को धन्यवाद देते हैं।

Materials

Alexa Fluor 488-conjugated Donkey anti-Rabbit IgG invitrogen A-21206
c-Fos antibody ab222699
Cranial drill SANS SA302
dental cement NISSIN
EEG recording and stimulation equipment Neuracle Technology (Changzhou) Co., Ltd NSHHFS-210803
lead-free tin wire BAKON
Pin header/Female header XIANMISI spacing of 1.27 mm
Silver wire A-M systems 786000
Slip ring Senring Electronics Co.,Ltd SNM008-04
Tungsten wire A-M systems 796000
ultrafine multi-stand wire Shenzhen Chengxing wire and cable UL10064-FEP
welding equipment BAKON BK881

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Citar este artigo
Lu, Y., Dai, Y., Ou, S., Miao, Y., Wang, Y., Liu, Q., Wang, Y., Wei, P., Shan, Y., Zhao, G. Using a Bipolar Electrode to Create a Temporal Lobe Epilepsy Mouse Model by Electrical Kindling of the Amygdala. J. Vis. Exp. (184), e64113, doi:10.3791/64113 (2022).

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